| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-15页 |
| 缩略词 | 第15-16页 |
| 引言 | 第16-18页 |
| 第一章 成纤维细胞热损伤模型的建立和成纤维细胞热损伤PPARβ表达的变化 | 第18-38页 |
| ·材料 | 第18-23页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要试剂配制方法 | 第19-22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·细胞株和动物 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-29页 |
| ·细胞培养 | 第23-25页 |
| ·成纤维细胞热损伤模型的制作 | 第25页 |
| ·成纤维细胞生长曲线和生存率测定 | 第25-26页 |
| ·一般形态变化的观察 | 第26页 |
| ·Western blot分析热损伤后成纤维细胞中PPARβ蛋白的表达 | 第26-29页 |
| ·统计方法 | 第29页 |
| ·实验结果 | 第29-35页 |
| ·正常培养的原代小鼠真皮成纤维细胞和NIH3T3细胞 | 第29-30页 |
| ·52℃30s热损伤后成纤维细胞生长曲线 | 第30-31页 |
| ·52℃30s热损伤后成纤维细胞生存率 | 第31页 |
| ·倒置显微镜下观察热损伤成纤维细胞 | 第31-32页 |
| ·电镜下观察热损伤成纤维细胞 | 第32-34页 |
| ·52℃30s热损伤后成纤维细胞PPARβ蛋白含量的测定 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| ·结论 | 第37-38页 |
| 第二章 PPARβ对热损伤变性的成纤维细胞结构和增殖能力影响的实验研究 | 第38-63页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·主要试剂 | 第38-39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-46页 |
| ·RNA干扰 | 第39-40页 |
| ·PPARβ特异激动剂干预 | 第40页 |
| ·实验分组 | 第40-41页 |
| ·RT-PCR分析RNA干扰后和PPARβ特异性激动剂干预后成纤维细胞中PPARβmRNA的表达 | 第41-44页 |
| ·Western blot分析RNA干扰后和PPARβ特异性激动剂干预后成纤维细胞中PPARβ蛋白的表达 | 第44页 |
| ·透射电镜观察热损伤成纤维细胞形态的改变 | 第44页 |
| ·流式细胞仪检测热损伤成纤维细胞细胞周期 | 第44-45页 |
| ·Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达 | 第45页 |
| ·统计分析 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-59页 |
| ·PPARβ shRNA转染后成纤维细胞PPARβmRNA的变化 | 第46-47页 |
| ·PPARβshRNA转染后成纤维细胞PPARβ蛋白的变化 | 第47-49页 |
| ·电镜观察RNA干扰和特异激动剂干预的成纤维细胞热损伤变性后的结构 | 第49-51页 |
| ·PPARβ基因对成纤维细胞热损伤后周期的影响 | 第51-55页 |
| ·PPARβ基因对成纤维细胞热损伤后PCNA蛋白表达的影响 | 第55-59页 |
| ·讨论 | 第59-62页 |
| ·结论 | 第62-63页 |
| 第三章 HSF1调控PPARβ表达的分子机制的初步探讨 | 第63-72页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·主要试剂 | 第63页 |
| ·主要仪器 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-66页 |
| ·细胞转染 | 第63-64页 |
| ·实验分组 | 第64页 |
| ·RT-PCR分析转染后成纤维细胞中HSF1mRNA的表达和热损后成纤维细胞中PPARβ mRNA的表达 | 第64-66页 |
| ·Western blot分析转染后成纤维细胞中HSF1蛋白的表达和热损后成纤维细胞PPARβ蛋白的表达 | 第66页 |
| ·统计分析 | 第66页 |
| ·结果 | 第66-70页 |
| ·稳定转染HSF1的NIH3T3细胞HSF1 mRNA的变化 | 第66-67页 |
| ·稳定转染HSF1的NIH3T3细胞HSF1蛋白的变化 | 第67-68页 |
| ·上调HSF1的NIH3T3细胞热损伤后PPARβ mRNA的变化 | 第68-69页 |
| ·上调HSF1的成纤维细胞热损伤后PPARβ蛋白的变化 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| ·结论 | 第71-72页 |
| 全文总结 | 第72-73页 |
| 展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 综述 | 第81-103页 |
| 参考文献 | 第93-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 攻读博士期间主要研究成果 | 第104页 |
