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细胞色素P450介导的环氧化生物催化

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第一章 文献综述第9-33页
   ·环氧化合物第9-25页
     ·化学合成环氧化合物第9-13页
     ·生物合成环氧化合物第13-23页
     ·甾体类环氧化合物第23-25页
   ·细胞色素 P450第25-27页
   ·定向进化第27-30页
     ·定向进化概述第27-29页
     ·细胞色素 P450 BM-3 的定向进化研究第29-30页
   ·论文选题及研究内容第30-33页
     ·论文选题第30-31页
     ·研究内容第31-33页
第二章 环氧酶基因的克隆、原核表达及酶活力检测第33-57页
   ·材料和方法第33-48页
     ·菌株、质粒和引物第33-35页
     ·培养基第35-36页
     ·常用溶液配制第36-37页
     ·常用酶和生化试剂第37页
     ·分子生物学辅助软件第37页
     ·实验试剂及仪器第37-40页
     ·酵母基因组 DNA 的小量制备第40-41页
     ·大肠杆菌感受态的制备及转化第41页
     ·转化子鉴定第41-42页
     ·重组蛋白的原核表达、纯化第42-44页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS)第44-46页
     ·重组蛋白酶活测定第46-48页
   ·结果与讨论第48-56页
     ·环氧酶基因重组质粒的构建第48-51页
     ·环氧酶基因的原核表达、SDS-PAGE 电泳和纯化第51-54页
     ·环氧酶酶活力的检测第54-56页
   ·本章小结第56-57页
第三章 环氧化合物高通量比色筛选方法的建立第57-67页
   ·材料和方法第57-60页
     ·材料第57-58页
     ·方法第58-60页
   ·结果与讨论第60-66页
     ·Picric acid assay 方法建立第60-61页
     ·有机溶剂对 Picric acid assay 的影响第61页
     ·甾醇环氧物浓度对 Picric acid assay 的影响第61-63页
     ·烯烃环氧物浓度对 Picric acid assay 的影响第63-64页
     ·反应时间对 Picric acid assay 的影响第64-65页
     ·Picric acid assay 干扰实验第65-66页
   ·本章小结第66-67页
第四章 细胞色素P450单加氧酶的定向进化第67-79页
   ·材料和方法第67-72页
     ·材料第67-68页
     ·方法第68-72页
   ·结果与讨论第72-78页
     ·酶基因突变文库构建第72-74页
     ·突变文库的筛选第74-76页
     ·突变株分析第76-78页
     ·亲本型和突变型 P450 酶活分析第78页
   ·本章小结第78-79页
第五章 立体选择性环氧化生物催化第79-93页
   ·材料和方法第79-83页
     ·材料第79-81页
     ·方法第81-83页
   ·结果与讨论第83-92页
     ·甾醇化合物薄层色谱法分析第83-86页
     ·苯乙烯的环氧化生物催化第86-88页
     ·环己烯的环氧化生物催化第88-90页
     ·黄体酮的环氧化生物催化第90-92页
   ·本章小结第92-93页
第六章 结论与展望第93-95页
   ·主要结论第93-94页
   ·研究展望第94-95页
参考文献第95-105页
发表论文和参加科研情况说明第105-106页
致谢第106页

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