摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-33页 |
·环氧化合物 | 第9-25页 |
·化学合成环氧化合物 | 第9-13页 |
·生物合成环氧化合物 | 第13-23页 |
·甾体类环氧化合物 | 第23-25页 |
·细胞色素 P450 | 第25-27页 |
·定向进化 | 第27-30页 |
·定向进化概述 | 第27-29页 |
·细胞色素 P450 BM-3 的定向进化研究 | 第29-30页 |
·论文选题及研究内容 | 第30-33页 |
·论文选题 | 第30-31页 |
·研究内容 | 第31-33页 |
第二章 环氧酶基因的克隆、原核表达及酶活力检测 | 第33-57页 |
·材料和方法 | 第33-48页 |
·菌株、质粒和引物 | 第33-35页 |
·培养基 | 第35-36页 |
·常用溶液配制 | 第36-37页 |
·常用酶和生化试剂 | 第37页 |
·分子生物学辅助软件 | 第37页 |
·实验试剂及仪器 | 第37-40页 |
·酵母基因组 DNA 的小量制备 | 第40-41页 |
·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第41页 |
·转化子鉴定 | 第41-42页 |
·重组蛋白的原核表达、纯化 | 第42-44页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS) | 第44-46页 |
·重组蛋白酶活测定 | 第46-48页 |
·结果与讨论 | 第48-56页 |
·环氧酶基因重组质粒的构建 | 第48-51页 |
·环氧酶基因的原核表达、SDS-PAGE 电泳和纯化 | 第51-54页 |
·环氧酶酶活力的检测 | 第54-56页 |
·本章小结 | 第56-57页 |
第三章 环氧化合物高通量比色筛选方法的建立 | 第57-67页 |
·材料和方法 | 第57-60页 |
·材料 | 第57-58页 |
·方法 | 第58-60页 |
·结果与讨论 | 第60-66页 |
·Picric acid assay 方法建立 | 第60-61页 |
·有机溶剂对 Picric acid assay 的影响 | 第61页 |
·甾醇环氧物浓度对 Picric acid assay 的影响 | 第61-63页 |
·烯烃环氧物浓度对 Picric acid assay 的影响 | 第63-64页 |
·反应时间对 Picric acid assay 的影响 | 第64-65页 |
·Picric acid assay 干扰实验 | 第65-66页 |
·本章小结 | 第66-67页 |
第四章 细胞色素P450单加氧酶的定向进化 | 第67-79页 |
·材料和方法 | 第67-72页 |
·材料 | 第67-68页 |
·方法 | 第68-72页 |
·结果与讨论 | 第72-78页 |
·酶基因突变文库构建 | 第72-74页 |
·突变文库的筛选 | 第74-76页 |
·突变株分析 | 第76-78页 |
·亲本型和突变型 P450 酶活分析 | 第78页 |
·本章小结 | 第78-79页 |
第五章 立体选择性环氧化生物催化 | 第79-93页 |
·材料和方法 | 第79-83页 |
·材料 | 第79-81页 |
·方法 | 第81-83页 |
·结果与讨论 | 第83-92页 |
·甾醇化合物薄层色谱法分析 | 第83-86页 |
·苯乙烯的环氧化生物催化 | 第86-88页 |
·环己烯的环氧化生物催化 | 第88-90页 |
·黄体酮的环氧化生物催化 | 第90-92页 |
·本章小结 | 第92-93页 |
第六章 结论与展望 | 第93-95页 |
·主要结论 | 第93-94页 |
·研究展望 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-105页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第105-106页 |
致谢 | 第106页 |