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不同转移潜能的卵巢癌裸鼠移植瘤和临床组织新生淋巴管形成与淋巴结转移的关系研究

英文缩略词第1-9页
摘要第9-13页
ABSTRACT第13-19页
第一章 利用荧光蛋白标记的不同转移潜能的卵巢癌细胞构建裸鼠爪垫移植瘤模型第19-49页
 1.前言第19-20页
 2.材料及相关设备第20-23页
   ·细胞、慢病毒液、实验动物第20页
   ·试剂、耗材及设备第20-22页
   ·部分试剂的配制第22-23页
 3.试验方法第23-31页
   ·细胞培养的方法第23-25页
   ·慢病毒感染 SKOV3 及 SKOV3-PM4 细胞第25-26页
   ·流式细胞仪分选 GFP+细胞第26-27页
   ·裸鼠爪垫转移瘤模型的建立第27-30页
     ·细胞培养及裸鼠爪垫接种第27-28页
     ·动态记录裸鼠体重变化及瘤体体积变化第28页
     ·小动物活体成像仪动态追踪转移路径第28页
     ·免疫组化法检测裸鼠淋巴结 CA125 的表达第28-30页
   ·统计学方法第30-31页
 4.结果第31-41页
   ·慢病毒感染 SKOV3 及 SKOV3-PM4 流式分选结果第31-32页
   ·裸鼠活体成像追踪结果第32-34页
   ·裸鼠成瘤情况及淋巴结转移结果第34-40页
     ·裸鼠成瘤率及转移率比较第34-35页
     ·淋巴结转移灶分布比较第35-37页
     ·以 CA-125 为标记分析各组淋巴结转移情况第37-40页
   ·裸鼠体重及瘤体体积变化第40-41页
 5.讨论第41-46页
 参考文献第46-49页
第二章 不同淋巴结转移潜能的卵巢癌细胞在荷瘤裸鼠及临床组织中新生淋巴管形成及其作用第49-89页
 1.前言第49-50页
 2.材料及相关设备第50-53页
   ·组织标本来源第50-51页
     ·动物组织标本第50页
     ·卵巢癌临床病理标本第50-51页
   ·试剂、耗材及相关设备第51-53页
     ·试剂第51-52页
     ·耗材及设备第52页
     ·引物设计与合成第52-53页
 3.试验方法第53-61页
   ·免疫组化法检测裸鼠移植瘤微淋巴管、微血管生成及 VEGF-C、VEGF-D 表达情况第53-55页
     ·免疫组化染色步骤第53页
     ·免疫组化染色结果判定第53-55页
     ·淋巴管及血管的计数方法第55页
   ·qRT-PCR 检测淋巴管生成相关因子 mRNA 在移植瘤的表达第55-59页
     ·组织中总 RNA 抽提第55-57页
     ·cDNA 合成第57页
     ·实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)第57-59页
   ·透射电镜观察新生淋巴管的超微结构第59-61页
     ·半薄切片的制备第59-60页
     ·超薄切片的制备第60-61页
   ·统计学方法第61页
 4.结果第61-80页
   ·动物实验第61-70页
     ·裸鼠癌组织新生淋巴管及新生血管生成情况第61-64页
     ·裸鼠移植瘤 VEGF-C、VEGF-D 蛋白的表达第64-65页
     ·VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3 基因 mRNA 在裸鼠组织的表达第65-68页
     ·透射电镜下移植瘤组织新生淋巴管的超微结构第68-70页
   ·临床卵巢癌组织新生淋巴管和新生血管形成情况第70-80页
     ·VEGF-C、VEGF-D 表达情况第70-73页
     ·血管密度(MVD)与淋巴管密度(LVD)的评估第73-75页
     ·VEGF-C、VEGF-D 的表达与卵巢癌临床病理资料的关系第75-76页
     ·MVD、LVD 与临床病理资料的关系第76-79页
     ·MVD、LVD 与 VEGF-C、VEGF-D 表达的相关性分析第79-80页
 5.讨论第80-85页
 参考文献第85-89页
第三章 肿瘤淋巴道转移与淋巴管生成关系的研究进展(综述)第89-103页
 1.淋巴管的形态与功能第89-90页
 2.肿瘤相关淋巴管的生成及其分子调节机制第90-93页
   ·淋巴管生成因子第90-92页
   ·淋巴管生成相关因子的调节机制第92-93页
 3.肿瘤淋巴管生成与转移的关系第93-96页
   ·肿瘤淋巴管的生成及分布特点第93-94页
   ·肿瘤淋巴管的播散机制第94-96页
 4.肿瘤相关淋巴管生成的治疗进展第96-97页
 参考文献第97-103页
全文小结第103-104页
攻读学位期间参与的课题及发表的学术论文第104-105页
致谢第105-106页

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