目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-19页 |
·课题的提出 | 第10页 |
·前人研究进展 | 第10-19页 |
·中国甜柿及其分类学地位 | 第10-11页 |
·中国甜柿单宁成分 | 第11-12页 |
·柿单宁前体生物合成、转运与聚合途径 | 第12-15页 |
·中国甜柿自然脱涩机理 | 第15-16页 |
·基于miRNA的转录后调控途径 | 第16-19页 |
·miRNA概念和分布 | 第16页 |
·miRNA生物合成和作用机制 | 第16-17页 |
·高通量测序技术在植物miRNA鉴定中的应用 | 第17-18页 |
·植物miRNA与PAs生物合成调控 | 第18-19页 |
·研究内容与目的 | 第19页 |
2 材料与方法 | 第19-26页 |
·试材与取样 | 第19页 |
·试剂与仪器 | 第19-20页 |
·主要试剂盒 | 第19页 |
·其他主要试剂 | 第19-20页 |
·克隆载体及宿主菌株 | 第20页 |
·主要仪器设备 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-26页 |
·柿单宁含量测定 | 第20-21页 |
·印迹法与品尝法判断单宁含量 | 第20页 |
·Folin-Ciocalteu法测定单宁含量 | 第20-21页 |
·文库建立及测序 | 第21页 |
·测序数据基本生物信息学分析 | 第21页 |
·已知miRNA鉴定与novel miRNA预测 | 第21-22页 |
·Novel miRNA筛选与验证 | 第22-24页 |
·总RNA提取与反转录 | 第22-23页 |
·Novel miRNA PCR扩增 | 第23页 |
·Novel miRNA扩增片段回收与连接载体 | 第23-24页 |
·Novel miRNA重组子转化大肠杆菌 | 第24页 |
·阳性克隆片段筛选与测序 | 第24页 |
·差异表达miRNA分析 | 第24页 |
·靶基因预测及GO功能注释 | 第24-25页 |
·差异表达miRNA qRT-PCR验证 | 第25-26页 |
3 结果与分析 | 第26-40页 |
·不同脱涩类型果实发育过程中单宁含量变化动态 | 第26-29页 |
·sRNA测序数据分析 | 第29-31页 |
·中国甜柿conserved miRNA鉴定 | 第31-33页 |
·中国甜柿novel miRNA预测 | 第33页 |
·miRNA差异表达分析 | 第33页 |
·差异表达miRNA靶基因预测与GO功能注释 | 第33-36页 |
·与单宁累积和自然脱涩相关miRNA表达分析 | 第36-38页 |
·miRNA靶基因表达验证 | 第38页 |
·差异表达miRNA qRT-PCR分析 | 第38-40页 |
4 讨论 | 第40-44页 |
·柿miRNA鉴定及其靶基因预测 | 第40-42页 |
·与中国甜柿单宁合成和与自然脱涩脱涩相关miRNA | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-51页 |
附录Ⅰ miRNAs实时定量引物序列 | 第51-52页 |
附录Ⅱ 新miRNA鉴定 | 第52-57页 |
附录Ⅲ 差异表达miRNA与靶基因GO注释 | 第57-59页 |
作者简历及在校期间的科研实践 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |