| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 绪论 | 第10-23页 |
| ·研究背景 | 第10-13页 |
| ·铁元素的特性和生物学功能 | 第10-11页 |
| ·铁的稳态形式 | 第11页 |
| ·铁的吸收机制 | 第11-12页 |
| ·铁载体的合成和利用 | 第12-13页 |
| ·铁载体的分类 | 第13-15页 |
| ·铁载体的运输系统 | 第15-18页 |
| ·铁载体的运输机制 | 第16页 |
| ·铁受体蛋白 | 第16-17页 |
| ·铁载体的运输系统调控机制 | 第17-18页 |
| ·铁载体的检测方法 | 第18-21页 |
| ·通用CAS检测法 | 第19-20页 |
| ·CAS检测法的改进 | 第20-21页 |
| ·铁载体的生物学功能 | 第21页 |
| ·铁载体在临床方面的应用 | 第21页 |
| ·铁载体在工农业中的应用 | 第21页 |
| ·自杀性质粒的同源重组方法 | 第21-23页 |
| ·自杀性质粒的同源重组 | 第22-23页 |
| 2 生理生化特性 | 第23-29页 |
| ·试剂与材料 | 第23-24页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·培养基的配置 | 第23-24页 |
| ·生理生化试验 | 第24-25页 |
| ·菌体菌落形态观察 | 第24页 |
| ·生长温度测定 | 第24页 |
| ·生长曲线的测定 | 第24页 |
| ·适宜pH测定 | 第24页 |
| ·适宜盐度测定 | 第24页 |
| ·铵盐利用 | 第24-25页 |
| ·其他培养基培养 | 第25页 |
| ·结果与讨论 | 第25-27页 |
| ·菌落形态 | 第25页 |
| ·显微镜观察形态 | 第25-26页 |
| ·生长曲线 | 第26-27页 |
| ·部分生理生化特性 | 第27页 |
| ·本章小结 | 第27-29页 |
| 3 生物信息学分析 | 第29-34页 |
| ·全基因组测序 | 第29-31页 |
| ·铁载体关联的基因簇分析 | 第31页 |
| ·推测合成途径,预测产物结构 | 第31-32页 |
| ·本章讨论 | 第32-34页 |
| 4 铁载体测试实验 | 第34-39页 |
| ·实验材料与试剂 | 第34-35页 |
| ·菌株及对照菌株 | 第34页 |
| ·铁载体检测(CAS法)所用的试剂 | 第34页 |
| ·菌株培养 | 第34-35页 |
| ·CAS法检测铁载体 | 第35-36页 |
| ·平板测试实验方法 | 第35页 |
| ·液体测试实验方法 | 第35-36页 |
| ·实验结果 | 第36-37页 |
| ·铁载体固体实验 | 第36-37页 |
| ·铁载体液体测试 | 第37页 |
| ·本章讨论 | 第37-39页 |
| 5 突变体的构建及测试 | 第39-59页 |
| ·材料与仪器 | 第39-42页 |
| ·菌种和质粒 | 第39页 |
| ·实验中主要工具酶及化学试剂 | 第39页 |
| ·引物合成 | 第39页 |
| ·培养基和缓冲液的配置 | 第39-41页 |
| ·主要仪器和设备 | 第41-42页 |
| ·实验思路及流程 | 第42-44页 |
| ·实验思路 | 第42页 |
| ·实验流程图 | 第42-43页 |
| ·实验流程 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-51页 |
| ·Agrobacterium sp.ZX09基因组的提取 | 第44-45页 |
| ·获得目的片段TatA | 第45-47页 |
| ·TA克隆产物的转化和验证 | 第47-48页 |
| ·构建重组质粒pEMG-TatA | 第48-50页 |
| ·重组质粒pEMG-TatA电转到ZX09宿主菌中 | 第50页 |
| ·同源重组的PCR验证 | 第50-51页 |
| ·突变体测试 | 第51页 |
| ·实验结果 | 第51-58页 |
| ·Agrobacterium sp.ZX09基因组的提取电泳验证 | 第51-52页 |
| ·目的片段TatA的扩增回收结果 | 第52页 |
| ·TA克隆结果 | 第52-53页 |
| ·构建重组质粒pEMG-TatA结果 | 第53-54页 |
| ·同源重组的PCR验证 | 第54-57页 |
| ·突变体的测试 | 第57-58页 |
| ·本章讨论 | 第58-59页 |
| 6 结论 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
