| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-28页 |
| 1. 上皮-间质细胞转换(EMT) | 第11-18页 |
| ·EMT概念及研究简述 | 第11-14页 |
| ·EMT的分类及其在发育和疾病发生中的作用 | 第14-17页 |
| ·EMT发生的分子机制 | 第17-18页 |
| 2. 胚胎心脏发育及其过程中的EMT | 第18-22页 |
| ·胚胎心脏发育过程 | 第18-20页 |
| ·胚胎心脏发育和疾病发生过程中的EMT | 第20-22页 |
| 3. Cdx1基因研究现状 | 第22-28页 |
| ·Cdx/Hox基因的研究简介 | 第22-24页 |
| ·Cdx1在发育和疾病发生中的功能 | 第24-26页 |
| ·Cdx1在心脏发育和疾病中的研究 | 第26-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-54页 |
| 1 转基因小鼠构建 | 第28-30页 |
| ·实验材料与溶液配制 | 第28-29页 |
| ·实验步骤 | 第29-30页 |
| 2 感受态细胞制备、质粒提取、凝胶回收、酶切与连接、质粒与连接产物的转化 | 第30-36页 |
| ·实验材料与溶液配制 | 第30-32页 |
| ·实验步骤 | 第32-36页 |
| 3 RNA抽提、反转录、RT-PCR、QPCR、引物设计 | 第36-41页 |
| ·实验材料与溶液配制 | 第36-37页 |
| ·实验步骤 | 第37-41页 |
| 4 小鼠胚胎原代心外膜细胞的获得及培养 | 第41-43页 |
| ·实验材料与溶液配制 | 第41页 |
| ·实验步骤 | 第41-43页 |
| 5 Cdx1过表达和免疫荧光实验检测血管平滑肌细胞(aSMA~+)和细胞连接分子(β-catenin)变化 | 第43-45页 |
| ·实验材料与溶液配制 | 第43-44页 |
| ·实验步骤 | 第44-45页 |
| 6 Cdx1 siRNA-KD后细胞免疫荧光检测血管平滑肌细胞(aSMA~+)的变化 | 第45-47页 |
| ·实验材料与溶液配制 | 第45-46页 |
| ·实验步骤 | 第46-47页 |
| 7 Cdxl过表达后细胞划痕实验检测细胞迁移 | 第47-48页 |
| ·实验材料与溶液配制 | 第47页 |
| ·实验步骤 | 第47-48页 |
| 8 Cdx1 siRNA-KD后细胞划痕实验检测细胞迁移能力 | 第48-49页 |
| ·实验材料与溶液配制 | 第48页 |
| ·实验步骤 | 第48-49页 |
| 9 胚胎心脏培养和CMFDA标记、组织免疫荧光实验检测细胞迁移 | 第49-53页 |
| ·实验材料与溶液配制 | 第49-50页 |
| ·实验步骤 | 第50-53页 |
| 10 RNA-seq样品制备 | 第53页 |
| ·实验材料与溶液配制 | 第53页 |
| ·实验步骤 | 第53页 |
| 11 统计学分析 | 第53-54页 |
| 第三章 结果与分析 | 第54-72页 |
| 1 条件诱导性过表达Cdx1~(Tg)rtTA(+/+)转基因小鼠工作原理及交配方案 | 第54-56页 |
| 2 原代心外膜细胞的分离和培养体系的建立与鉴定 | 第56-59页 |
| 3 Cdx1过表达使原代心外膜细胞发生EMT | 第59-61页 |
| 4 Cdx1过表达促进心外膜源细胞向血管平滑肌细胞(aSMA~+)的分化 | 第61-63页 |
| 5 Cdx1 siRNA-KD抑制心外膜源细胞向血管平滑肌细胞(aSMA~+)的分化 | 第63-65页 |
| 6 Cdx1 siRNA-KD抑制心外膜源细胞的迁移 | 第65-67页 |
| 7 心脏培养实验表明Cdxl的瞬时表达促进心外膜细胞迁移 | 第67-69页 |
| 8 RNA-seq结果分析 | 第69-71页 |
| 9 Cdx1在心外膜发育中表达和作用功能的模型 | 第71-72页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第72-79页 |
| 第五章 结论 | 第79-80页 |
| 附录一 引物序列信息 | 第80-81页 |
| 附录二 硕士期间取得的科研成果 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-91页 |
| 致谢与后记 | 第91-95页 |
