中英文缩略词对照表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
1 前言 | 第13-18页 |
2 材料与方法 | 第18-36页 |
·材料和试剂 | 第18-22页 |
·实验动物及虫株 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·部分试剂的配制 | 第19-22页 |
·主要仪器及来源 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-36页 |
·RH 和 TgCtWh3 速殖子的复苏、传代 | 第23页 |
·TgCtwh3 和 RH 速殖子的毒力鉴定 | 第23页 |
·TgCtwh3 的 RNA 提取 | 第23-24页 |
·TgCtwh3 的 RNA 逆转录合成 cDNA | 第24-25页 |
·TgCtwh3 速殖子的 ROP16 片段的扩增 | 第25页 |
·PCR 产物纯化:PCR 产物纯化回收试剂盒(柱离心法) | 第25-26页 |
·1%琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
·目的片段连接 T 载体 | 第26-27页 |
·将连接产物转化感受态菌 | 第27页 |
·质粒抽提 | 第27-28页 |
·重组质粒酶切鉴定后测序 | 第28-29页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第29页 |
·SDS-PAGE | 第29-30页 |
·RAW264.7细胞的培养、传代 | 第30页 |
·RAW264.7感染TgCtwh3 和RH速殖子 | 第30-31页 |
·上清液中 NO 的检测 | 第31-32页 |
·RAW264.7感染TgCtwh3 和RH培养的细胞的RNA提取 | 第32-33页 |
·RAW264.7 感染 TgCtwh3 和 RH 的 RNA 逆转录合成 cDNA | 第33页 |
·荧光定量 PCR Assay 分析 M1/M2 相关基因转录水平 | 第33-34页 |
·蛋白印迹 | 第34-36页 |
·SDS-PAGE | 第34页 |
·Western blotting | 第34-36页 |
·数据处理和统计分析 | 第36页 |
3 结果 | 第36-41页 |
·TgCtwh3 的 ROP16 蛋白序列扩增出 2124bp 片段,氨基酸序列503位点与 RH 株的 ROP16 同为亮氨酸 | 第36-37页 |
·原核表达质粒在大肠埃希菌 BL21 中的表达 | 第37页 |
·小鼠毒力实验证实,TgCtwh3 的虫株毒力稍弱于 RH 虫株毒力,100 个速殖子均可致小鼠 100%死亡 | 第37-38页 |
·TgCtwh3 虫株感染 RAW264.7 细胞 24 小时后上清中 NO 分泌水平增高 | 第38页 |
·RH 株感染的 RAW264.7 高表达 Arg-1,低表达 iNOS;而 TgCtwh3株同时高表达 Arg-1 和 iNOS | 第38-39页 |
·TgCtwh3 和 RH 均可以诱导 STAT3/STST6 磷酸化;TgCtwh3 株可诱导 NF-κBp65 磷酸化,促进其核转位 | 第39-40页 |
·iNOS、Arg-1、IL-10、IL-12p40 mRNA 水平检测 | 第40-41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
5 结论 | 第43页 |
主要参考文献 | 第43-48页 |
附录 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
综述 | 第50-56页 |
参考文献 | 第54-56页 |