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弓形虫Chinese1基因型虫株诱导巨噬细胞偏移应答的研究

中英文缩略词对照表第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-13页
1 前言第13-18页
2 材料与方法第18-36页
   ·材料和试剂第18-22页
     ·实验动物及虫株第18页
     ·主要试剂第18-19页
     ·部分试剂的配制第19-22页
   ·主要仪器及来源第22-23页
   ·实验方法第23-36页
     ·RH 和 TgCtWh3 速殖子的复苏、传代第23页
     ·TgCtwh3 和 RH 速殖子的毒力鉴定第23页
     ·TgCtwh3 的 RNA 提取第23-24页
     ·TgCtwh3 的 RNA 逆转录合成 cDNA第24-25页
     ·TgCtwh3 速殖子的 ROP16 片段的扩增第25页
     ·PCR 产物纯化:PCR 产物纯化回收试剂盒(柱离心法)第25-26页
     ·1%琼脂糖凝胶电泳第26页
     ·目的片段连接 T 载体第26-27页
     ·将连接产物转化感受态菌第27页
     ·质粒抽提第27-28页
     ·重组质粒酶切鉴定后测序第28-29页
     ·重组质粒的诱导表达第29页
     ·SDS-PAGE第29-30页
     ·RAW264.7细胞的培养、传代第30页
     ·RAW264.7感染TgCtwh3 和RH速殖子第30-31页
     ·上清液中 NO 的检测第31-32页
     ·RAW264.7感染TgCtwh3 和RH培养的细胞的RNA提取第32-33页
     ·RAW264.7 感染 TgCtwh3 和 RH 的 RNA 逆转录合成 cDNA第33页
     ·荧光定量 PCR Assay 分析 M1/M2 相关基因转录水平第33-34页
     ·蛋白印迹第34-36页
       ·SDS-PAGE第34页
       ·Western blotting第34-36页
     ·数据处理和统计分析第36页
3 结果第36-41页
   ·TgCtwh3 的 ROP16 蛋白序列扩增出 2124bp 片段,氨基酸序列503位点与 RH 株的 ROP16 同为亮氨酸第36-37页
   ·原核表达质粒在大肠埃希菌 BL21 中的表达第37页
   ·小鼠毒力实验证实,TgCtwh3 的虫株毒力稍弱于 RH 虫株毒力,100 个速殖子均可致小鼠 100%死亡第37-38页
   ·TgCtwh3 虫株感染 RAW264.7 细胞 24 小时后上清中 NO 分泌水平增高第38页
   ·RH 株感染的 RAW264.7 高表达 Arg-1,低表达 iNOS;而 TgCtwh3株同时高表达 Arg-1 和 iNOS第38-39页
   ·TgCtwh3 和 RH 均可以诱导 STAT3/STST6 磷酸化;TgCtwh3 株可诱导 NF-κBp65 磷酸化,促进其核转位第39-40页
   ·iNOS、Arg-1、IL-10、IL-12p40 mRNA 水平检测第40-41页
4 讨论第41-43页
5 结论第43页
主要参考文献第43-48页
附录第48-49页
致谢第49-50页
综述第50-56页
 参考文献第54-56页

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