| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一部分 酿酒酵母转录延伸因子Paf1复合物亚基Rtf1中HMD及Plus3结构域结构的初步研究 | 第9-38页 |
| 第一章 研究背景介绍 | 第9-19页 |
| 1. Paf1复合物在转录中的作用 | 第9-19页 |
| ·Paf1复合物发现过程 | 第9-12页 |
| ·Paf1复合物影响组蛋白修饰 | 第10-11页 |
| ·控制端粒的长度及影响沉默 | 第11-12页 |
| ·影响免疫反应及癌症的进程 | 第12页 |
| ·Paf1C在转录过程中的作用 | 第12-14页 |
| ·Rtf1亚基的功能 | 第14-18页 |
| ·Rtf1-Plus3结构域的研究进展 | 第17页 |
| ·HMD结构域的研究进展 | 第17-18页 |
| ·课题目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第19-27页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·仪器设备 | 第19页 |
| ·药品试剂 | 第19页 |
| ·酿酒酵母Rtf1蛋白结构域的克隆 | 第19-22页 |
| ·酿酒酵母Rtf1蛋白HMD和Plus3结构域基因的引物设计及PCR扩增 | 第19-21页 |
| ·重组质粒的构建 | 第21-22页 |
| ·重组酿酒酵母Rtf1蛋白HMD和Plus3结构域的表达与纯化 | 第22-24页 |
| ·重组ScRtf1-HMD和ScRtf1-Plus3结构域的表达 | 第22页 |
| ·重组ScRtf1-HMD和ScRtf1-Plus3结构域的纯化 | 第22-24页 |
| ·蛋白的透析与浓缩 | 第24页 |
| ·圆二色谱(CD)实验 | 第24页 |
| ·NMR实验 | 第24-27页 |
| ·样品的制备 | 第24-25页 |
| ·数据的收集及处理 | 第25-26页 |
| ·化学位移微扰实验 | 第26-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-33页 |
| ·序列分析 | 第27-28页 |
| ·ScRtf1-Plus3和ScRtf1-HMD的基因克隆 | 第28页 |
| ·重组ScRtf1-Plus3和ScRtf1-HMD的表达和纯化 | 第28-29页 |
| ·ScRtf1-Plus3和ScRtf1-HMD的~1H一维核磁共振分析 | 第29-30页 |
| ·ScRtf1-HMD的圆二色谱分析 | 第30-31页 |
| ·ScRtf1-Plus3和ScRtf1-HMD的二维核磁共振检测 | 第31-32页 |
| ·ScRtf1-Plus3化学位移微扰实验 | 第32-33页 |
| 第四章 结论和展望 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-38页 |
| 第二部分 布氏锥虫未知功能蛋白PDZ结构域结构结构的初步研究 | 第38-59页 |
| 第五章 前言 | 第38-44页 |
| ·PDZ结构域的特点 | 第38-40页 |
| ·PDZ结构域单体结构 | 第38-39页 |
| ·PDZ结构域的二聚化 | 第39页 |
| ·串联PDZ结构域 | 第39-40页 |
| ·PDZ结构域与配体的结合 | 第40-41页 |
| ·PDZ结构域对蛋白C端的识别 | 第40页 |
| ·PDZ结构域对蛋白内部序列的识别 | 第40-41页 |
| ·PDZ结构域与磷脂的相互作用 | 第41页 |
| ·PDZ结构域的功能 | 第41-42页 |
| ·课题目的和意义 | 第42-44页 |
| 第六章 实验方法与步骤 | 第44-52页 |
| ·布氏锥虫未知功能蛋白PDZ结构域的氨基酸序列 | 第44-45页 |
| ·重组质粒的构建 | 第45-46页 |
| ·重组蛋白的表达纯化 | 第46-47页 |
| ·重组TbPDZ结构域的表达 | 第46页 |
| ·重组TbPDZ结构域的纯化 | 第46-47页 |
| ·蛋白质分子量的测定 | 第47-48页 |
| ·蛋白的透析、浓缩及稳定性测定 | 第48页 |
| ·核磁共振测定蛋白结构 | 第48-52页 |
| ·蛋白质~(15)N标记和~(15)N、~(13)C双标记样品的制备 | 第48-49页 |
| ·NMR实验记录的谱图 | 第49页 |
| ·数据处理及分析 | 第49-50页 |
| ·主链的认证 | 第50页 |
| ·化学位移编辑(CSI) | 第50-52页 |
| 第七章 实验结果与讨论 | 第52-59页 |
| ·序列分析 | 第52-53页 |
| ·布氏锥虫PDZ结构域的重组克隆 | 第53页 |
| ·重组TbPDZ结构域的表达和纯化 | 第53页 |
| ·重组TbPDZ结构域二维核磁共振检测 | 第53-54页 |
| ·重组TbPDZ结构域的主链认证 | 第54-57页 |
| ·TbPDZ结构域二级结构的CSI分析 | 第57-59页 |
| 第八章 结论与展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| 发表论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
