| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 縮略语表 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·植物中的花色苷 | 第12页 |
| ·花色苷合成途径中主要的关键酶基因 | 第12-16页 |
| ·查尔酮合成酶(CHS) | 第14页 |
| ·查尔酮异构酶(CHI) | 第14页 |
| ·黄烷酮3-羟化酶(F3H) | 第14-15页 |
| ·二氢黄酮醇还原酶(DFR) | 第15页 |
| ·花色苷合成酶(ANS) | 第15页 |
| ·类黄酮葡萄糖基转移酶(UFGT) | 第15-16页 |
| ·影响植物花色苷合成的环境和遗传因素 | 第16-18页 |
| ·自然环境因素对花色苷合成的影响 | 第16页 |
| ·花色苷合成的遗传因素 | 第16-18页 |
| ·高等植物中ABA的合成及作用 | 第18-20页 |
| ·高等植物ABA生物合成代谢研究进展 | 第18-19页 |
| ·果实成熟衰老过程中内源ABA的变化规律 | 第19-20页 |
| ·研究目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 甜樱桃果实发育动态及花色苷合成关键酶基因克隆 | 第22-34页 |
| 摘要 | 第22页 |
| Abstract | 第22-23页 |
| 引言 | 第23页 |
| ·试验材料 | 第23-24页 |
| ·植物材料的培养及处理 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·各种酶及试剂 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-29页 |
| ·甜樱桃果实果重及纵横径的测定 | 第24页 |
| ·甜樱桃可溶性糖的测定 | 第24页 |
| ·甜樱桃果实叶绿素的测定 | 第24页 |
| ·甜樱桃果实花色苷的测定 | 第24页 |
| ·甜樱桃果实内源激素ABA和IAA的测定 | 第24-25页 |
| ·总RNA的提取和纯化 | 第25页 |
| ·cDNA的合成 | 第25页 |
| ·花色苷合成路径基因全长序列克隆及序列分析 | 第25-26页 |
| ·纯化产物的回收及测序 | 第26-28页 |
| ·实时荧光定量表达分析 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-32页 |
| ·甜樱桃果实发育过程中纵横径,果色及单果重变化 | 第29页 |
| ·甜樱桃果实发育过程中花色苷,叶绿素,可溶性糖含量的变化 | 第29-30页 |
| ·甜樱桃果实发育过程中ABA和IAA含量的变化 | 第30页 |
| ·甜樱桃花色苷合成路径关键酶基因的克隆 | 第30-31页 |
| ·甜樱桃果实发育过程中花色苷合成路径关键酶基因的表达模式 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 PacMYBA转录因子特性和功能的研究 | 第34-65页 |
| 摘要 | 第34页 |
| Abstract | 第34-35页 |
| 引言 | 第35-36页 |
| ·试验材料 | 第36-37页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·菌体材料及载体 | 第36-37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·各种酶及试剂 | 第37页 |
| ·试验方法 | 第37-50页 |
| ·总RNA和DNA的提取和纯化 | 第37页 |
| ·cDNA的合成 | 第37页 |
| ·PacMYBA基因全长序列克隆及序列分析 | 第37-38页 |
| ·PacMYBA启动子序列的克隆 | 第38-40页 |
| ·PacMYBA亚细胞定位载体构建 | 第40-41页 |
| ·酵母自激活载体构建 | 第41-42页 |
| ·PacMYBA拟南芥原生质体亚细胞定位 | 第42-43页 |
| ·PacMYBA转录激活活性鉴定 | 第43-44页 |
| ·PacMYBA基因全长克隆、亚细胞定位和酵母自激活试验载体构建引物设计 | 第44页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第44页 |
| ·PacMYBA转基因拟南芥载体和TRV病毒的构建 | 第44-46页 |
| ·农杆菌法转拟南芥 | 第46-47页 |
| ·TRV病毒侵染甜樱桃果实的可行性分析 | 第47页 |
| ·PCR验转基因植株阳性苗 | 第47-48页 |
| ·甜樱桃果实花色苷物质的检测 | 第48页 |
| ·pGreen Ⅱ0029-62-SK系列载体的构建 | 第48页 |
| ·pGreen Ⅱ0800-LUC系列载体的构建 | 第48-49页 |
| ·农杆菌GV3101介导的烟草瞬时转化 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-63页 |
| ·甜樱桃PacMYBA基因的分离及序列分析 | 第50-53页 |
| ·PacMYBA原生质体亚细胞定位及转录激活鉴定 | 第53-54页 |
| ·PacMYBA组织特异性表达模式 | 第54-55页 |
| ·PacMYBA在甜樱桃果实发育过程中的表达情况 | 第55-56页 |
| ·PacMYBA基因启动子的克隆及顺势元件分析 | 第56页 |
| ·PacMYBA转基因拟南芥植株的表型分析 | 第56-58页 |
| ·PacMYBA参与调控甜樱桃果实花色苷合成调控 | 第58-59页 |
| ·PacDFR,PacANS和PacUFGT启动子的克隆及序列分析 | 第59-61页 |
| ·PacMYBA参与调控了花色苷合成路径关键酶基因启动子的活性 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| ·PacMYBA是一个典型的参与调控花色苷合成的R2R3-MYB转录因子 | 第63页 |
| ·PacMYBA直接参与调控了甜樱桃花色苷物质的合成 | 第63-65页 |
| 第四章 PacMYBA参与了ABA介导的甜樱桃果实花色苷的合成 | 第65-73页 |
| 摘要 | 第65页 |
| Abstract | 第65页 |
| 引言 | 第65-66页 |
| ·试验材料 | 第66-67页 |
| ·植物材料 | 第66页 |
| ·主要仪器 | 第66页 |
| ·各种酶及试剂 | 第66-67页 |
| ·试验方法 | 第67-68页 |
| ·总RNA和DNA的提取和纯化 | 第67页 |
| ·甜樱桃果实ABA和NDGA瓶插处理 | 第67页 |
| ·ABA和NDGA温育处理甜樱桃果实圆片 | 第67页 |
| ·PacNCED1-TRV载体的构建 | 第67-68页 |
| ·农杆菌注射甜樱桃果实 | 第68页 |
| ·花色苷及叶绿素含量测量 | 第68页 |
| ·果实ABA及IAA含量测定 | 第68页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第68页 |
| ·结果与分析 | 第68-72页 |
| ·ABA可以显著促进甜樱桃积累花色苷而NDGA抑制花色苷的合成 | 第68页 |
| ·PacMYBA可以响应ABA信号 | 第68-70页 |
| ·沉默PacNCED1可以显著抑制甜樱桃果实花色苷合成,同时下调PacMYBA的表达 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-73页 |
| 第五章 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 个人简历 | 第86-87页 |
