| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-25页 |
| ·热休克蛋白概述 | 第11-16页 |
| ·热休克蛋白的分类 | 第12页 |
| ·Hsp70家族生物学特性 | 第12-13页 |
| ·Hsp60家族生物学特性 | 第13-15页 |
| ·其他小分子Hsp家族生物学特性 | 第15-16页 |
| ·热休克蛋白Hsp90 | 第16-20页 |
| ·Hsp90家族生物学特性 | 第16-18页 |
| ·Hsp90蛋白分子伴侣作用机制研究进展 | 第18-19页 |
| ·原核生物Hsp90蛋白功能研究进展 | 第19-20页 |
| ·微量热技术及应用 | 第20-23页 |
| ·微量热技术简介 | 第20页 |
| ·微量热技术在生命科学中的应用 | 第20-22页 |
| ·C80量热仪简介 | 第22-23页 |
| ·课题研究的目的和主要内容 | 第23-25页 |
| ·研究依据和实验目的 | 第23-24页 |
| ·课题的主要研究内容 | 第24页 |
| ·论文课题受资助情况 | 第24-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-43页 |
| ·实验材料与试剂 | 第25-31页 |
| ·菌种、质粒及其来源 | 第25页 |
| ·培养基的配制 | 第25-26页 |
| ·PCR扩增引物设计 | 第26页 |
| ·药品及生化试剂 | 第26-27页 |
| ·溶液的配制 | 第27-30页 |
| ·主要实验仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-43页 |
| ·At.ferrooxidans总基因组DNA的提取 | 第31页 |
| ·PCR扩增 | 第31页 |
| ·琼脂糖电泳鉴定PCR扩增产物 | 第31页 |
| ·重组质粒的构建 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的转化 | 第32页 |
| ·阳性克隆子筛选 | 第32-33页 |
| ·蛋白质表达转化及表达条件优化 | 第33页 |
| ·重组蛋白AtHtpG的大规模表达及纯化 | 第33-34页 |
| ·蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第34-35页 |
| ·蛋白质浓度标准曲线制定和目的蛋白浓度测定 | 第35-36页 |
| ·重组AtHtpG蛋白ATP酶活性测定 | 第36页 |
| ·重组AtHtpG蛋白协助GroE系统提高木聚糖酶的热稳定性 | 第36-37页 |
| ·微量热法分析AtHtpG的ATPase活性影响因素 | 第37-39页 |
| ·微量热法测定相互作用 | 第39-41页 |
| ·热谱曲线测定的操作方法 | 第41页 |
| ·At.ferrooxidans胞内功能测定 | 第41-43页 |
| 第3章 重组蛋白AtHtpG的表达纯化及胞外性质研究 | 第43-50页 |
| ·AtHtpG基因的克隆 | 第43-45页 |
| ·AtHtpG基因的克隆 | 第43-44页 |
| ·阳性克隆的测定及筛选 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白AtHtpG的表达纯化 | 第45-46页 |
| ·重组蛋白AtHtpG的条件表达及SDS-PAGE分析 | 第45页 |
| ·重组蛋白AtHtpG大规模表达及SDS-PAGE分析 | 第45-46页 |
| ·重组蛋白AtHtpG的生理生化性质测定 | 第46-49页 |
| ·重组蛋白AtHtpG浓度测定及其ATPase活性测定 | 第46-48页 |
| ·重组AtHtpG蛋白协助GroE系统提高木聚糖酶的热稳定性 | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 第4章 AtHtpG酶活性及其分子伴侣功能的微量热法测定 | 第50-61页 |
| ·不同条件下AtHtpG的ATPase活性热谱曲线及放热总量 | 第50-55页 |
| ·不同Mg~(2+)浓度下AtHtpG的ATPase活性热谱曲线及其反应热总量 | 第51-52页 |
| ·不同K~+浓度下AtHtpG的ATPase活性热谱曲线及其反应热总量 | 第52-54页 |
| ·不同ATP浓度下AtHtpG的ATPase活性热谱曲线及其反应热总量 | 第54-55页 |
| ·不同条件下AtHtpG的分子伴侣功能探究 | 第55-59页 |
| ·不同体系中热变性木聚糖酶复性反应热谱曲线及其反应总热量 | 第55-57页 |
| ·AtGroE体系与变性木聚糖反应体系优化 | 第57-58页 |
| ·AtHtpG蛋白与变性木聚糖酶反应的热谱曲线及其反应总热量 | 第58-59页 |
| ·本章小结 | 第59-61页 |
| 第5章 AtHtpG的胞内功能初探 | 第61-65页 |
| ·AtHtpG基因的超表达对E.coli BL21生长活性的影响 | 第61-63页 |
| ·不同温度下超表达AtHtpG的E.coli和野生型E.coli生长代谢曲线比较 | 第62页 |
| ·不同温度下超表达AtHtpG的E.coli和野生型E.coli菌落生长情况比较 | 第62-63页 |
| ·超表达AtHtpG的E.coli和野生型E.coli胞内蛋白耐热性比较 | 第63-64页 |
| ·本章小结 | 第64-65页 |
| 第6章 全文结论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
| 攻读硕士期间研究成果及荣誉 | 第79页 |
| 已(待)发表论文情况 | 第79页 |
| 获得荣誉 | 第79页 |
