| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 材料与方法 | 第11-23页 |
| 一、SRHC 全长序列的获取 | 第11-14页 |
| (一)方法步骤 | 第11-13页 |
| (二)所用试剂 | 第13页 |
| (三)实验仪器 | 第13页 |
| (四)引物序列 | 第13-14页 |
| 二、检测 SRHC 在肝癌样本中的表达及其临床意义 | 第14-17页 |
| (一)肝癌样本的收集 | 第14页 |
| (二)样本 RNA 的抽提 | 第14页 |
| (三)反转录 | 第14-15页 |
| (四)实时定量 PCR | 第15-16页 |
| (五)数据处理 | 第16页 |
| (六)统计分析 | 第16页 |
| (七)实验试剂耗材 | 第16页 |
| (八)实验仪器 | 第16-17页 |
| (九)引物序列 | 第17页 |
| 三、细胞培养 | 第17-18页 |
| (一)细胞来源 | 第17页 |
| (二)培养方法 | 第17页 |
| (三)试剂 | 第17-18页 |
| 四、慢病毒的制备和细胞感染 | 第18页 |
| (一) 重组慢病毒的制备 | 第18页 |
| (二)细胞感染 | 第18页 |
| (三)试剂 | 第18页 |
| (四)仪器 | 第18页 |
| 五、甲基化测序 | 第18-21页 |
| (一)组织和细胞基因组 DNA 的提取 | 第18-19页 |
| (二)亚硫酸盐处理基因组 DNA | 第19-20页 |
| (三)扩增目的区域并测序 | 第20页 |
| (四)试剂 | 第20-21页 |
| (五)引物序列 | 第21页 |
| 六、检测 5azadc 对细胞表达 SRHC 的影响 | 第21-22页 |
| (一)实验步骤 | 第21页 |
| (二)试剂 | 第21-22页 |
| 七、细胞增殖实验 | 第22-23页 |
| (一)实验步骤 | 第22页 |
| (二)数据处理及统计分析 | 第22页 |
| (三)实验试剂 | 第22页 |
| (四)实验仪器 | 第22-23页 |
| 结果 | 第23-36页 |
| 一、SRHC 在人类基因组的位置及序列 | 第23-28页 |
| 二、SRHC 在肝癌样本中的表达 | 第28-29页 |
| 三、SRHC 在各种肝癌细胞系中的表达 | 第29-30页 |
| 四、SRHC 的表达量与肝癌病人各种临床指标的相关性 | 第30-31页 |
| 五、DNA 甲基化是其在肝癌中表达下调的重要原因 | 第31-33页 |
| 六、体外实验显示 SRHC 可抑制肝癌细胞的增殖 | 第33-36页 |
| 讨论 | 第36-38页 |
| 附录 | 第38-39页 |
| 参考文献(一) | 第39-41页 |
| 综述 长链非编码 RNA 在肿瘤发生发展中作用及机制 | 第41-48页 |
| 参考文献(二) | 第46-48页 |
| 在读期间发表论文和参加科研工作的说明 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49页 |