| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 文献综述 | 第10-19页 |
| 主要技术路线 | 第19-20页 |
| 引言 | 第20-21页 |
| 1 材料与方法 | 第21-30页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·病毒及细胞 | 第21页 |
| ·病料收集 | 第21页 |
| ·主要试剂及配制 | 第21-22页 |
| ·仪器设备 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-30页 |
| ·病毒增殖 | 第23页 |
| ·PRV 的 DNA 提取 | 第23页 |
| ·PRRSV 和 HP-PRRSV 的 RNA 提取 | 第23-24页 |
| ·PRRSV 和 HP-PRRSV 的 cDNA 合成 | 第24页 |
| ·单项 PCR 扩增方法的建立 | 第24-27页 |
| ·单项 PCR 产物的回收鉴定 | 第27页 |
| ·多重 PCR 扩增方法的建立 | 第27-28页 |
| ·PRRSV、HP-PRRSV 和 PRV 三重 PCR 特异性试验 | 第28页 |
| ·PRRSV、HP-PRRSV 和 PRV 三重 PCR 敏感性试验 | 第28-29页 |
| ·PRRSV、HP-PRRSV 和 PRV 三重 PCR 重复性试验 | 第29页 |
| ·三重 PCR 方法检测临床猪组织病料 | 第29-30页 |
| 2 结果 | 第30-40页 |
| ·单项 PCR 退火温度的确定 | 第30-31页 |
| ·单项 PCR 反应条件的优化 | 第31-33页 |
| ·酶浓度的优化 | 第31页 |
| ·引物浓度的优化 | 第31-32页 |
| ·Mg＋浓度的优化 | 第32-33页 |
| ·PCR 产物鉴定 | 第33-34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第33-34页 |
| ·测序结果 | 第34页 |
| ·HP-PRRSV 和 PRV 双重 PCR 的建立 | 第34-36页 |
| ·双重 PCR 反应中模板比例的确定 | 第34-35页 |
| ·双重 PCR 反应中酶浓度的确定 | 第35页 |
| ·双重 PCR 反应引物浓度的确定 | 第35-36页 |
| ·三重 PCR 反应的建立 | 第36-37页 |
| ·三重 PCR 反应中 PRRSV 模板量的确定 | 第36-37页 |
| ·三重 PCR 引物浓度的优化 | 第37页 |
| ·三重 PCR 特异性试验 | 第37-38页 |
| ·三重 PCR 敏感性试验 | 第38页 |
| ·三重 PCR 重复性试验 | 第38页 |
| ·三重 PCR 方法的临床应用 | 第38-40页 |
| ·临床病料中 PRRSV、HP-PRRSV 和 PRV 检测 | 第38-39页 |
| ·临床病料中 PRRSV、HP-PRRSV 和 PRV 混合感染检测 | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-43页 |
| ·多重 PCR 检测方法的建立及临床应用 | 第40-43页 |
| ·多重 PCR 的引物设计 | 第40页 |
| ·多重 PCR 反应条件的优化 | 第40-41页 |
| ·多重PCR的临床应用 | 第41-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简历 | 第49页 |
| 附研究生期间的发表论文 | 第49页 |
