| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 英文缩略词表(ABBREVIATION) | 第12-13页 |
| 1 引言 | 第13-15页 |
| 2 实验材料 | 第15-23页 |
| ·材料来源 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·主要溶液 | 第15-22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| 3 实验方法 | 第23-33页 |
| ·引物设计 | 第23页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第23-24页 |
| ·原始模板的消化 | 第24页 |
| ·感受态的制备 | 第24-25页 |
| ·转化 | 第25页 |
| ·挑取单克隆、质粒提取及酶切鉴定 | 第25-26页 |
| ·Blasticidin 的浓度的筛选 | 第26页 |
| ·病毒包装及感染 mLEC/Hsf4-/-细胞 | 第26-27页 |
| ·Hsf4b 突变质粒稳定表达细胞株的筛选 | 第27页 |
| ·细胞收集并裂解及蛋白的提取 | 第27-28页 |
| ·细胞内总蛋白浓度的测定（BCA 法） | 第28-29页 |
| ·蛋白质凝胶电泳 | 第29-31页 |
| ·Luciferase assay 实验方法 | 第31-33页 |
| 4 实验结果 | 第33-41页 |
| ·突变质粒 PCR 结果 | 第33页 |
| ·转化后提取突变质粒及酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·突变质粒的测序鉴定 | 第34-38页 |
| ·Blasticidin 药物的浓度筛选 | 第38-39页 |
| ·Western blot 检测突变稳定株中 Hsf4b 的表达 | 第39页 |
| ·Western blot 检测突变稳定株中下游蛋白的表达 | 第39-40页 |
| ·Luciferase assay 结果 | 第40-41页 |
| 5 讨论 | 第41-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-47页 |
| 文献综述 | 第47-58页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第60-61页 |