| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-33页 |
| ·木聚糖 | 第14-15页 |
| ·木聚糖酶 | 第15-26页 |
| ·木聚糖酶的来源 | 第15-16页 |
| ·木聚糖酶的催化机制 | 第16-17页 |
| ·木聚糖酶的结构及分类 | 第17-20页 |
| ·不同家族木聚糖酶的底物特异性 | 第20-21页 |
| ·特异性木聚糖酶的克隆及特性研究 | 第21-22页 |
| ·木聚糖酶的分子改造 | 第22-24页 |
| ·木聚糖相关降解酶的协同作用 | 第24页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第24-26页 |
| ·纤维素酶 | 第26-31页 |
| ·纤维素酶的分类 | 第26-27页 |
| ·纤维素酶的结构 | 第27-28页 |
| ·碳水化合物结合域（CBM） | 第28-30页 |
| ·纤维素酶的连续性（Processivity） | 第30-31页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第31-32页 |
| ·主要研究内容 | 第32页 |
| ·课题创新点 | 第32-33页 |
| 第2章 草菇木聚糖酶基因 xynII 的克隆及在毕赤酵母中的表达 | 第33-56页 |
| ·实验材料 | 第33-35页 |
| ·菌种和质粒 | 第33页 |
| ·试剂盒 | 第33页 |
| ·工具酶及试剂 | 第33-34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·实验仪器 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-43页 |
| ·草菇菌丝的获取 | 第35页 |
| ·草菇总 RNA 的提取 | 第35-36页 |
| ·木聚糖酶基因（xynII）的克隆 | 第36-39页 |
| ·重组表达质粒 pPICZ B-xynII 的构建 | 第39-40页 |
| ·重组表达载体 pPICZ B-xynII 转入毕赤酵母 | 第40-42页 |
| ·XynII 在毕赤酵母中的表达及 SDS-PAGE 分析 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-54页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第43页 |
| ·xynII 5'端片段的获得 | 第43-46页 |
| ·xynII 基因全长的获得 | 第46-48页 |
| ·xynII 序列分析 | 第48-52页 |
| ·重组表达载体 pPICZ B-xynII 的构建 | 第52-53页 |
| ·重组表达质粒 pPICZ B-xynII 转入毕赤酵母 | 第53-54页 |
| ·XynII 在毕赤酵母中的表达及 SDS-PAGE 分析 | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第3章 XynII 酶学性质及其与乙酰木聚糖酯酶的协同作用 | 第56-76页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·菌种 | 第56页 |
| ·试剂 | 第56页 |
| ·培养基 | 第56页 |
| ·实验仪器 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-63页 |
| ·XynII 的纯化 | 第56-57页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第57-58页 |
| ·重组木聚糖酶 XynII 酶学性质测定 | 第58-60页 |
| ·SDS 对重组木聚糖酶 XynII 二级结构的影响 | 第60-61页 |
| ·XynII C-端点突变体的构建 | 第61-62页 |
| ·SDS 对 XynII C-端点突变体的活性影响 | 第62页 |
| ·重组木聚糖酶 XynII 与乙酰木聚糖酯酶 AXE1 的协同降解作用 | 第62-63页 |
| ·XynII 与 AXE1 对不同底物协同降解产物分析 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-74页 |
| ·XynII 的纯化和蛋白含量的测定 | 第63-64页 |
| ·重组木聚糖酶 XynII 酶学性质 | 第64-69页 |
| ·SDS 对重组木聚糖酶 XynII 二级结构的影响 | 第69-71页 |
| ·XynII C-端点突变体的构建 | 第71页 |
| ·SDS 对 XynII C-端点突变体的活性影响 | 第71-72页 |
| ·重组木聚糖酶 XynII 与乙酰木聚糖酯酶 AXE1 的协同降解作用 | 第72-73页 |
| ·XynII 与 AXE1 对不同底物协同降解产物分析 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-76页 |
| 第4章 N-端与 C-端序列对 XynII 性质的影响 | 第76-98页 |
| ·实验材料 | 第76页 |
| ·菌种和质粒 | 第76页 |
| ·试剂盒 | 第76页 |
| ·工具酶及试剂 | 第76页 |
| ·培养基 | 第76页 |
| ·仪器及设备 | 第76页 |
| ·实验方法 | 第76-79页 |
| ·XynII 去 N-端和 C-端序列突变体的构建 | 第76-77页 |
| ·XynII 及各突变体酶学性质比较 | 第77-78页 |
| ·XynII 及其突变体二级结构的差异性分析 | 第78页 |
| ·XynII 及其突变体稳定性差异的研究 | 第78-79页 |
| ·XynII 及其突变对木聚糖底物吸附性能的差异 | 第79页 |
| ·结果及分析 | 第79-96页 |
| ·XynII 突变体的构建 | 第79-81页 |
| ·XynII 及其突变体的表达及纯化 | 第81-82页 |
| ·XynII 及各突变体酶学性质比较 | 第82-87页 |
| ·XynII 及其突变体二级结构的差异性分析 | 第87-88页 |
| ·XynII 及其突变体稳定性差异的研究 | 第88-94页 |
| ·XynII 及其突变对木聚糖底物吸附性能的差异 | 第94-96页 |
| ·讨论 | 第96-98页 |
| 第5章 草菇 GH5 内切型纤维素酶 EG1 的降解模式和连续性及 CBM 对其影响的研究 | 第98-111页 |
| ·实验材料 | 第98页 |
| ·菌种 | 第98页 |
| ·试剂 | 第98页 |
| ·培养基 | 第98页 |
| ·实验仪器 | 第98页 |
| ·实验方法 | 第98-100页 |
| ·EG1 及其突变体的表达及纯化 | 第98页 |
| ·EG1 及其突变体酶活的测定 | 第98-99页 |
| ·EG1 及其突变体的 CD 分析 | 第99页 |
| ·CMC 粘度法测定 EG1 及其突变体的活性差异 | 第99页 |
| ·EG1 及其突变体对不同底物的水解产物分析 | 第99-100页 |
| ·EG1 及其突变体吸附及解吸附能力比较 | 第100页 |
| ·EG1 及其突变体水解的连续性分析 | 第100页 |
| ·结果与分析 | 第100-109页 |
| ·EG1 及其突变体的表达及纯化 | 第100-101页 |
| ·EG1 及其突变体对不同底物的酶活测定 | 第101-102页 |
| ·EG1 及其突变体的圆二色谱（CD）分析 | 第102页 |
| ·CMC 粘度法测定 EG1 及其突变体的活性差异 | 第102页 |
| ·EG1 及其突变体对不同底物的水解产物分析 | 第102-108页 |
| ·EG1 及其突变体水解的连续性分析 | 第108-109页 |
| ·讨论 | 第109-111页 |
| 总结 | 第111-113页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-122页 |
