| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 縮略词表 | 第7-12页 |
| 第一章 Torque teno sus virus(TTSuV)的研究进展 | 第12-19页 |
| 1 TTSuV的发现 | 第12页 |
| 2 TTSuV的分类 | 第12页 |
| 3 TTSuV的病原学特征 | 第12-13页 |
| ·TTSuV基因组及其编码产物 | 第12-13页 |
| ·TTSuV的理化特性 | 第13页 |
| ·TTSuV的致病性 | 第13页 |
| 4 TTSuV的流行病学 | 第13-14页 |
| ·国外猪群TTSuV的流行概况 | 第14页 |
| ·我国猪群TTSuV的流行概况 | 第14页 |
| 5 TTSuV诊断方法的研究进展 | 第14-19页 |
| ·TTSuV的分子生物学检测方法 | 第14-16页 |
| ·TTSuV分型的检测 | 第16页 |
| ·TTSuV的血清学诊断法 | 第16-18页 |
| ·病理组织学诊断 | 第18页 |
| ·动物模型的建立 | 第18页 |
| ·电镜技术 | 第18-19页 |
| 6 研究的目的及意义 | 第19页 |
| 第二章 TTSuV2-ORF1基因原核表达及其多克隆抗体的制备 | 第19-33页 |
| 1 材料与方法 | 第19-25页 |
| ·主要材料与试剂 | 第19页 |
| ·载体和受体菌 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·主要溶剂配制 | 第20-21页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳溶液 | 第20页 |
| ·培养基配制 | 第20-21页 |
| ·SDS-PAGE电泳相关溶液 | 第21页 |
| ·蛋白质纯化试剂 | 第21页 |
| ·Western-blot相关试剂 | 第21页 |
| ·TTSuV2 ORF1优势抗原表位区的筛选 | 第21-22页 |
| ·TTSuV2 ORF1基因的克隆及重组质粒构建 | 第22-24页 |
| ·引物设计与合成 | 第22页 |
| ·目的基因扩增 | 第22-23页 |
| ·连接与转化 | 第23页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第23页 |
| ·重组表达质粒构建 | 第23-24页 |
| ·重组表达质粒pET-TTSuV2-ORF1的鉴定 | 第24页 |
| ·重组蛋白的诱导和表达 | 第24页 |
| ·重组蛋白的纯化及浓度测定 | 第24页 |
| ·重组蛋白的Western blot检测 | 第24-25页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第25页 |
| ·多克隆抗体的鉴定 | 第25页 |
| 2 结果 | 第25-32页 |
| ·TTSuV2 ORF1表位区筛选 | 第25-28页 |
| ·TTSuV2 ORF1抗原性、亲水性和表面可及型分析 | 第25-27页 |
| ·TTSuV2 ORF1二级结构预测分析 | 第27-28页 |
| ·目的基因扩增结果 | 第28页 |
| ·重组质粒的构建和鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组蛋白的表达与鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第30页 |
| ·重组蛋白Western blot检测 | 第30-31页 |
| ·多克隆抗体的鉴定 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 TTSuV2间接阻断ELISA的建立与初步应用 | 第33-44页 |
| 1 材料与方法 | 第33-35页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·包被抗原的制备 | 第33页 |
| ·间接阻断ELISA方法的建立 | 第33-35页 |
| ·间接阻断ELISA的程序 | 第33页 |
| ·最佳包被液的筛选 | 第33-34页 |
| ·最佳封闭液的筛选 | 第34页 |
| ·抗原与抗体最佳反应条件的确定 | 第34页 |
| ·酶标抗体工作浓度和作用时间的确定 | 第34页 |
| ·反应模式的选择 | 第34页 |
| ·待检猪血清最佳浓度的确定 | 第34页 |
| ·待检血清和阻断抗体作用时间的确定 | 第34页 |
| ·其他反应条件的确定 | 第34-35页 |
| ·临界值的确定 | 第35页 |
| ·特异性实验 | 第35页 |
| ·敏感性实验 | 第35页 |
| ·间接阻断ELISA与Western blot比较 | 第35页 |
| 2 结果 | 第35-43页 |
| ·最佳包被液的筛选 | 第35-36页 |
| ·最佳封闭液的筛选 | 第36-37页 |
| ·抗原包被浓度与阻断抗体工作浓度的确定 | 第37页 |
| ·酶标抗体工作浓度的确定 | 第37-38页 |
| ·反应模式的选择 | 第38页 |
| ·待检猪血清最佳稀释度的确定 | 第38-39页 |
| ·待检血清和阻断抗体作用时间的确定 | 第39页 |
| ·其他反应条件的确定 | 第39-41页 |
| ·临界值的确定 | 第41页 |
| ·特异性实验 | 第41-42页 |
| ·敏感性实验 | 第42-43页 |
| ·间接阻断ELISA与Western blot比较 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 结论与创新点 | 第44-46页 |
| 1 TTSuV2间接阻断ELISA方法的建立 | 第44-45页 |
| 2 创新点 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 附录 | 第51页 |
