摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 绪论 | 第10-37页 |
·引言 | 第10-11页 |
·microRNA简介和研究现状 | 第11-21页 |
·microRNA的发现和命名 | 第11-12页 |
·非编码microRNA的加工成熟 | 第12-13页 |
·非编码microRNA的作用机制 | 第13-14页 |
·非编码microRNA的靶点预测和验证 | 第14-17页 |
·非编码microRNA和蛋白相互作用及其功能的调节 | 第17-21页 |
·microRNA和疾病关系 | 第21-29页 |
·microRNA和遗传性疾病 | 第21-22页 |
·microRNA和病毒感染性疾病 | 第22-24页 |
·microRNA和心血管疾病 | 第24-26页 |
·microRNA和肿瘤 | 第26-29页 |
·诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPS) | 第29-37页 |
·诱导多能干细胞技术的发展 | 第30页 |
·诱导多能干细胞疾病模型中的应用 | 第30-32页 |
·诱导多能干细胞的发生的机制研究 | 第32-34页 |
·诱导多能干细胞和胚胎干细胞的异同 | 第34-35页 |
·microRNA,胚胎干细胞和诱导多能干细胞技术 | 第35-37页 |
第二章 材料和方法 | 第37-55页 |
·实验试剂和材料 | 第37-40页 |
·细胞 | 第37页 |
·主要试剂和材料 | 第37-39页 |
·主要仪器设备 | 第39-40页 |
·实验方法 | 第40-55页 |
·细胞分离和培养 | 第40页 |
·感受态的制备 | 第40-41页 |
·质粒构建 | 第41-42页 |
·磷酸钙和脂质体转染 | 第42-43页 |
·多能干细胞的诱导 | 第43页 |
·microRNA和mRNA 实时定量PCR | 第43-44页 |
·重编程效率的确定 | 第44页 |
·小鼠iPS 克隆的挑取、培养和鉴定 | 第44页 |
·内源多能性相关基因的表达激活和外源病毒的基因沉默 | 第44-45页 |
·内源的多能性OCT4,NANOG 基因启动子区域的去甲基化 | 第45页 |
·嵌合体鼠注射 | 第45页 |
·DNA微阵列分析基因表达 | 第45-46页 |
·细胞总RNA 的提取 | 第46页 |
·逆转录和qPCR | 第46-47页 |
·Western blotting | 第47-49页 |
·免疫荧光 | 第49-50页 |
·Celltiter-Glo检测microRNA 对细胞活性的影响 | 第50-51页 |
·EdU 实验验证miRNA 对细胞增殖的影响 | 第51页 |
·细胞周期检测 | 第51页 |
·荧光素酶双报告基因法验证miRNA 靶点 | 第51-52页 |
·BALB/c 裸鼠皮下移植瘤模型试验 | 第52页 |
·引物列表 | 第52-54页 |
·统计学方法计算和常用软件 | 第54-55页 |
第三章 实验结果和讨论 | 第55-88页 |
·miRNA cluster miR-302-367 促进诱导多能干细胞的研究 | 第55-76页 |
·选择miRNA簇作为体细胞重编程的研究对象 | 第55-57页 |
·验证miRNA在ES细胞中和MEF细胞中表达差异 | 第57页 |
·miRNA cluster A ,B,C成员的种子序列 | 第57-58页 |
·miRNA cluster A ,B,C的过表达 | 第58-59页 |
·microRNA簇B,C可以促进体细胞重编程效率 | 第59-61页 |
·体细胞重编程获得的诱导多能干细胞的体外鉴定 | 第61-63页 |
·体细胞重编程获得的诱导多能干细胞的体内鉴定 | 第63-65页 |
·Yamanaka因子参与诱导miRNA cluster成员表达 | 第65-66页 |
·miRNA簇中各个成员功能的验证 | 第66-67页 |
·miR-106a-363 和miR-302-367 在诱导过程中引起的基因变化 | 第67-69页 |
·Tgfbr2 是MiR-302 的靶点 | 第69-70页 |
·miR-302-367 促进了MET的过程 | 第70-71页 |
·miR-302-367 促进人的体细胞编程 | 第71-72页 |
·Yamanaka因子在人体细胞重编程过程中调节miRNA簇成员表达 | 第72-73页 |
·讨论和结论 | 第73-76页 |
·miR-145 抑制肺癌细胞的增殖研究 | 第76-88页 |
·miR-145 对于肺癌细胞增殖的影响 | 第76-80页 |
·miR-145 对于肺癌细胞增殖的抑制是通过影响细胞周期引起的 | 第80-82页 |
·CDK6 是miR-145 的作用靶点 | 第82-84页 |
·miR-145 抑制体内移植瘤的生长 | 第84-86页 |
·讨论和结论 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
再读期间发表的论文和研究成果 | 第105-106页 |