| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 中英文略语表 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-33页 |
| ·RNAi与siRNA递送 | 第12-13页 |
| ·纳米载体概述 | 第13-14页 |
| ·纳米材料作为siRNA递送载体的要素 | 第14-18页 |
| ·纳米材料对siRNA分子的保护 | 第15页 |
| ·纳米材料在体内的靶向递送 | 第15-16页 |
| ·纳米材料进入细胞的能力 | 第16页 |
| ·纳米材料对siRNA溶酶体逃逸的影响 | 第16-18页 |
| ·纳米材料作为siRNA载体时的细胞毒性 | 第18页 |
| ·金纳米棒(gold nanorods,AuNRs)的生物医学应用研究概述 | 第18-23页 |
| ·AuNRs的合成及特性 | 第19-21页 |
| ·AuNRs在生物医药领域的应用研究进展 | 第21-22页 |
| ·AuNRs与细胞的相互作用 | 第22页 |
| ·细胞内AuNRs的表征 | 第22-23页 |
| ·普鲁兰精胺(Pullulan-spermine,Ps)概述 | 第23-24页 |
| ·本课题的研究思路和意义 | 第24-25页 |
| ·AuNRs作为PAR-1 siRNA载体抑制乳腺癌细胞转移功效的研究 | 第24-25页 |
| ·以Ps作为siRNA载体,研究血清环境对RNAi效率的作用机制 | 第25页 |
| 参考文献 | 第25-33页 |
| 第二章 材料、仪器设备和实验方法 | 第33-47页 |
| ·主要材料和试剂 | 第33-34页 |
| ·主要实验耗材和仪器设备 | 第34-35页 |
| ·主要实验耗材 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-46页 |
| ·AuNRs在细胞内定位的评价 | 第35-38页 |
| ·细胞培养 | 第35页 |
| ·AuNRs的制备和修饰 | 第35页 |
| ·AuNRs与细胞孵育后的MTS检测 | 第35-36页 |
| ·AuNRs孵育后细胞骨架的观察 | 第36页 |
| ·TEM样品制备和观察 | 第36-37页 |
| ·ICP-MS测试 | 第37页 |
| ·含AuNRs细胞的活细胞观察 | 第37页 |
| ·Western blot | 第37-38页 |
| ·活细胞内AuNRs的定量 | 第38-39页 |
| ·含不同血清或白蛋白培养基的配置 | 第38页 |
| ·UV-Vis-NIR光谱测量 | 第38页 |
| ·含AuNRs细胞的UV-Vis-NIR光谱扫描 | 第38页 |
| ·TSPR峰面积的计算 | 第38页 |
| ·细胞裂解液的制备 | 第38-39页 |
| ·TSPR峰面积与AuNRs数量的模拟标准曲线的建立 | 第39页 |
| ·暗场显微镜观察 | 第39页 |
| ·透射电镜(TEM)观察 | 第39页 |
| ·AuNRs作为siRNA载体 | 第39-43页 |
| ·实验器具和耗材去除RNA酶处理 | 第39页 |
| ·紫外-可见-近红外光谱(UV-Vis-NIR)的测试 | 第39-40页 |
| ·扫描电子显微镜(SEM)观察 | 第40页 |
| ·动态光散射测试(DLS) | 第40页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第40页 |
| ·AuNRs与PAR-1 siRNA复合物的XPS测试 | 第40页 |
| ·激光共聚焦显微镜(confocal)观察 | 第40-41页 |
| ·TEM观察 | 第41页 |
| ·AuNRs@PAR-1 siRNA(AuNRs与PAR-1 siRNA复合物)的配制 | 第41页 |
| ·细胞RNAi干扰操作 | 第41页 |
| ·Real time PCR检测PAR-1 mRNA表达 | 第41-42页 |
| ·流式细胞术检测PAR-1蛋白的表达 | 第42页 |
| ·Tranwell迁移实验评价细胞的迁移能力 | 第42-43页 |
| ·MTS测试 | 第43页 |
| ·台盼蓝染色后细胞计数 | 第43页 |
| ·普鲁兰精胺(Ps)作为siRNA载体 | 第43-46页 |
| ·Ps的合成 | 第43页 |
| ·Ps与siRNA复合物(Ps-siRNA)的制备 | 第43-44页 |
| ·Ps-siRNA于水溶液和PBS中的DLS测试 | 第44页 |
| ·Ps-siRNA分散于水和PBS中后的琼脂糖凝胶电泳 | 第44页 |
| ·Ps-siRNA的原子力显微镜(AFM)观察 | 第44页 |
| ·Ps-siRNA分散于不同血清含量培养基中的DLS测试 | 第44页 |
| ·Ps-siRNA的RNAi实验过程 | 第44页 |
| ·confocal观察 | 第44-45页 |
| ·环境扫描显微镜(ESEM)观察 | 第45页 |
| ·MTS测试 | 第45页 |
| ·荧光光谱检测 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-47页 |
| 第三章 AuNRs在细胞中的动态分布研究--以乳腺癌细胞为例 | 第47-64页 |
| ·AuNRs的合成和表征 | 第47页 |
| ·AuNRs对细胞存活和细胞骨架的影响 | 第47-48页 |
| ·AuNRs进入细胞的观察 | 第48-51页 |
| ·细胞内AuNRs的外排 | 第51-52页 |
| ·细胞内AuNRs的稀释 | 第52-58页 |
| ·AuNRs摄入与细胞自噬水平的关系 | 第58-60页 |
| ·AuNRs在细胞内的定位和转归小结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 第四章 活细胞中AuNRs及其聚集状态的定量分析方法研究 | 第64-74页 |
| ·AuNRs在血清培养基中分散性的确定 | 第64-65页 |
| ·含AuNRs细胞的UV-Vis-NIR光谱 | 第65-67页 |
| ·细胞内AuNRs的TSPR峰面积计算和AuNRs数量转换 | 第67-70页 |
| ·细胞培养后上清残留AuNRs的吸收光谱测量 | 第70页 |
| ·基于TSPR峰定量方法的检测下限确定 | 第70-71页 |
| ·细胞内AuNRs定量的总结 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-74页 |
| 第五章 AuNRs作为PAR-1 siRNA载体抑制乳腺癌细胞转移的研究 | 第74-85页 |
| ·AuNRs与siRNA结合的表征 | 第74-75页 |
| ·AuNRs@PAR-1 siRNA中AuNRs与siRNA比例的选择 | 第75-76页 |
| ·AuNRs介导PAR-1 siRNA进入细胞 | 第76-79页 |
| ·AuNRs@PAR-1 siRNA介导的干扰效应 | 第79-80页 |
| ·AuNRs@PAR-1 siRNA抑制细胞的体外迁移 | 第80-81页 |
| ·AuNRs的细胞毒性评价 | 第81-83页 |
| ·AuNRs作为siRNA载体小结 | 第83页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| 第六章 血清对RNAi效率的影响及机理研究--以普鲁兰精胺为例 | 第85-101页 |
| ·Ps与siRNA复合物(Ps-siRNA)的表征 | 第85-87页 |
| ·不同N/P比Ps-siRNA的干扰效率 | 第87页 |
| ·不同血清含量培养基中Ps-siRNA的表征 | 第87-88页 |
| ·血清含量对Ps-siRNA的RNAi效率的影响 | 第88-89页 |
| ·血清含量对Ps-siRNA进入细胞的影响 | 第89-91页 |
| ·血清浓度对siRNA在细胞内分布和溶酶体逃逸的影响 | 第91-93页 |
| ·氯喹对不同血清浓度下Ps-siRNA干扰效率的影响 | 第93-95页 |
| ·血清对Ps-siRNA毒性的影响 | 第95-97页 |
| ·Ps作为siRNA载体小结 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-101页 |
| 第七章 展望 | 第101-102页 |
| 附录1--非论文综述 | 第102-117页 |
| 摘要 | 第102页 |
| Abstract | 第102-103页 |
| 1. 碳纳米管与核酸分子的相互作用及复合物的制备 | 第103-104页 |
| 2. 碳纳米管-核酸复合物的表征 | 第104-105页 |
| 3. 碳纳米管-核酸复合物在细胞中的定位 | 第105-106页 |
| 4. 碳纳米管作为核酸物质转运载体的研究进展 | 第106-108页 |
| 5 小结 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-114页 |
| 附表 | 第114-117页 |
| 附录2 研究生期间发表的论文 | 第117-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
