中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
符号说明 | 第8-9页 |
第一章 新城疫病毒溶瘤机制研究进展 | 第9-17页 |
1. 新城疫病毒概况 | 第9-10页 |
·NDV形态结构 | 第9-10页 |
·NDV分子生物学特征 | 第10页 |
2. NDV溶瘤机制研究进展 | 第10-16页 |
·NDV溶瘤机制的体外研究 | 第11-15页 |
·NDV溶瘤作用的临床研究 | 第15-16页 |
3. 展望 | 第16-17页 |
第二章 实验材料及方法 | 第17-28页 |
1. 实验材料 | 第17-20页 |
·新城疫病毒毒株 | 第17页 |
·细胞及BALB/c裸鼠 | 第17页 |
·主要实验仪器 | 第17-18页 |
·主要试剂和药品 | 第18-19页 |
·溶液配制 | 第19-20页 |
2. 实验方法 | 第20-28页 |
·CEF(鸡胚成纤维原代细胞)制备 | 第20页 |
·NDV鸡胚尿囊腔接毒法扩毒 | 第20-21页 |
·TCID_(50)法确定病毒滴度 | 第21页 |
·A549/DDP细胞培养 | 第21页 |
·病毒增殖实验 | 第21-22页 |
·FACS检测细胞凋亡 | 第22页 |
·Hoechst 33258染色观察细胞核形态 | 第22页 |
·MTT法检测NDV对肿瘤细胞的杀伤作用 | 第22-23页 |
·Western blot分析凋亡相关蛋白 | 第23-26页 |
·细胞处理 | 第23页 |
·蛋白样品准备 | 第23页 |
·SDS-PAGE | 第23-24页 |
·制备分离胶、浓缩胶 | 第23-24页 |
·电泳 | 第24页 |
·转印 | 第24页 |
·封闭 | 第24-25页 |
·一抗作用 | 第25-26页 |
·二抗作用 | 第26页 |
·ECL | 第26页 |
·裸鼠皮下荷瘤模型的建立 | 第26-27页 |
·裸鼠肿瘤石蜡切片H&E染色和TUNEL分析 | 第27页 |
·QRT-PCR | 第27页 |
·统计分析 | 第27-28页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第28-40页 |
前言 | 第28-29页 |
实验结果 | 第29-37页 |
1. NDV FMW株在A549/DDP细胞中高效复制并诱导凋亡 | 第29-31页 |
2. NDV FMW株诱导的A549/DDP细胞凋亡依赖于caspase活化 | 第31-33页 |
3. MAPK和Akt通路参与NDV FMW株诱导的A549/DDP细胞凋亡 | 第33-35页 |
4. NDV FMW株对A549/DDP荷瘤裸鼠的抑瘤作用 | 第35-37页 |
讨论 | 第37-40页 |
参考文献 | 第40-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第48-49页 |