| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-42页 |
| 1、蛋白质结构与功能关系 | 第13-14页 |
| 2、蛋白质折叠与错误折叠研究现状 | 第14-19页 |
| ·、蛋白质折叠 | 第14-17页 |
| ·、蛋白质错误折叠与疾病的关系 | 第17-19页 |
| ·、"月光"蛋白 | 第19页 |
| 3、α-乳白蛋白简介 | 第19-24页 |
| ·、α-乳白蛋白的分子结构 | 第20-21页 |
| ·、α-乳白蛋白的折叠与错误折叠研究 | 第21-22页 |
| ·、α-乳白蛋白的功能 | 第22-24页 |
| 4、HAMLET研究概况 | 第24-32页 |
| ·、HAMLET获取方法 | 第24-25页 |
| ·、HAMLET结构特点 | 第25-26页 |
| ·、HAMLET细胞作用机制研究进展 | 第26-30页 |
| ·、HAMLET临床研究现状与应用前景 | 第30-32页 |
| 5、细胞凋亡概述 | 第32-34页 |
| 6、测定蛋白质结构变化的常用方法和技术 | 第34-40页 |
| ·、直接直接测定生物大分子三维结构的方法 | 第34-35页 |
| ·、生物质谱技术 | 第35-36页 |
| ·、微量热技术 | 第36-37页 |
| ·、荧光光谱法 | 第37-38页 |
| ·、圆二色技术 | 第38-39页 |
| ·、透射电镜技术 | 第39-40页 |
| 7、本课题的研究内容和研究意义 | 第40-42页 |
| 第二章 油酸诱导α-乳白蛋白中间体形成具有细胞毒性的聚集体 | 第42-58页 |
| 摘要 | 第42页 |
| 引言 | 第42-43页 |
| 1、材料和方法 | 第43-48页 |
| ·、材料 | 第43页 |
| ·、人α-乳白蛋白的提取 | 第43-44页 |
| ·、α-乳白蛋白酸变性的ITC检测 | 第44-45页 |
| ·、聚集体的生成 | 第45页 |
| ·、紫外吸收光谱 | 第45页 |
| ·、内源荧光光谱 | 第45页 |
| ·、圆二色光谱实验 | 第45-46页 |
| ·、相图方法 | 第46页 |
| ·、油酸与α-乳白蛋白相互作用检测 | 第46-47页 |
| ·、细胞毒性检测 | 第47-48页 |
| 2、结果 | 第48-57页 |
| ·、酸诱导α-乳白蛋白的去折叠 | 第48-50页 |
| ·、不同pH条件下人α-乳白蛋白的荧光相图分析 | 第48-49页 |
| ·、等温滴定量热实验 | 第49-50页 |
| ·、紫外光谱检测油酸诱导α-乳白蛋白聚集的产生 | 第50-53页 |
| ·、ITC实验检测油酸与α-乳白蛋白的相互作用 | 第53-54页 |
| ·、α-乳白蛋白聚集体的细胞毒性 | 第54-57页 |
| 3、讨论 | 第57-58页 |
| 第三章 不饱和脂肪酸诱导α-乳白蛋白形成有毒聚集诱导肿瘤细胞凋亡 | 第58-87页 |
| 摘要 | 第58页 |
| 引言 | 第58-60页 |
| 1、材料和方法 | 第60-65页 |
| ·、材料 | 第60页 |
| ·、紫外吸收光谱 | 第60页 |
| ·、透射电子显微镜检测蛋白聚集 | 第60-61页 |
| ·、内源荧光光谱 | 第61页 |
| ·、ANS结合检测蛋白质疏水基团的暴露 | 第61页 |
| ·、圆二色光谱实验 | 第61页 |
| ·、荧光相图方法 | 第61-62页 |
| ·、ESI-TOF质谱 | 第62-63页 |
| ·、MALDI-TOF质谱 | 第63页 |
| ·、细胞毒性检测 | 第63-64页 |
| ·、Hoechst 33258染色 | 第64页 |
| ·、DNA含量分析 | 第64页 |
| ·、Annexin V-FITC结合PI双染检测凋亡 | 第64-65页 |
| ·、统计分析 | 第65页 |
| 2、结果 | 第65-84页 |
| ·、酸诱导apo-BLA的去折叠 | 第65-66页 |
| ·、紫外吸收光谱检测脂肪酸诱导α-乳白蛋白聚集的生成 | 第66-68页 |
| ·、聚集形成具有时间依赖性和浓度依赖性 | 第66-67页 |
| ·、不同脂肪酸对形成聚集的影响 | 第67-68页 |
| ·、脂肪酸诱导α-乳白蛋白的聚集体在生理pH条件下的结构特征 | 第68-74页 |
| ·、透射电镜检测聚集体溶解后的形态 | 第68-69页 |
| ·、蛋白聚集体在中性pH条件下的光谱学特征 | 第69-72页 |
| ·、溶解后的蛋白聚集体的质谱分析 | 第72-74页 |
| ·、α-乳白蛋白聚集体对细胞的作用 | 第74-84页 |
| ·、α-乳白蛋白聚集的细胞毒性分析 | 第74-78页 |
| ·、荧光染色检测凋亡 | 第78-80页 |
| ·、单染结合流式细胞仪分析检测细胞凋亡 | 第80-82页 |
| ·、双染结合流式细胞仪分析检测细胞凋亡 | 第82-84页 |
| 3、讨论 | 第84-87页 |
| 参考文献 | 第87-105页 |
| 攻读博士学位期间发表和待发表的论文目录 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
