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Mig重组蛋白的制备及其预防化疗骨髓毒副作用的研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-19页
第一章:综述第19-39页
 1. 造血干细胞与肿瘤治疗第19-26页
   ·干细胞第19-20页
   ·造血干细胞(HSC)第20-24页
   ·肿瘤治疗中的骨髓抑制及再生第24-26页
 2. 重组蛋白药物第26-31页
   ·重组蛋白药物的历史第26-27页
   ·重组蛋白药物的分类第27-28页
   ·重组蛋白药物的特点第28-29页
   ·重组蛋白药物的现状第29-30页
   ·肿瘤化疗后骨髓抑制治疗的重组蛋白药物第30-31页
 3. IFN-γ诱导的单核因子Mig第31-36页
   ·概述第31页
   ·Mig的细胞表达、基因定位及结构特征第31-33页
   ·Mig的受体及其信号传导途径第33页
   ·Mig的功能研究第33-36页
 4. 研究目的与内容第36-39页
第二章 Mig在5-Fu化疗后小鼠骨髓的表达第39-53页
 1. 引言第39-40页
 2. 材料与方法第40-46页
 3. 结果第46-50页
   ·5-Fu化疗小鼠骨髓抑制模型第46-47页
   ·mRNA抽提第47页
   ·芯片实验结果第47-49页
   ·ELISA实验第49-50页
 4. 讨论第50-53页
第三章:重组小鼠Mig蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体血清制备第53-83页
 1. 前言第53-54页
 2. 材料与方法第54-68页
 3. 结果第68-82页
   ·质粒的构建,测序第68-71页
   ·小量诱导的结果,不同OD下的诱导第71-72页
   ·重组蛋白制备第72-73页
   ·不同缓冲条件下蛋白与介质结合能力检测第73-75页
   ·S重组Mig蛋白的阳离子交换层析第75-76页
   ·western鉴定第76页
   ·毛细管电泳检测蛋白纯度第76-78页
   ·蛋白纯化过程中各时期蛋白纯度及得率第78-79页
   ·纯化rMuMig蛋白的活性检测第79-80页
   ·Q柱子的使用第80-81页
   ·S和Q两种方法所得蛋白比较第81页
   ·anti-Mig抗体血清的制备和检验第81-82页
 4. 讨论第82-83页
第四章:重组人Mig蛋白的表达、纯化及活性检测第83-99页
 1. 前言第83-84页
 2. 材料与方法第84-90页
 3 结果第90-98页
   ·质粒的构建,测序第90-92页
   ·rHuMig蛋白的诱导表达和western鉴定第92-94页
   ·不同尿素浓度下蛋白变性比例的不同第94页
   ·rMuMig阳离子交换层析第94-95页
   ·蛋白纯化过程中各时期蛋白纯度及得率第95-96页
   ·纯化rHuMig蛋白的活性检测第96-98页
 4. 讨论第98-99页
第五章:在体表达Mig对骨髓的化疗保护作用研究第99-121页
 1. 引言第99-100页
 2. 材料与方法第100-107页
 3. 结果第107-117页
   ·真核表达Mig质粒的构建第107-111页
   ·质粒转染后的表达第111-112页
   ·Mig在体表达对正常小鼠的作用第112-114页
   ·Mig在体表达对5-Fu化疗小鼠的作用第114-117页
 4. 讨论第117-121页
第六章:rMuMig对骨髓的化疗保护作用研究第121-137页
 1. 前言第121-122页
 2. 材料方法第122-124页
 3. 结果第124-135页
   ·不同剂量rMuMig对正常小鼠的作用第124-127页
   ·提前应用rMuMig对5-Fu骨髓抑制小鼠具有化疗保护作用第127-132页
   ·5-Fu后应用rMuMig能够加剧对小鼠的损伤第132-133页
   ·应用anti-Mig 抗体血清能够促进5-Fu骨髓抑制小鼠的恢复第133-135页
 4. 讨论第135-137页
第七章: Mig蛋白对骨髓再生作用的机制研究第137-145页
 1. 前言第137页
 2. 材料方法第137-140页
 3. 结果第140-144页
   ·rMuMig对正常小鼠骨髓单个核细胞周期的影响第140-141页
   ·rMuMig对化疗恢复期骨髓单个核细胞周期的影响第141-142页
   ·rHuMig对骨髓单个核细胞周期的影响第142-143页
   ·rMuMig对造血祖细胞集落形成的影响第143-144页
 4. 讨论第144-145页
第八章:讨论第145-151页
 1. 造血系统以及化疗后骨髓再生的过程第145-146页
 2. 趋化因子对造血系统的作用第146-147页
 3. 趋化因子对肿瘤的作用第147页
 4. 临床肿瘤病人的Mig表达第147-150页
 5. 展望第150-151页
参考文献第151-158页
附录第158-166页
致谢第166-167页
攻读博士学位期间已发表和待发表的 SCI 期刊论文第167页
攻读博士学位期间已发表的核心期刊论文第167-168页
攻读博士学位期间已申请的专利第168页
攻读博士学位期间参与编写的著作第168页

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