摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-19页 |
第一章:综述 | 第19-39页 |
1. 造血干细胞与肿瘤治疗 | 第19-26页 |
·干细胞 | 第19-20页 |
·造血干细胞(HSC) | 第20-24页 |
·肿瘤治疗中的骨髓抑制及再生 | 第24-26页 |
2. 重组蛋白药物 | 第26-31页 |
·重组蛋白药物的历史 | 第26-27页 |
·重组蛋白药物的分类 | 第27-28页 |
·重组蛋白药物的特点 | 第28-29页 |
·重组蛋白药物的现状 | 第29-30页 |
·肿瘤化疗后骨髓抑制治疗的重组蛋白药物 | 第30-31页 |
3. IFN-γ诱导的单核因子Mig | 第31-36页 |
·概述 | 第31页 |
·Mig的细胞表达、基因定位及结构特征 | 第31-33页 |
·Mig的受体及其信号传导途径 | 第33页 |
·Mig的功能研究 | 第33-36页 |
4. 研究目的与内容 | 第36-39页 |
第二章 Mig在5-Fu化疗后小鼠骨髓的表达 | 第39-53页 |
1. 引言 | 第39-40页 |
2. 材料与方法 | 第40-46页 |
3. 结果 | 第46-50页 |
·5-Fu化疗小鼠骨髓抑制模型 | 第46-47页 |
·mRNA抽提 | 第47页 |
·芯片实验结果 | 第47-49页 |
·ELISA实验 | 第49-50页 |
4. 讨论 | 第50-53页 |
第三章:重组小鼠Mig蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体血清制备 | 第53-83页 |
1. 前言 | 第53-54页 |
2. 材料与方法 | 第54-68页 |
3. 结果 | 第68-82页 |
·质粒的构建,测序 | 第68-71页 |
·小量诱导的结果,不同OD下的诱导 | 第71-72页 |
·重组蛋白制备 | 第72-73页 |
·不同缓冲条件下蛋白与介质结合能力检测 | 第73-75页 |
·S重组Mig蛋白的阳离子交换层析 | 第75-76页 |
·western鉴定 | 第76页 |
·毛细管电泳检测蛋白纯度 | 第76-78页 |
·蛋白纯化过程中各时期蛋白纯度及得率 | 第78-79页 |
·纯化rMuMig蛋白的活性检测 | 第79-80页 |
·Q柱子的使用 | 第80-81页 |
·S和Q两种方法所得蛋白比较 | 第81页 |
·anti-Mig抗体血清的制备和检验 | 第81-82页 |
4. 讨论 | 第82-83页 |
第四章:重组人Mig蛋白的表达、纯化及活性检测 | 第83-99页 |
1. 前言 | 第83-84页 |
2. 材料与方法 | 第84-90页 |
3 结果 | 第90-98页 |
·质粒的构建,测序 | 第90-92页 |
·rHuMig蛋白的诱导表达和western鉴定 | 第92-94页 |
·不同尿素浓度下蛋白变性比例的不同 | 第94页 |
·rMuMig阳离子交换层析 | 第94-95页 |
·蛋白纯化过程中各时期蛋白纯度及得率 | 第95-96页 |
·纯化rHuMig蛋白的活性检测 | 第96-98页 |
4. 讨论 | 第98-99页 |
第五章:在体表达Mig对骨髓的化疗保护作用研究 | 第99-121页 |
1. 引言 | 第99-100页 |
2. 材料与方法 | 第100-107页 |
3. 结果 | 第107-117页 |
·真核表达Mig质粒的构建 | 第107-111页 |
·质粒转染后的表达 | 第111-112页 |
·Mig在体表达对正常小鼠的作用 | 第112-114页 |
·Mig在体表达对5-Fu化疗小鼠的作用 | 第114-117页 |
4. 讨论 | 第117-121页 |
第六章:rMuMig对骨髓的化疗保护作用研究 | 第121-137页 |
1. 前言 | 第121-122页 |
2. 材料方法 | 第122-124页 |
3. 结果 | 第124-135页 |
·不同剂量rMuMig对正常小鼠的作用 | 第124-127页 |
·提前应用rMuMig对5-Fu骨髓抑制小鼠具有化疗保护作用 | 第127-132页 |
·5-Fu后应用rMuMig能够加剧对小鼠的损伤 | 第132-133页 |
·应用anti-Mig 抗体血清能够促进5-Fu骨髓抑制小鼠的恢复 | 第133-135页 |
4. 讨论 | 第135-137页 |
第七章: Mig蛋白对骨髓再生作用的机制研究 | 第137-145页 |
1. 前言 | 第137页 |
2. 材料方法 | 第137-140页 |
3. 结果 | 第140-144页 |
·rMuMig对正常小鼠骨髓单个核细胞周期的影响 | 第140-141页 |
·rMuMig对化疗恢复期骨髓单个核细胞周期的影响 | 第141-142页 |
·rHuMig对骨髓单个核细胞周期的影响 | 第142-143页 |
·rMuMig对造血祖细胞集落形成的影响 | 第143-144页 |
4. 讨论 | 第144-145页 |
第八章:讨论 | 第145-151页 |
1. 造血系统以及化疗后骨髓再生的过程 | 第145-146页 |
2. 趋化因子对造血系统的作用 | 第146-147页 |
3. 趋化因子对肿瘤的作用 | 第147页 |
4. 临床肿瘤病人的Mig表达 | 第147-150页 |
5. 展望 | 第150-151页 |
参考文献 | 第151-158页 |
附录 | 第158-166页 |
致谢 | 第166-167页 |
攻读博士学位期间已发表和待发表的 SCI 期刊论文 | 第167页 |
攻读博士学位期间已发表的核心期刊论文 | 第167-168页 |
攻读博士学位期间已申请的专利 | 第168页 |
攻读博士学位期间参与编写的著作 | 第168页 |