| 致谢 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 献综述 | 第12-30页 |
| ·褐飞虱概述和危害及其防治 | 第12-17页 |
| ·褐飞虱生物学特征 | 第12-13页 |
| ·褐飞虱的取食 | 第13-14页 |
| ·褐飞虱的危害 | 第14-15页 |
| ·褐飞虱的防治 | 第15-17页 |
| ·农业防治 | 第15页 |
| ·生物防治 | 第15-16页 |
| ·物理防治 | 第16页 |
| ·化学防治 | 第16-17页 |
| ·抗性品种的选育 | 第17页 |
| ·RNA干扰技术 | 第17-22页 |
| ·RNAi的发现 | 第17-18页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第18-20页 |
| ·RNAi的系统性 | 第20-21页 |
| ·RNAi的作用特点 | 第21-22页 |
| ·RNAi在昆虫中的研究 | 第22-25页 |
| ·昆虫吸收dsRNA的机制 | 第22-23页 |
| ·RNAi防治害虫的优势 | 第23页 |
| ·RNAi技术防治害虫的实施方法 | 第23-25页 |
| ·注射法 | 第23-24页 |
| ·饲喂法 | 第24-25页 |
| ·转基因植物法 | 第25页 |
| ·RNAi在害虫控制中的应用 | 第25页 |
| ·转基因抗虫作物 | 第25-27页 |
| ·四种基因的概述及其筛选 | 第27-30页 |
| ·四种基因功能概述 | 第27-29页 |
| ·阳离子氨基酸转运蛋白(Cationic Amino Acid Transporter,CAT) | 第27-28页 |
| ·己糖转运蛋白(hexosetransporter) | 第28页 |
| ·核糖体蛋白(Ribosomal protein,RP) | 第28-29页 |
| ·基因筛选 | 第29-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-48页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·供试昆虫 | 第30页 |
| ·实验菌株 | 第30页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·质粒载体 | 第30页 |
| ·主要酶类及试剂盒 | 第30页 |
| ·其他试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-48页 |
| ·分子生物学实验方法 | 第31-38页 |
| ·质粒提取 | 第31-32页 |
| ·PrimeStar扩增的PCR反应 | 第32页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第32-33页 |
| ·凝胶回收 | 第33-34页 |
| ·高保真酶扩增产物加A反应 | 第34页 |
| ·连接反应 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌TG1感受态细胞的制备及转化 | 第35-36页 |
| ·根瘤土壤农杆菌(LBA4404)感受态细胞的制备及转化 | 第36-37页 |
| ·酶切反应 | 第37页 |
| ·褐飞虱cDNA的合成 | 第37-38页 |
| ·农杆菌介导的外源基因的转化 | 第38-40页 |
| ·水稻成熟胚愈伤组织的诱导 | 第38页 |
| ·农杆菌与水稻愈伤的共培养 | 第38-39页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第39-40页 |
| ·转化植株的再生与培养 | 第40页 |
| ·转基因干扰载体的构建 | 第40-42页 |
| ·干扰基因的选择 | 第40页 |
| ·干扰载体的组成 | 第40-41页 |
| ·干扰载体的构建 | 第41-42页 |
| ·外源基因转化水稻 | 第42页 |
| ·转基因水稻的Western Blot分析 | 第42-44页 |
| ·Trizol法提取植物组织蛋白质 | 第42-43页 |
| ·Western blot | 第43-44页 |
| ·转基因水稻的Northern blot分析 | 第44-46页 |
| ·Trizol法提取植物总RNA | 第44-45页 |
| ·Northern blot | 第45-46页 |
| ·转基因水稻的抗性分析 | 第46-48页 |
| ·温室水培阶段抗性分析 | 第46-47页 |
| ·转基因水稻的抗褐飞虱效果检测 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-57页 |
| ·转基因载体的鉴定 | 第48-50页 |
| ·干扰长片段(Long,L)和短片段(Short,S)的扩增 | 第48页 |
| ·干扰片段pGEM-T Easy载体的构建 | 第48-49页 |
| ·干扰表达载体的构建 | 第49-50页 |
| ·转基因水稻植株的获得 | 第50-51页 |
| ·转基因水稻的鉴定 | 第51-57页 |
| ·转基因水稻Western blot分析 | 第51-52页 |
| ·转基因水稻Northern blot分析 | 第52-53页 |
| ·转基因水稻的抗性分析 | 第53-57页 |
| ·温室水培阶段抗性分析 | 第53-54页 |
| ·转基因水稻的抗褐飞虱效果检测 | 第54-57页 |
| 4. 讨论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 作者简历 | 第66-67页 |
| 附录Ⅰ 常用的生化试剂及仪器 | 第67-69页 |
| 附录Ⅱ 常用的实验溶液配置方法 | 第69-74页 |