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蝴蝶兰ACC合成酶(ACS)反义基因植物表达载体的构建及遗传转化

致谢第1-7页
摘要第7-9页
1 文献综述第9-17页
   ·蝴蝶兰组培快繁及遗传转化的研究进展第9-13页
     ·蝴蝶兰的组织培养第9-10页
     ·蝴蝶兰的基因工程研究进展第10-13页
   ·反义 RNA 技术第13-14页
   ·ACS(乙烯合成酶)基因第14-17页
     ·ACS 基因的功能第14-15页
     ·ACS 基因的特性第15-16页
     ·ACS 基因克隆研究进展第16-17页
2 引言第17-18页
3 材料和方法第18-31页
   ·ACS 基因的合成第18-20页
     ·实验材料第18页
     ·实验方法第18-20页
   ·蝴蝶兰 ACS 基因的克隆第20-23页
     ·实验材料第20页
     ·试验方法第20-23页
   ·反义基因中间载体 pBI221-RACS 的构建及鉴定第23-24页
     ·实验材料第23页
     ·实验方法第23-24页
   ·反义植物表达载体 pCAMBIA3301-RACS 的构建及鉴定第24-27页
     ·实验材料第24页
     ·实验方法第24-27页
   ·重组农杆菌 E-pCAMBIA3301-RACS 对蝴蝶兰的遗传转化第27-29页
     ·实验材料第27页
     ·试验方法第27-29页
   ·转化植株的鉴定第29-31页
     ·GUS 活性检测第29页
     ·转化植株的 PCR 检测第29-31页
4 结果分析第31-39页
   ·蝴蝶兰 ACS 基因的合成与检测第31页
     ·RNA 样品的完整性检测第31页
     ·蝴蝶兰 ACS 基因的克隆与序列分析第31页
   ·重组质粒 pMD19-ACS 的检测与序列分析第31-32页
     ·重组质粒 pMD19-ACS 的 PCR 检测第31页
     ·重组质粒 pMD19-ACS 双酶切鉴定第31-32页
     ·重组质粒 pMD19-ACS 序列分析第32页
   ·中间载体 pBI221-RACS 的构建及鉴定第32-33页
   ·植物表达载体的构建及鉴定第33-34页
   ·重组农杆菌的鉴定第34页
   ·重组农杆菌 pCAMBIA3301-RACS 转化蝴蝶兰检测第34-39页
     ·蝴蝶兰组织快繁体系建立第34-35页
     ·抗性植株 PPT 筛选压力的确定第35-36页
     ·侵染时间对转化的影响第36页
     ·侵染浓度对转化的影响第36-37页
     ·乙酰丁香酮对转化的影响第37页
     ·美罗培南对重组农杆菌侵染蝴蝶兰原球茎的影响第37-38页
     ·蝴蝶兰抗性植株的检测第38-39页
5 结论与讨论第39-41页
   ·取材时间第39页
   ·反义植物表达载体的构建第39页
   ·农杆菌介导的蝴蝶兰转化第39-40页
   ·GUS 基因的 PCR 检测第40页
   ·展望第40-41页
参考文献第41-46页
英文摘要第46-47页

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