致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
1 文献综述 | 第9-17页 |
·蝴蝶兰组培快繁及遗传转化的研究进展 | 第9-13页 |
·蝴蝶兰的组织培养 | 第9-10页 |
·蝴蝶兰的基因工程研究进展 | 第10-13页 |
·反义 RNA 技术 | 第13-14页 |
·ACS(乙烯合成酶)基因 | 第14-17页 |
·ACS 基因的功能 | 第14-15页 |
·ACS 基因的特性 | 第15-16页 |
·ACS 基因克隆研究进展 | 第16-17页 |
2 引言 | 第17-18页 |
3 材料和方法 | 第18-31页 |
·ACS 基因的合成 | 第18-20页 |
·实验材料 | 第18页 |
·实验方法 | 第18-20页 |
·蝴蝶兰 ACS 基因的克隆 | 第20-23页 |
·实验材料 | 第20页 |
·试验方法 | 第20-23页 |
·反义基因中间载体 pBI221-RACS 的构建及鉴定 | 第23-24页 |
·实验材料 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-24页 |
·反义植物表达载体 pCAMBIA3301-RACS 的构建及鉴定 | 第24-27页 |
·实验材料 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-27页 |
·重组农杆菌 E-pCAMBIA3301-RACS 对蝴蝶兰的遗传转化 | 第27-29页 |
·实验材料 | 第27页 |
·试验方法 | 第27-29页 |
·转化植株的鉴定 | 第29-31页 |
·GUS 活性检测 | 第29页 |
·转化植株的 PCR 检测 | 第29-31页 |
4 结果分析 | 第31-39页 |
·蝴蝶兰 ACS 基因的合成与检测 | 第31页 |
·RNA 样品的完整性检测 | 第31页 |
·蝴蝶兰 ACS 基因的克隆与序列分析 | 第31页 |
·重组质粒 pMD19-ACS 的检测与序列分析 | 第31-32页 |
·重组质粒 pMD19-ACS 的 PCR 检测 | 第31页 |
·重组质粒 pMD19-ACS 双酶切鉴定 | 第31-32页 |
·重组质粒 pMD19-ACS 序列分析 | 第32页 |
·中间载体 pBI221-RACS 的构建及鉴定 | 第32-33页 |
·植物表达载体的构建及鉴定 | 第33-34页 |
·重组农杆菌的鉴定 | 第34页 |
·重组农杆菌 pCAMBIA3301-RACS 转化蝴蝶兰检测 | 第34-39页 |
·蝴蝶兰组织快繁体系建立 | 第34-35页 |
·抗性植株 PPT 筛选压力的确定 | 第35-36页 |
·侵染时间对转化的影响 | 第36页 |
·侵染浓度对转化的影响 | 第36-37页 |
·乙酰丁香酮对转化的影响 | 第37页 |
·美罗培南对重组农杆菌侵染蝴蝶兰原球茎的影响 | 第37-38页 |
·蝴蝶兰抗性植株的检测 | 第38-39页 |
5 结论与讨论 | 第39-41页 |
·取材时间 | 第39页 |
·反义植物表达载体的构建 | 第39页 |
·农杆菌介导的蝴蝶兰转化 | 第39-40页 |
·GUS 基因的 PCR 检测 | 第40页 |
·展望 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-46页 |
英文摘要 | 第46-47页 |