| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1 双孢蘑菇概述 | 第13-16页 |
| ·双孢蘑菇的分类地位及生物学特性 | 第13-14页 |
| ·双孢蘑菇的经济价值、营养价值及保健功能 | 第14-15页 |
| ·双孢蘑菇的经济价值 | 第14页 |
| ·双孢蘑菇的营养价值 | 第14页 |
| ·双孢蘑菇的保健功能 | 第14-15页 |
| ·双孢蘑菇人工栽培发展史 | 第15-16页 |
| 2 分子标记及其应用 | 第16-24页 |
| ·概述 | 第16-17页 |
| ·应用于食用菌研究的DNA 分子标记 | 第17-21页 |
| ·AFLP 标记 | 第17-18页 |
| ·RFLP 标记 | 第18页 |
| ·RAPD 标记 | 第18-19页 |
| ·SSR 标记 | 第19页 |
| ·ISSR 标记 | 第19-20页 |
| ·SNP 标记 | 第20页 |
| ·SRAP 标记 | 第20页 |
| ·TRAP 标记 | 第20-21页 |
| ·SCAR 标记 | 第21页 |
| ·分子标记在生物研究中的应用 | 第21-24页 |
| ·分子标记辅助育种 | 第21-22页 |
| ·亲缘关系分析及遗传多样性研究 | 第22-23页 |
| ·基因定位、遗传图谱及图位克隆的建立 | 第23-24页 |
| ·用于疾病诊断和遗传病连锁分析 | 第24页 |
| 3 研究目的与意义 | 第24-27页 |
| 第二章 双孢蘑菇种质资源的SRAP-PCR 扩增 | 第27-43页 |
| 1 材料与方法 | 第27-34页 |
| ·供试材料 | 第27页 |
| ·仪器与试剂 | 第27-30页 |
| ·主要仪器 | 第27-29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·DNA 提取试剂 | 第29页 |
| ·PCR 试剂 | 第29-30页 |
| ·电泳试剂 | 第30页 |
| ·DNA 提取 | 第30-31页 |
| ·DNA 提取质量的验证 | 第31-32页 |
| ·纯度和浓度 | 第31页 |
| ·DNA 电泳与凝胶成像 | 第31-32页 |
| ·18S rDNA 的PCR 验证 | 第32页 |
| ·SRAP-PCR 扩增体系及扩增程序的建立 | 第32-33页 |
| ·扩增体系及扩增程序的初步确定 | 第32页 |
| ·扩增体系及扩增程序的优化 | 第32-33页 |
| ·PCR 扩增产物的检测 | 第33页 |
| ·SRAP-PCR 扩增反应引物的筛选 | 第33页 |
| ·SRAP-PCR 扩增 | 第33页 |
| ·SRAP-PCR 扩增条带多态性分析 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-41页 |
| ·DNA 提取质量的验证 | 第34-36页 |
| ·纯度和浓度 | 第34页 |
| ·DNA 电泳和 18S rDNA-PCR 验证 | 第34-36页 |
| ·SRAP-PCR 扩增体系的建立 | 第36-39页 |
| ·SRAP-PCR 扩增程序的优化 | 第36页 |
| ·Mg~(2+)浓度对SRAP-PCR 扩增的影响 | 第36-37页 |
| ·TaqDNA 聚合酶浓度对SRAP-PCR 扩增的影响 | 第37页 |
| ·dNTPs 浓度对SRAP-PCR 扩增的影响 | 第37页 |
| ·引物浓度对SRAP-PCR 扩增的影响 | 第37-38页 |
| ·模板DNA 用量对SRAP-PCR 扩增的影响 | 第38-39页 |
| ·SRAP-PCR 扩增体系及扩增程序的确定 | 第39页 |
| ·SRAP-PCR 扩增条带多态性分析 | 第39-41页 |
| 3 讨论与小结 | 第41-43页 |
| 第三章 双孢蘑菇种质资源的ISSR-PCR 扩增 | 第43-54页 |
| 1 材料与方法 | 第43-45页 |
| ·供试材料 | 第43页 |
| ·仪器与试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器、DNA 提取试剂及电泳试剂 | 第43页 |
| ·PCR 试剂 | 第43页 |
| ·DNA 提取和DNA 提取质量的验证 | 第43-44页 |
| ·ISSR-PCR 扩增体系及扩增程序的建立 | 第44-45页 |
| ·扩增体系及扩增程序的初步确定 | 第44页 |
| ·扩增体系的优化 | 第44-45页 |
| ·扩增程序的优化 | 第45页 |
| ·PCR 扩增产物的检测 | 第45页 |
| ·ISSR-PCR 扩增反应引物的筛选 | 第45页 |
| ·ISSR-PCR 扩增 | 第45页 |
| ·ISSR-PCR 扩增条带多态性分析 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-52页 |
| ·ISSR-PCR 扩增体系的建立 | 第45-47页 |
| ·BioReady rTaq 酶浓度对ISSR-PCR 扩增的影响 | 第45-46页 |
| ·dNTPs 浓度对ISSR-PCR 扩增的影响 | 第46页 |
| ·引物浓度对ISSR-PCR 扩增的影响 | 第46-47页 |
| ·模板DNA 用量对ISSR-PCR 扩增的影响 | 第47页 |
| ·引物及其适宜退火温度的筛选 | 第47-51页 |
| ·ISSR-PCR 扩增体系及扩增程序的确定 | 第51页 |
| ·ISSR-PCR 扩增条带多态性分析 | 第51-52页 |
| 3 讨论与小结 | 第52-54页 |
| 第四章 双孢蘑菇种质资源的RAPD-PCR 扩增 | 第54-59页 |
| 1 材料与方法 | 第54-55页 |
| ·供试材料 | 第54页 |
| ·仪器与试剂 | 第54页 |
| ·主要仪器、DNA 提取试剂及电泳试剂 | 第54页 |
| ·PCR 试剂 | 第54页 |
| ·DNA 提取和DNA 提取质量的验证 | 第54页 |
| ·RAPD-PCR 扩增体系及扩增程序 | 第54-55页 |
| ·PCR 扩增产物的检测 | 第55页 |
| ·RAPD-PCR 扩增反应引物的筛选 | 第55页 |
| ·RAPD-PCR 扩增 | 第55页 |
| ·RAPD-PCR 扩增条带多态性分析 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-57页 |
| ·RAPD-PCR 扩增条带多态性分析 | 第55-57页 |
| 3 讨论与小结 | 第57-59页 |
| 第五章 双孢蘑菇品种的聚类分析及遗传图谱的建立 | 第59-64页 |
| 1 统计分析方法 | 第59页 |
| 2 聚类分析及遗传图谱的建立 | 第59-63页 |
| ·相似性系数矩阵图分析 | 第60页 |
| ·聚类分析 | 第60-63页 |
| 3 讨论与小结 | 第63-64页 |
| 第六章 双孢蘑菇种质资源SCAR 标记的建立 | 第64-87页 |
| 1 材料与方法 | 第64-67页 |
| ·供试材料 | 第64页 |
| ·仪器与试剂 | 第64页 |
| ·主要仪器、电泳试剂 | 第64页 |
| ·PCR 试剂 | 第64页 |
| ·试验方法 | 第64-67页 |
| ·特异条带的筛选 | 第64-65页 |
| ·特异片段的回收与纯化 | 第65页 |
| ·特异片段的克隆、测序 | 第65-66页 |
| ·SCAR 引物的设计与合成 | 第66页 |
| ·SCAR 引物退火温度的筛选 | 第66-67页 |
| ·SCAR 引物的验证 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-84页 |
| ·特异条带的筛选结果 | 第67-72页 |
| ·特异片段的克隆、测序结果 | 第72-77页 |
| ·SCAR 引物的设计、合成 | 第77页 |
| ·SCAR 引物退火温度的优化 | 第77-80页 |
| ·SCAR 引物的验证结果 | 第80-84页 |
| 3 讨论与小结 | 第84-87页 |
| 第七章 全文总结与展望 | 第87-90页 |
| 1 主要研究结论 | 第87-88页 |
| ·建立了适合于双孢蘑菇 SRAP-PCR、ISSR-PCR 扩增的扩增程序及扩增体系 | 第87页 |
| ·建立了 40 种我国主要双孢蘑菇品种的 DNA 指纹图谱 | 第87页 |
| ·SRAP、ISSR 和 RAPD 三种分子标记扩增条带的多态性分析 | 第87-88页 |
| ·建立了 40 种双孢蘑菇的相似性系数矩阵图和遗传关系树状图 | 第88页 |
| ·建立了稳定的 SCAR 标记 | 第88页 |
| 2 展望 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 附录1 | 第98-99页 |
| 附录2 | 第99页 |
