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针对HIV-1 vif基因的siRNA作用研究

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
英文缩写词第6-11页
第1章 绪论第11-21页
   ·艾滋病及 HIV-1 病毒简介第11-13页
     ·艾滋病及其流行状况第11页
     ·HIV-1 病毒的结构第11-12页
     ·HIV-1 病毒的生活周期第12-13页
   ·基于 RNA 的抗 HIV-1 基因治疗研究进展第13-17页
     ·反义 RNA 在抗 HIV-1 基因治疗中的应用第14页
     ·核酶在抗 HIV-1 基因治疗中的应用第14-15页
     ·RNA 诱饵在抗 HIV-1 基因治疗中的应用第15页
     ·RNA 干扰及其在抗 HIV-1 基因治疗中的应用第15-17页
   ·HIV-1Vif 蛋白研究进展第17-19页
     ·HIV-1 Vif 蛋白的结构第17-18页
     ·HIV-1 Vif 蛋白的生物学功能第18-19页
   ·研究目的及内容第19-20页
     ·研究目的第19页
     ·研究内容第19-20页
   ·研究技术路线第20-21页
第2章 靶向 HIV-1 vif 基因的小干扰 RNA表达质粒的构建第21-33页
   ·实验材料第21-22页
     ·实验菌株与质粒第21页
     ·工具酶与试剂第21页
     ·小干扰 RNA 序列合成与测序第21页
     ·主要仪器第21-22页
     ·培养基与所需液体的配制第22页
   ·实验方法第22-28页
     ·针对 vif 基因的小干扰 RNA 表达质粒 pSUPER.neo.retro-shRNA 的构建第22-26页
     ·转化与菌落挑取第26页
     ·碱裂解法小提质粒第26-27页
     ·质粒的鉴定第27页
     ·中提质粒第27-28页
     ·质粒转染第28页
   ·实验结果第28-30页
     ·vif 基因特异性 pSUPER.neo.retro-shRNA 的构建第28-30页
     ·荧光显微镜间接检测 shRNA 的表达第30页
   ·讨论第30-31页
   ·本章小结第31-33页
第3章 靶点特异性的 siRNA对 HIV-1 vif 基因表达的抑制作用第33-49页
   ·实验材料第33-35页
     ·细胞株和质粒第33页
     ·主要仪器第33-34页
     ·实验相关试剂第34-35页
   ·实验方法第35-41页
     ·细胞培养第35页
     ·细胞转染第35-36页
     ·Western Blot 检测第36-38页
     ·Real-time PCR第38-40页
     ·siRNA 对 HIV-1 假病毒抑制作用检测第40-41页
   ·实验结果第41-47页
     ·Western Blot 检测 Vif 蛋白表达第41-43页
     ·Real-time PCR 技术对 vif mRNA 拷贝数进行相对定量第43-45页
     ·siRNA 对 HIV-1 假病毒感染力的影响第45-47页
   ·讨论第47-48页
   ·本章小结第48-49页
结论第49-51页
参考文献第51-55页
攻读硕士学位其间发表的学术论文第55-57页
致谢第57页

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