摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
英文缩写词 | 第6-11页 |
第1章 绪论 | 第11-21页 |
·艾滋病及 HIV-1 病毒简介 | 第11-13页 |
·艾滋病及其流行状况 | 第11页 |
·HIV-1 病毒的结构 | 第11-12页 |
·HIV-1 病毒的生活周期 | 第12-13页 |
·基于 RNA 的抗 HIV-1 基因治疗研究进展 | 第13-17页 |
·反义 RNA 在抗 HIV-1 基因治疗中的应用 | 第14页 |
·核酶在抗 HIV-1 基因治疗中的应用 | 第14-15页 |
·RNA 诱饵在抗 HIV-1 基因治疗中的应用 | 第15页 |
·RNA 干扰及其在抗 HIV-1 基因治疗中的应用 | 第15-17页 |
·HIV-1Vif 蛋白研究进展 | 第17-19页 |
·HIV-1 Vif 蛋白的结构 | 第17-18页 |
·HIV-1 Vif 蛋白的生物学功能 | 第18-19页 |
·研究目的及内容 | 第19-20页 |
·研究目的 | 第19页 |
·研究内容 | 第19-20页 |
·研究技术路线 | 第20-21页 |
第2章 靶向 HIV-1 vif 基因的小干扰 RNA表达质粒的构建 | 第21-33页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·实验菌株与质粒 | 第21页 |
·工具酶与试剂 | 第21页 |
·小干扰 RNA 序列合成与测序 | 第21页 |
·主要仪器 | 第21-22页 |
·培养基与所需液体的配制 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-28页 |
·针对 vif 基因的小干扰 RNA 表达质粒 pSUPER.neo.retro-shRNA 的构建 | 第22-26页 |
·转化与菌落挑取 | 第26页 |
·碱裂解法小提质粒 | 第26-27页 |
·质粒的鉴定 | 第27页 |
·中提质粒 | 第27-28页 |
·质粒转染 | 第28页 |
·实验结果 | 第28-30页 |
·vif 基因特异性 pSUPER.neo.retro-shRNA 的构建 | 第28-30页 |
·荧光显微镜间接检测 shRNA 的表达 | 第30页 |
·讨论 | 第30-31页 |
·本章小结 | 第31-33页 |
第3章 靶点特异性的 siRNA对 HIV-1 vif 基因表达的抑制作用 | 第33-49页 |
·实验材料 | 第33-35页 |
·细胞株和质粒 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33-34页 |
·实验相关试剂 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-41页 |
·细胞培养 | 第35页 |
·细胞转染 | 第35-36页 |
·Western Blot 检测 | 第36-38页 |
·Real-time PCR | 第38-40页 |
·siRNA 对 HIV-1 假病毒抑制作用检测 | 第40-41页 |
·实验结果 | 第41-47页 |
·Western Blot 检测 Vif 蛋白表达 | 第41-43页 |
·Real-time PCR 技术对 vif mRNA 拷贝数进行相对定量 | 第43-45页 |
·siRNA 对 HIV-1 假病毒感染力的影响 | 第45-47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
·本章小结 | 第48-49页 |
结论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
攻读硕士学位其间发表的学术论文 | 第55-57页 |
致谢 | 第57页 |