| 摘要 | 第1-17页 |
| Abstract | 第17-23页 |
| 缩略语简表 | 第23-24页 |
| 第一章 绪论 | 第24-39页 |
| 一 干细胞体外增殖与分化研究现状 | 第24-29页 |
| 1. 干细胞特性 | 第24-25页 |
| 2. 干细胞富集与扩增方法 | 第25-28页 |
| ·贴壁培养筛选法 | 第26页 |
| ·密度梯度离心法 | 第26-27页 |
| ·流式细胞仪法 | 第27页 |
| ·免疫磁珠分选法 | 第27-28页 |
| 3. Mscs的鉴定方法 | 第28-29页 |
| 二 Mscs向软骨表型分化的诱导因素 | 第29-39页 |
| 1. 一般诱导因素 | 第29-30页 |
| 2. 细胞因子 | 第30-34页 |
| ·转化生长因子系列 | 第30-32页 |
| ·骨形态发生蛋白 | 第32-33页 |
| ·碱性成纤维细胞生长因子 | 第33页 |
| ·细胞因子间的相互作用 | 第33-34页 |
| 3. 细胞外基质对细胞定向分化的影响 | 第34-39页 |
| ·支架材料 | 第35-37页 |
| ·透明质酸 | 第37-39页 |
| 第二章 骨髓来源间充质干细胞的提取、培养与扩增 | 第39-50页 |
| 1 材料与方法 | 第39-43页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·实验动物 | 第39页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第39-40页 |
| ·常用实验试剂的配制方法 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·原代细胞的取材与分离 | 第41-42页 |
| ·直接贴壁法 | 第41页 |
| ·密度梯度离心法 | 第41-42页 |
| ·MSCs的生长曲线测定 | 第42页 |
| ·MSCs的形态学观察 | 第42页 |
| ·细胞表面标志物检测 | 第42-43页 |
| 2 结果 | 第43-44页 |
| ·骨髓细胞的提取与分离 | 第43页 |
| ·形态学观察 | 第43-44页 |
| ·原代培养 | 第43页 |
| ·MSCs的传代培养与增殖 | 第43-44页 |
| ·生长曲线的绘制 | 第44页 |
| ·细胞表面标志物检测结果 | 第44页 |
| 3 讨论 | 第44-47页 |
| 4 本章实验结果图表 | 第47-50页 |
| 第三章 外源性透明质酸对MSCs增殖及分化情况的影响 | 第50-63页 |
| 引言 | 第50页 |
| 1 材料与方法 | 第50-52页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·实验动物 | 第50-51页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·Mscs的体外分离与培养 | 第51页 |
| ·Mscs的生长曲线测定 | 第51页 |
| ·HA诱导Mscs向成软骨细胞分化 | 第51-52页 |
| ·形态学观察 | 第52页 |
| ·细胞爬片的甲苯胺蓝染色 | 第52页 |
| ·免疫组化染色法检测MscsⅡ型胶原的表达 | 第52页 |
| ·细胞产物的RT-PCR | 第52页 |
| ·数据统计分析 | 第52页 |
| 2 结果 | 第52-53页 |
| ·细胞的形态学观察 | 第52-53页 |
| ·甲苯胺蓝染色结果 | 第53页 |
| ·免疫组化染色结果 | 第53页 |
| ·RT-PCR结果 | 第53页 |
| 讨论 | 第53-57页 |
| 本章实验结果图表 | 第57-63页 |
| 第四章 不同浓度透明质酸对骨髓来源间充质干细胞成软骨分化的影响 | 第63-77页 |
| 引言 | 第63页 |
| 1 材料与方法 | 第63-66页 |
| ·实验材料 | 第63-65页 |
| ·实验动物 | 第63-64页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第64-65页 |
| ·实验方法 | 第65-66页 |
| ·原代细胞的取材与分离 | 第65页 |
| ·不同浓度HA诱导兔Mscs向成软骨细胞分化 | 第65页 |
| ·细胞生长曲线的绘制 | 第65页 |
| ·细胞倍增时间的计算 | 第65-66页 |
| ·免疫组化染色法检测MscsⅡ型胶原的表达 | 第66页 |
| ·不同时间点Ⅱ型胶原mRNA的RT-PCR检测 | 第66页 |
| 2 结果 | 第66-67页 |
| ·原代细胞的取材与分离 | 第66页 |
| ·不同浓度HA诱导兔Mscs向成软骨细胞分化 | 第66-67页 |
| ·细胞生长曲线的绘制及细胞倍增时间的计算 | 第67页 |
| ·免疫组化染色法检测MscsⅡ型胶原的表达 | 第67页 |
| ·RT-PCR结果分析 | 第67页 |
| 3 讨论 | 第67-71页 |
| 4 本章实验结果图表 | 第71-77页 |
| 第五章 不同分子量透明质酸对骨髓来源间充质干细胞成软骨分化的影响 | 第77-96页 |
| 引言 | 第77页 |
| 1 材料与方法 | 第77-80页 |
| ·实验材料 | 第77-79页 |
| ·实验动物 | 第77-78页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第78-79页 |
| ·实验方法 | 第79-80页 |
| ·原代细胞的取材与分离 | 第79页 |
| ·不同分子量HA诱导兔Mscs向成软骨细胞分化 | 第79页 |
| ·细胞生长曲线的绘制 | 第79-80页 |
| ·甲苯胺蓝染色 | 第80页 |
| ·免疫组化染色法检测MscsⅡ型胶原的表达 | 第80页 |
| ·RT-PCR检测Ⅱ型胶原mRNA含量 | 第80页 |
| 2. 结果 | 第80-82页 |
| ·原代细胞的取材与分离 | 第80-81页 |
| ·不同分子量HA诱导兔Mscs向成软骨细胞分化 | 第81页 |
| ·细胞生长曲线的绘制 | 第81页 |
| ·甲苯胺蓝染色 | 第81页 |
| ·免疫组化染色法检测MscsⅡ型胶原的表达 | 第81-82页 |
| ·RT-PCR结果分析 | 第82页 |
| 3 讨论 | 第82-87页 |
| 4 本章实验结果图表 | 第87-96页 |
| 第六章 外源性透明质酸诱导的骨髓间充质干细胞修复兔膝关节软骨缺损的研究 | 第96-112页 |
| 引言 | 第96页 |
| 1. 材料与方法 | 第96-99页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第96-97页 |
| ·实验动物及分组 | 第97页 |
| ·原代细胞的取材与分离 | 第97-98页 |
| ·外源性HA诱导兔Mscs向成软骨细胞分化 | 第98页 |
| ·藻酸钙干细胞凝胶制备 | 第98页 |
| ·软骨缺损动物模型制备及手术方法 | 第98页 |
| ·取材及检测 | 第98-99页 |
| 2 结果 | 第99-101页 |
| ·原代细胞取材与传代 | 第99页 |
| ·外源性HA诱导兔Mscs向成软骨细胞分化invitro | 第99页 |
| ·软骨缺损模型建立及修复的大体观察 | 第99-100页 |
| ·软骨修复的组织学检查及比较 | 第100页 |
| ·Ⅱ型胶原mRNA RT-PCR结果分析 | 第100-101页 |
| 3 讨论 | 第101-105页 |
| 4 本章实验结果图表 | 第105-110页 |
| 5 附表 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第125-126页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第126-128页 |
| 英语文章一 | 第128-135页 |
| 英语文章二 | 第135-148页 |
