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凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)和罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)卵黄蛋白原mRNA合成部位的初步研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
引言第10-20页
 1. 甲壳动物卵巢发育的分期研究第11-13页
 2. 有关甲壳动物十足目卵黄蛋白的研究第13-17页
   ·卵黄蛋白第13页
   ·卵黄磷蛋白的研究第13-16页
   ·卵黄蛋白原合成部位研究的研究现状第16-17页
 3. 荧光定量方法第17-18页
 4. Northern 杂交方法第18-20页
第一章 凡纳滨对虾和罗氏沼虾卵巢发育分期的研究第20-25页
 1 材料与方法第20-21页
   ·实验材料第20页
     ·实验动物第20页
     ·主要仪器第20页
   ·石蜡切片的制作第20-21页
 2. 结果第21-25页
   ·凡纳滨对虾卵巢发育分期第21-22页
   ·罗氏沼虾卵巢发育分期第22-25页
第二章 荧光定量 PCR 分析第25-41页
 1 实验材料与方法第25-29页
   ·实验材料第25页
     ·实验动物第25页
     ·主要仪器第25页
   ·实验方法第25-29页
     ·总 RNA 的提取第25页
     ·甲醛变性胶电泳第25-26页
     ·cDNA 的合成第26页
     ·引物的设计以及合成第26-27页
     ·PCR第27-28页
     ·DNA 琼脂糖凝胶电泳检测第28页
     ·扩增产物的纯化和测序第28-29页
     ·荧光定量 PCR 检测第29页
 2. 结果第29-41页
   ·RNA 完整性分析第29-31页
     ·凡纳滨对虾总 RNA 完整性分析第29-30页
     ·罗氏沼虾总 RNA 完整性分析第30-31页
   ·RT-PCR 序列以及保守性分析第31-33页
     ·凡纳滨对虾 RT-PCR 序列以及保守性分析第31-32页
     ·罗氏沼虾 RT-PCR 序列以及保守性分析第32-33页
   ·荧光定量 PCR 分析第33-41页
     ·凡纳滨对虾荧光定量 PCR 分析第33-37页
       ·荧光定量 PCR 特异性第33-34页
       ·凡纳滨对虾荧光定量 PCR 标准曲线第34-35页
       ·凡纳滨对虾卵黄蛋白原 mRNA 基因的相对表达量第35-37页
     ·罗氏沼虾荧光定量 PCR 分析第37-41页
       ·荧光定量 PCR 特异性第37-38页
       ·罗氏沼虾荧光定量 PCR 标准曲线第38-39页
       ·罗氏沼虾卵黄蛋白原 mRNA 基因的相对表达量第39-41页
第三章 Northern 杂交第41-53页
 1 材料与方法第41-46页
   ·实验材料第41页
     ·实验动物第41页
     ·主要仪器第41页
   ·实验方法第41-46页
     ·主要药品以及试剂配制第41页
     ·引物设计第41-42页
     ·PCR第42页
     ·电泳第42页
     ·探针纯化及测序第42页
     ·探针标记以及标记效率检测第42-44页
       ·主要药品及试剂配制第42页
       ·探针标记第42页
       ·探针标记效率的检测第42-44页
     ·总 RNA 样品处理第44页
     ·转膜第44-45页
     ·固定第45页
     ·Northern 杂交第45-46页
 2 结果第46-53页
   ·凡纳滨对虾杂交结果分析第46-49页
     ·探针序列以及特异性分析第46-47页
     ·探针的标记效率检测第47页
     ·结果第47-49页
   ·罗氏沼虾杂交结果分析第49-53页
     ·探针的序列以及特异性分析第49-50页
     ·探针的标记效率检测第50-51页
     ·罗氏沼虾 Northern 杂交分析第51-53页
第四章 讨论第53-57页
 1. 凡纳滨对虾和罗氏沼虾的卵巢发育分期第53页
 2. 取样虾的组织总 RNA 的性质第53-54页
 3. 卵黄蛋白原的合成部位第54-57页
小结第57-58页
参考文献第58-64页
致谢第64页

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