| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-22页 |
| 第一章 Foxc2 调节脂代谢作用的机制 | 第13-17页 |
| ·Foxc2 基因的概述 | 第13-14页 |
| ·Foxc2 基因的生物学功能 | 第14页 |
| ·Foxc2 调控脂肪细胞分化 | 第14页 |
| ·Foxc2 调节血脂、体脂及胰岛素敏感性 | 第14页 |
| ·Foxc2 对生理代谢基因的调控 | 第14-15页 |
| ·Foxc2 的主要信号转导途径 | 第15-17页 |
| ·β-肾上腺素能-cAMP- PKA 途径 | 第15-16页 |
| ·Insulin/TNFα-PI3K、ERK1/2 途径 | 第16页 |
| ·影响 Foxc2 基因表达的主要信号通路汇总图 | 第16-17页 |
| 第二章 中枢及外周αMSH 信号通路对脂代谢的影响 | 第17-22页 |
| ·黑皮质素与αMSH | 第17页 |
| ·作用于下丘脑的主要生物因子 | 第17-19页 |
| ·瘦素（Leptin） | 第17-18页 |
| ·促黑激素皮质素受体(MCR) | 第18页 |
| ·神经内分泌递质神经肽 Y( NPY) | 第18-19页 |
| ·中枢黑皮质系统 | 第19页 |
| ·αMSH 信号通路与脂代谢的关系 | 第19-20页 |
| ·αMSH 信号通路对 Leptin 分泌的影响 | 第20-21页 |
| ·展望 | 第21-22页 |
| 试验研究 | 第22-59页 |
| 前言 | 第22-24页 |
| 第三章 αMSH 对脂代谢及 Foxc2 mRNA 表达的影响 | 第24-33页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-26页 |
| ·小鼠脂肪细胞的分离及培养 | 第24-25页 |
| ·αMSH 处理小鼠脂肪细胞 | 第25页 |
| ·油红 O 染色 | 第25页 |
| ·细胞中总 RNA 的提取 | 第25页 |
| ·cDNA 的合成 | 第25页 |
| ·Real-time PCR 扩增 | 第25-26页 |
| ·数据统计及分析 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-31页 |
| ·细胞中总 RNA 的完整性检验 | 第26-27页 |
| ·不同αMSH 浓度的毒性检验 | 第27页 |
| ·不同浓度的αMSH 对 MC2R、MC5R 表达的影响 | 第27-28页 |
| ·αMSH 处理对小鼠前体脂肪细胞分化的影响 | 第28-29页 |
| ·αMSH 对脂分化关键因子 PPARγ和脂肪酸合成酶 FAS mRNA 表达的影响 | 第29页 |
| ·αMSH 对脂解关键基因 HSL 和 ATGLmRNA 表达的影响 | 第29-30页 |
| ·αMSH 诱导 Foxc2 和 MC5R mRNA 的表达 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第四章 Foxc2 腺病毒超表达载体的构建 | 第33-47页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·样品、菌株、质粒及细胞株 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·试验方法 | 第33-40页 |
| ·Foxc2 基因克隆 | 第33-35页 |
| ·DH5α感受态的制备(CaCl2法) | 第35页 |
| ·质粒转化 | 第35页 |
| ·质粒的小量提取 | 第35页 |
| ·重组穿梭穿梭质粒的构建 | 第35-37页 |
| ·pAd-Foxc2 的构建 | 第37-39页 |
| ·大量 pAd-Foxc2 的获得和 PacⅠ酶切线性化 | 第39页 |
| ·pAd-Foxc2 的包装、扩繁和滴度测定 | 第39-40页 |
| ·数据统计及分析 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-45页 |
| ·Foxc2 的克隆 | 第40-41页 |
| ·pAd-CMV-Foxc2 重组质粒的构建 | 第41-42页 |
| ·pAd-Foxc2 的线性化、筛选及鉴定 | 第42-43页 |
| ·pAd-Foxc2 的包装 | 第43-44页 |
| ·pAd-Foxc2 的扩繁与滴度测定 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第五章 超表达 Foxc2 对αMSH 调控脂分化与脂质代谢的影响 | 第47-54页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-49页 |
| ·小鼠原代脂肪细胞的培养 | 第47页 |
| ·PAd-Foxc2 的 MOI 值测定 | 第47页 |
| ·小鼠脂肪细胞的感染和处理 | 第47页 |
| ·细胞中总蛋白的提取 | 第47-48页 |
| ·WB 检测 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-53页 |
| ·不同 MOI 值 pAd-Foxc2 感染脂肪细胞的形态学观察 | 第49-50页 |
| ·腺病毒感染小鼠脂肪细胞 | 第50页 |
| ·超表达 Foxc2 对 αMSH 诱导的脂代谢关键酶表达的影响 | 第50-51页 |
| ·超表达 Foxc2 对 αMSH 诱导的脂分化关键因子表达的影响 | 第51-52页 |
| ·超表达 Foxc2 对 αMSH 诱导的 MC5R mRNA 表达的影响 | 第52页 |
| ·超表达Foxc2对αMSH诱导的Foxc2及脂代谢基因蛋白表达的影响 | 第52-53页 |
| ·讨论与分析 | 第53-54页 |
| 第六章 超表达 Foxc2 对αMSH 信号通路的影响 | 第54-59页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-55页 |
| ·小鼠原代脂肪细胞的培养 | 第54页 |
| ·小鼠脂肪细胞的感染和处理 | 第54页 |
| ·细胞中总蛋白的提取 | 第54页 |
| ·WB 检测 | 第54页 |
| ·Real-time PCR 扩增 | 第54-55页 |
| ·数据分析 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-57页 |
| ·超表达 Foxc2 对αMSH 诱导的信号通路关键基因 mRNA 的影响 | 第55-56页 |
| ·超表达 Foxc2 对αMSH 诱导的信号通路相关蛋白的影响 | 第56-57页 |
| ·讨论与分析 | 第57-59页 |
| 结论 | 第59页 |
| 创新点 | 第59页 |
| 进一步研究内容 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 缩略词索引 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
