| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-26页 |
| ·GOLPH2蛋白概述 | 第11-18页 |
| ·GOLPH2的发现和结构特点 | 第11-12页 |
| ·GOLPH2的亚细胞定位和组织表达特异性 | 第12页 |
| ·GOLPH2与疾病的关系 | 第12-14页 |
| ·GOLPH2的临床应用 | 第14-15页 |
| ·GOLPH2的功能研究进展 | 第15-16页 |
| ·GOLPH2相互作用蛋白的筛选 | 第16-17页 |
| ·GOLPH2相关蛋白简介 | 第17-18页 |
| ·非洲爪蛙早期胚胎发育概述 | 第18-26页 |
| ·非洲爪蛙简介 | 第18-19页 |
| ·肾脏的功能和结构 | 第19-20页 |
| ·脊椎动物肾脏发育过程简介 | 第20-21页 |
| ·非洲爪蛙胚胎发育和原肾早期发育简介 | 第21-26页 |
| 第2章 GOLPH2的结构和相互作用蛋白研究 | 第26-59页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·质粒和菌种 | 第26-27页 |
| ·细胞 | 第27页 |
| ·常用试剂 | 第27-28页 |
| ·仪器和设备 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-44页 |
| ·质粒构建 | 第29-33页 |
| ·感受态细胞制备 | 第33-34页 |
| ·细胞培养和转染 | 第34-35页 |
| ·酵母培养 | 第35-38页 |
| ·酵母双杂交 | 第38-40页 |
| ·阳性克隆鉴定 | 第40-41页 |
| ·免疫印迹 | 第41-43页 |
| ·免疫共沉淀 | 第43页 |
| ·免疫荧光 | 第43-44页 |
| ·实验结果 | 第44-58页 |
| ·GOLPH2的序列分析 | 第44-46页 |
| ·分泌形式GOLPH2的序列 | 第46页 |
| ·GOLPH2自身相互作用形成二聚体 | 第46-49页 |
| ·GOLPH2靠coiled-colil结构域相互作用 | 第49-52页 |
| ·GOLPH2蛋白结构模型 | 第52-53页 |
| ·GOLPH2的相互作用蛋白的筛选 | 第53-54页 |
| ·GOLPH2与AGT相互作用的鉴定 | 第54-55页 |
| ·GOLPH2与同源蛋白CASC4的相互作用 | 第55-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| 第3章 golph2在非洲爪蛙早期发育过程中的功能研究 | 第59-94页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·实验材料 | 第59-61页 |
| ·实验动物 | 第59页 |
| ·常用试剂 | 第59-60页 |
| ·仪器和设备 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-78页 |
| ·mRNA体外转录 | 第61-63页 |
| ·地高辛标记RNA探针制备 | 第63-65页 |
| ·golph2抗体纯化 | 第65-67页 |
| ·体外受精 | 第67-68页 |
| ·显微注射和胚胎培养 | 第68-69页 |
| ·动物极帽分离 | 第69页 |
| ·整体胚胎原位杂交 | 第69-75页 |
| ·振动切片 | 第75-76页 |
| ·胚胎组织石蜡切片免疫组织化学 | 第76-77页 |
| ·动物极帽免疫荧光 | 第77-78页 |
| ·实验结果 | 第78-91页 |
| ·爪蛙golph2的克隆和单克隆抗体制备 | 第78-79页 |
| ·爪蛙golph2的蛋白与人GOLPH2蛋白生化特性的比较 | 第79-82页 |
| ·爪蛙golph2的组织表达特异性分析 | 第82页 |
| ·早期发育过程golph2的表达情况 | 第82-84页 |
| ·golph2的morpholino验证和表型分析 | 第84-86页 |
| ·原肾marker分析 | 第86-89页 |
| ·mRNA拯救实验 | 第89-90页 |
| ·早期转录因子分析 | 第90-91页 |
| ·讨论 | 第91-94页 |
| ·爪蛙模型研究golph2的功能 | 第91-92页 |
| ·golph2在早期胚胎发育过程中的表达谱 | 第92页 |
| ·爪蛙golph2是原肾正常发育必须的因子 | 第92-94页 |
| 第4章 总结 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第103页 |
