| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 文献综述 | 第11-24页 |
| 第一章 抑制病毒复制增殖的microRNA 及其靶标识别研究进展 | 第11-24页 |
| ·miRNA 的生物学发生机制 | 第11-12页 |
| ·miRNA 的序列进化及保守性和特异性研究 | 第12-14页 |
| ·miRNA 与靶标作用研究 | 第14-16页 |
| ·病毒miRNA 对病毒增殖作用研究 | 第16-20页 |
| ·病毒miRNA 对病毒基因组靶标作用研究 | 第17-18页 |
| ·病毒miRNA 对宿主基因组靶标作用研究 | 第18-20页 |
| ·宿主miRNA 在病毒感染中的作用研究 | 第20-22页 |
| ·宿主细胞miRNA 对流感病毒感染作用研究 | 第20-21页 |
| ·宿主细胞miRNA 对HIV 感染作用研究 | 第21-22页 |
| ·miRNA 与PRRSV 研究现状 | 第22-23页 |
| ·miRNA 带来的新思考和新挑战 | 第23-24页 |
| 试验研究 | 第24-47页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒3’非编码区双荧光素酶报告载体的构建与纯化 | 第24-37页 |
| ·材料 | 第24-27页 |
| ·主要仪器与设备 | 第24-25页 |
| ·质粒载体与菌株、毒株 | 第25页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第25页 |
| ·细胞系 | 第25页 |
| ·主要实验试剂制备 | 第25-27页 |
| ·主要分析软件与数据库 | 第27页 |
| ·方法与步骤 | 第27-32页 |
| ·引物的设计与合成 | 第27-28页 |
| ·Marc-145 细胞的培养方法 | 第28页 |
| ·PRRSV 病毒的培养与增殖 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR 反应与检测 | 第29-30页 |
| ·PRRSV 3’UTR 的克隆载体及双荧光素酶重组载体的构建 | 第30-31页 |
| ·无内毒素重组质粒的大量提取与纯化 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-35页 |
| ·PRRSV 毒株在Marc-145 细胞上的增殖与细胞病变 | 第32-33页 |
| ·PRRSV 病毒的RT-PCR 检测 | 第33页 |
| ·PRRSV 3’UTR 的PCR 扩增 | 第33页 |
| ·PRRSV 3’UTR 克隆载体的双酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·PRRSV 3’UTR 的双荧光素酶重组载体的酶切鉴定和PCR 鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组质粒的无内毒素大提浓度和纯度检测 | 第35页 |
| ·讨论 | 第35页 |
| ·小结 | 第35-37页 |
| 第三章 猪繁殖与呼吸综合征病毒相关猪miRNA 的初步筛选 | 第37-47页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·细胞系与质粒 | 第37页 |
| ·生物信息学预测软件及数据库 | 第37-38页 |
| ·方法与步骤 | 第38-39页 |
| ·生物信息学方法预测在PRRSV 3’UTR 上存在靶标的猪miRNA | 第38页 |
| ·猪脐静脉血管内皮细胞的培养 | 第38页 |
| ·重组质粒转染猪脐静脉血管内皮细胞 | 第38-39页 |
| ·转染组细胞的双荧光素酶活性检测 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-44页 |
| ·生物信息学预测在PRRSV 3’UTR 有潜在靶标的猪miRNA | 第39-40页 |
| ·共转染双荧光素酶检测结果 | 第40-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-56页 |
| 附录 | 第56-60页 |
| 缩略词及中英文对照 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 个人简介 | 第62页 |
