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表观遗传修饰状态与猪体细胞核移植胚胎发育潜能研究

摘要第1-12页
Abstract第12-15页
1 前言第15-28页
   ·猪体细胞核移植研究进展第15-21页
     ·猪体细胞核移植的现状第15页
     ·影响猪体细胞核移植的主要因素第15-20页
     ·提高体细胞核移植效率的方法第20页
     ·猪体细胞核移植应用前景第20-21页
   ·表观遗传修饰与体细胞核移植第21-26页
     ·DNA甲基化第22-23页
     ·组蛋白乙酰化第23-24页
     ·遗传印记第24-25页
     ·X染色体失活第25-26页
   ·基因表达模式与体细胞核移植第26-27页
     ·DNA甲基转移酶第26页
     ·多能性基因第26-27页
   ·本研究的目的和意义第27-28页
2 材料与方法第28-36页
   ·实验材料第28-30页
     ·实验动物第28页
     ·主要仪器设备第28-29页
     ·主要试剂及试剂盒第29页
     ·常用试剂及配制第29-30页
     ·主要的生物分析软件及网站第30页
   ·实验方法第30-36页
     ·猪体细胞核移植的主要步骤第30-31页
     ·表观药物相应处理第31-32页
     ·孤雌和体外受精胚胎体外培养第32页
     ·卵母细胞和胚胎染色标记第32页
     ·细胞生长曲线、细胞周期和细胞甲基化分析第32-33页
     ·性别鉴定第33-34页
     ·Realtime PCR第34-35页
     ·RNA干扰第35-36页
3 结果与分析第36-71页
   ·胞质成熟对核移植胚胎发育的影响第36-41页
     ·卵母细胞成熟过程中极体排放情况第36页
     ·胞质成熟对胚胎发育的影响第36-37页
     ·胞质成熟对核与极体的位置关系及去核率的影响第37-38页
     ·胞质成熟的评定第38-41页
   ·供体细胞对核移植胚胎发育的影响第41-45页
     ·供体细胞种类对核移植胚胎发育的影响第41-42页
     ·供体细胞性别对核移植胚胎发育的影响第42-43页
     ·供体细胞甲基化程度对核移植胚胎发育的影响第43-45页
   ·5-aza-dC对核移植胚胎的影响第45-59页
     ·5-aza-dC处理供体细胞对其及核移植胚胎发育的影响第46-48页
     ·5-aza-dC处理胚胎对核移植胚胎的影响第48-52页
     ·不同5-aza-dC处理方式对类原核形成及早期卵裂的影响第52-54页
     ·不同5-aza-dC处理方式对DNA甲基转移酶基因和多能性基因表达的影响第54-58页
     ·供体细胞和核移植胚胎双重处理对核移植胚胎发育的影响第58-59页
   ·TSA对核移植胚胎的影响第59-61页
     ·TSA处理核移植胚胎对克隆胚胎体内外发育的影响第59-60页
     ·在第一细胞周期中TSA对早期胚胎发育相关基因表达的影响第60-61页
   ·扰低Dnmt1对核移植胚胎的影响第61-71页
     ·裸卵体系的建立第61-66页
     ·Dnmt1在卵母细胞中的分布和表达第66-67页
     ·Dnmt1扰低效率及对卵母细胞的影响第67-69页
     ·扰低Dnmt1对核移植胚胎发育的影响第69-71页
4 讨论第71-77页
   ·胞质成熟与体细胞核移植第71-72页
     ·卵母细胞胞质成熟第71页
     ·胞质成熟对核移植胚胎发育的影响第71-72页
   ·供体细胞与体细胞核移植第72-73页
     ·供体细胞种类对核移植胚胎发育的影响第72页
     ·供体细胞性别对核移植胚胎发育的影响第72页
     ·供体细胞甲基化程度对核移植胚胎发育的影响第72-73页
   ·表观遗传修饰与体细胞核移植第73-75页
     ·5-aza对核移植胚胎发育的影响第73-75页
     ·TSA处理核移植胚胎对克隆效率的影响第75页
   ·扰低Dnmt1对核移植发育的影响第75-77页
5 结论第77-78页
致谢第78-79页
参考文献第79-85页
攻读博士学位期间发表的学术论文第85-86页

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