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盐生植物花花柴和盐爪爪液泡膜Na~+/H~+反向运输载体的基因表达和抗体制备

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
英文缩略语第9-10页
主要实验仪器第10-11页
第一部分 综述第11-30页
 第一章 液泡膜离子转运相关蛋白与植物耐盐相关性第11-22页
  1.N HX 及其基因家族与植物耐盐性第12-14页
  2. 液泡膜H+转运无机焦磷酸酶及其基因家族与植物耐盐性第14-17页
  3. 液泡膜H+-ATP 酶及植物耐盐性第17-18页
  4. NHX, VHA, V-PPase 在盐胁迫时的相关性第18-19页
  5. 转基因耐盐植物的研究进展第19-22页
 第二章 尾静脉大容量快速注射法原理及应用第22-30页
  1 尾静脉大容量快速注射法转染的特点第23-25页
  2 尾静脉大容量快速注射法转染肝细胞的原理[55]第25-26页
  3 尾静脉大容量快速注射法的应用及其发展前景第26-30页
第二部分 实验及实验结果第30-60页
 第一章 KCNHX1 和KFNHX1 基因原核及真核表达载体的构建和表达第30-50页
  1 材料及主要试剂第30-31页
  2 实验方法第31-39页
   ·重组质粒表达载体的构建(以pMAL-p2x- Kcnhx1-c285 为例)第31-33页
   ·目的片段Kcnhx1-c285 和Kfnhx1-c471 的原核表达第33-34页
   ·融合蛋白MBP-KcNHX1-C94 的纯化第34页
   ·包涵体融合蛋白MBP-KfNHX1-C157 的洗涤和溶解第34-35页
   ·包涵体融合蛋白MBP-KfNHX1-C157 的复性第35页
   ·纯化的融合蛋白的定量第35-36页
   ·目的基因在小鼠肝细胞中的瞬时表达的检测第36-39页
  3 实验结果第39-48页
   ·重组表达载体的酶切和PCR 鉴定第39-41页
   ·目的蛋白的诱导表达第41-42页
   ·融合蛋白MBP-KcNHX1-C94 的纯化第42-44页
   ·包涵体融合蛋白MBP-KfNHX1-C157 的溶解第44-45页
   ·融合蛋白MBP-KfNHX1-C157 的复性和纯化第45-46页
   ·转染过真核表达表达质粒的小鼠肝脏总RNA 的提取第46-47页
   ·目的基因在小鼠肝细胞中瞬时表达第47-48页
  4 讨论第48-50页
 第二章 KCNHX1 和KFNHX1 抗体的制备第50-60页
  1 材料及主要试剂第50-52页
  2 实验方法第52-54页
   ·核酸疫苗的制备第52页
   ·抗体的效价检测第52-53页
   ·纯化的融合蛋白MBP-KcNHX1-C94 和MBP-KfNHX1-C157 免疫原性的检测第53页
   ·融合蛋白MBP-KcNHX1-C94 和MBP-KfNHX1-C157 加强免疫昆明白小鼠第53页
   ·抗体特性鉴定第53-54页
   ·抗血清效价的计算第54页
  3 实验结果第54-58页
   ·质粒pcDNA3.1- Kcnhx1 和pcDNA3.1- Kfnhx1 的纯化第54-55页
   ·质粒免疫昆明白小鼠抗体的效价第55-56页
   ·融合蛋白MBP-KcNHX1-C94 和MBP-KfNHX1-C157 免疫原性的检测第56页
   ·融合蛋白加强免疫效果的检测第56-57页
   ·小鼠肝细胞表达Kcnhx1 的Western blot 分析第57-58页
   ·血清效价的测定第58页
  4 讨论第58-60页
总结第60-61页
参考文献第61-69页
致谢第69-70页
个人简历第70-71页

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