摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
英文缩略语 | 第9-10页 |
主要实验仪器 | 第10-11页 |
第一部分 综述 | 第11-30页 |
第一章 液泡膜离子转运相关蛋白与植物耐盐相关性 | 第11-22页 |
1.N HX 及其基因家族与植物耐盐性 | 第12-14页 |
2. 液泡膜H+转运无机焦磷酸酶及其基因家族与植物耐盐性 | 第14-17页 |
3. 液泡膜H+-ATP 酶及植物耐盐性 | 第17-18页 |
4. NHX, VHA, V-PPase 在盐胁迫时的相关性 | 第18-19页 |
5. 转基因耐盐植物的研究进展 | 第19-22页 |
第二章 尾静脉大容量快速注射法原理及应用 | 第22-30页 |
1 尾静脉大容量快速注射法转染的特点 | 第23-25页 |
2 尾静脉大容量快速注射法转染肝细胞的原理[55] | 第25-26页 |
3 尾静脉大容量快速注射法的应用及其发展前景 | 第26-30页 |
第二部分 实验及实验结果 | 第30-60页 |
第一章 KCNHX1 和KFNHX1 基因原核及真核表达载体的构建和表达 | 第30-50页 |
1 材料及主要试剂 | 第30-31页 |
2 实验方法 | 第31-39页 |
·重组质粒表达载体的构建(以pMAL-p2x- Kcnhx1-c285 为例) | 第31-33页 |
·目的片段Kcnhx1-c285 和Kfnhx1-c471 的原核表达 | 第33-34页 |
·融合蛋白MBP-KcNHX1-C94 的纯化 | 第34页 |
·包涵体融合蛋白MBP-KfNHX1-C157 的洗涤和溶解 | 第34-35页 |
·包涵体融合蛋白MBP-KfNHX1-C157 的复性 | 第35页 |
·纯化的融合蛋白的定量 | 第35-36页 |
·目的基因在小鼠肝细胞中的瞬时表达的检测 | 第36-39页 |
3 实验结果 | 第39-48页 |
·重组表达载体的酶切和PCR 鉴定 | 第39-41页 |
·目的蛋白的诱导表达 | 第41-42页 |
·融合蛋白MBP-KcNHX1-C94 的纯化 | 第42-44页 |
·包涵体融合蛋白MBP-KfNHX1-C157 的溶解 | 第44-45页 |
·融合蛋白MBP-KfNHX1-C157 的复性和纯化 | 第45-46页 |
·转染过真核表达表达质粒的小鼠肝脏总RNA 的提取 | 第46-47页 |
·目的基因在小鼠肝细胞中瞬时表达 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
第二章 KCNHX1 和KFNHX1 抗体的制备 | 第50-60页 |
1 材料及主要试剂 | 第50-52页 |
2 实验方法 | 第52-54页 |
·核酸疫苗的制备 | 第52页 |
·抗体的效价检测 | 第52-53页 |
·纯化的融合蛋白MBP-KcNHX1-C94 和MBP-KfNHX1-C157 免疫原性的检测 | 第53页 |
·融合蛋白MBP-KcNHX1-C94 和MBP-KfNHX1-C157 加强免疫昆明白小鼠 | 第53页 |
·抗体特性鉴定 | 第53-54页 |
·抗血清效价的计算 | 第54页 |
3 实验结果 | 第54-58页 |
·质粒pcDNA3.1- Kcnhx1 和pcDNA3.1- Kfnhx1 的纯化 | 第54-55页 |
·质粒免疫昆明白小鼠抗体的效价 | 第55-56页 |
·融合蛋白MBP-KcNHX1-C94 和MBP-KfNHX1-C157 免疫原性的检测 | 第56页 |
·融合蛋白加强免疫效果的检测 | 第56-57页 |
·小鼠肝细胞表达Kcnhx1 的Western blot 分析 | 第57-58页 |
·血清效价的测定 | 第58页 |
4 讨论 | 第58-60页 |
总结 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
个人简历 | 第70-71页 |