| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 缩略语表 | 第16-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-37页 |
| 1 鱼类细胞培养的现状及应用 | 第21-25页 |
| ·鱼类细胞培养的现状 | 第21-23页 |
| ·鱼类细胞培养的应用 | 第23-25页 |
| 2 鱼类细胞培养在毒理学上的应用 | 第25-31页 |
| ·体外检测系统的提出与发展 | 第25-27页 |
| ·在检测细胞毒性上的应用现状 | 第27-28页 |
| ·在检测基因毒性上的方法改进 | 第28-30页 |
| ·在毒性检测应用中的优缺点 | 第30-31页 |
| 3 重金属对鱼类的毒性研究进展 | 第31-37页 |
| ·氯化镉对鱼类的毒性研究 | 第32-33页 |
| ·重铬酸钾对鱼类的毒性研究 | 第33-34页 |
| ·氯化锌对鱼类的毒性研究 | 第34-35页 |
| ·硫酸铜对鱼类的毒性研究 | 第35-37页 |
| 第二章 三株鱼类细胞系的建立及鉴定 | 第37-54页 |
| 1 材料 | 第38-39页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38-39页 |
| 2 方法 | 第39-43页 |
| ·组织块贴壁法进行细胞的原代培养 | 第39页 |
| ·细胞的传代培养 | 第39页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第39-40页 |
| ·最适生长条件选择 | 第40页 |
| ·细胞的染色体分析 | 第40-41页 |
| ·细胞的核糖体rRNA和细胞色素b的基因分析 | 第41-43页 |
| ·数据分析 | 第43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-52页 |
| ·细胞生长动态 | 第43-44页 |
| ·细胞的冻存和复苏能力 | 第44-45页 |
| ·最适生长条件的选择 | 第45-49页 |
| ·染色体核型分析 | 第49-50页 |
| ·线粒体基因分析 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 第三章 十二株鱼类细胞系对检测重金属毒性的敏感性研究 | 第54-86页 |
| 第一节 四种毒性检测方法(MTT、CB、SCGE、FCM)的比较 | 第54-72页 |
| 1 材料 | 第55-56页 |
| ·主要试剂 | 第55-56页 |
| ·主要仪器 | 第56页 |
| 2 方法 | 第56-59页 |
| ·MTT法测定重金属的细胞毒性 | 第56-57页 |
| ·细胞总蛋白含量(CB法)测定细胞毒性 | 第57-58页 |
| ·彗星实验(SCGE法)检测细胞单链DNA损伤 | 第58-59页 |
| ·流式细胞法(FCM法)检测细胞凋亡 | 第59页 |
| ·数据分析 | 第59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-68页 |
| ·MTT法最佳实验条件的选择 | 第59-62页 |
| ·MTT法测定不同重金属的细胞毒性 | 第62-64页 |
| ·细胞总蛋白含量(CB法)测定不同重金属的细胞毒性 | 第64-66页 |
| ·彗星实验(SCGE法)测定不同重金属对细胞的DNA损伤 | 第66-67页 |
| ·流式细胞仪(FCM法)测定不同重金属对细胞造成的凋亡 | 第67-68页 |
| 4 讨论 | 第68-72页 |
| 第二节 十二株细胞系对重金属的毒性敏感性的研究(MTT法) | 第72-86页 |
| 1 材料 | 第73-74页 |
| ·主要试剂 | 第73-74页 |
| ·主要仪器 | 第74页 |
| 2 方法 | 第74-76页 |
| ·细胞培养 | 第74-76页 |
| ·MTT检测 | 第76页 |
| ·数据分析 | 第76页 |
| 3 结果与分析 | 第76-83页 |
| ·氯化镉对十二株细胞系的毒性比较 | 第76-78页 |
| ·重铬酸钾对十二株细胞系的毒性比较 | 第78-79页 |
| ·氯化锌对十二株细胞系的毒性比较 | 第79-81页 |
| ·硫酸铜对十二株细胞系的毒性比较 | 第81-83页 |
| 4 讨论 | 第83-86页 |
| 第四章 毒性敏感细胞系在重金属毒性检测中的应用 | 第86-123页 |
| 第一节 氯化镉对CCO细胞的毒性 | 第86-95页 |
| 1 材料 | 第87页 |
| ·主要试剂 | 第87页 |
| ·主要仪器 | 第87页 |
| 2 方法 | 第87-89页 |
| ·细胞培养方法 | 第87页 |
| ·细胞形态观察 | 第87页 |
| ·细胞毒性分析 | 第87-88页 |
| ·MDA、SOD、GPX和T-AOC测定 | 第88页 |
| ·彗星实验检测细胞DNA损伤 | 第88页 |
| ·流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期 | 第88页 |
| ·数据分析 | 第88-89页 |
| 3 结果与分析 | 第89-93页 |
| ·氯化镉对CCO细胞形态的影响 | 第89页 |
| ·氯化镉对CCO细胞存活率的影响 | 第89-90页 |
| ·氯化镉对CCO细胞的氧化损伤 | 第90-91页 |
| ·氯化镉对CCO细胞的DNA损伤 | 第91-93页 |
| ·氯化镉对CCO细胞凋亡的影响 | 第93页 |
| ·氯化镉对CCO细胞周期时相分布的影响 | 第93页 |
| 4 讨论 | 第93-95页 |
| 第二节 铬(Ⅵ)对EPC细胞的毒性 | 第95-105页 |
| 1 材料 | 第95-96页 |
| ·主要试剂 | 第95-96页 |
| ·主要仪器 | 第96页 |
| 2 方法 | 第96-97页 |
| ·细胞培养方法 | 第96页 |
| ·细胞形态观察 | 第96页 |
| ·细胞毒性分析 | 第96页 |
| ·MDA、SOD、GPX和T-AOC测定 | 第96-97页 |
| ·彗星实验检测细胞DNA损伤 | 第97页 |
| ·流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期 | 第97页 |
| ·数据分析 | 第97页 |
| 3 结果与分析 | 第97-102页 |
| ·重铬酸钾对EPC细胞形态的影响 | 第97-98页 |
| ·重铬酸钾对EPC细胞存活率的影响 | 第98-99页 |
| ·重铬酸钾对EPC细胞的氧化损伤 | 第99-100页 |
| ·重铬酸钾对EPC细胞的DNA损伤 | 第100-101页 |
| ·重铬酸钾对EPC细胞凋亡的影响 | 第101-102页 |
| ·重铬酸钾对EPC细胞周期时相分布的影响 | 第102页 |
| 4 讨论 | 第102-105页 |
| 第三节 锌对EPC细胞的毒性 | 第105-114页 |
| 1 材料 | 第105-106页 |
| ·主要试剂 | 第105-106页 |
| ·主要仪器 | 第106页 |
| 2 方法 | 第106-107页 |
| ·细胞培养方法 | 第106页 |
| ·细胞形态观察 | 第106页 |
| ·细胞毒性分析 | 第106页 |
| ·MDA、SOD、GPX和T-AOC测定 | 第106-107页 |
| ·彗星实验检测细胞DNA损伤 | 第107页 |
| ·流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期 | 第107页 |
| ·数据分析 | 第107页 |
| 3 结果与分析 | 第107-112页 |
| ·氯化锌对EPC细胞形态的影响 | 第107-108页 |
| ·氯化锌对EPC细胞存活率的影响 | 第108-109页 |
| ·氯化锌对EPC细胞的氧化损伤 | 第109-110页 |
| ·氯化锌对EPC细胞的DNA损伤 | 第110-111页 |
| ·氯化锌对EPC细胞凋亡的影响 | 第111-112页 |
| ·氯化锌对EPC细胞周期时相分布的影响 | 第112页 |
| 4 讨论 | 第112-114页 |
| 第四节 铜对CIK细胞的毒性 | 第114-123页 |
| 1 材料 | 第114-115页 |
| ·主要试剂 | 第114-115页 |
| ·主要仪器 | 第115页 |
| 2 方法 | 第115-116页 |
| ·细胞培养方法 | 第115页 |
| ·细胞形态观察 | 第115页 |
| ·细胞毒性分析 | 第115页 |
| ·MDA、SOD、GPX和T-AOC测定 | 第115-116页 |
| ·彗星实验检测细胞DNA损伤 | 第116页 |
| ·流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期 | 第116页 |
| ·数据分析 | 第116页 |
| 3 结果与分析 | 第116-121页 |
| ·硫酸铜对CIK细胞形态的影响 | 第116-117页 |
| ·硫酸铜的CIK细胞存活率的影响 | 第117-118页 |
| ·硫酸铜对CIK细胞的氧化损伤 | 第118-119页 |
| ·硫酸铜对CIK细胞的DNA损伤 | 第119-120页 |
| ·硫酸铜对CIK细胞凋亡的影响 | 第120-121页 |
| ·硫酸铜对CIK细胞周期时相分布的影响 | 第121页 |
| 4.讨论 | 第121-123页 |
| 全文总结 | 第123-127页 |
| 1 本论文主要研究结果 | 第123-125页 |
| ·新建细胞模型的研究 | 第123页 |
| ·体外检测方法的研究 | 第123-124页 |
| ·重金属毒性敏感细胞系的研究 | 第124页 |
| ·重金属对细胞的毒性作用研究 | 第124-125页 |
| 2 本论文的创新之处 | 第125-127页 |
| ·模型创新 | 第125页 |
| ·方法创新 | 第125-126页 |
| ·应用创新 | 第126-127页 |
| 参考文献 | 第127-149页 |
| 附录 | 第149-150页 |
| 致谢 | 第150页 |
