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大豆脂肪氧化酶的鉴定、纯化及其漂白β-胡萝卜素的酶学特性研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-10页
缩略词表第10-11页
第一章 文献综述第11-25页
 1 大豆脂肪氧化酶的理化特性第11-14页
   ·大豆脂肪氧化酶的含量和分类第11-13页
     ·大豆脂肪氧化酶的含量第11页
     ·大豆脂肪氧化酶的分类第11-13页
   ·大豆脂肪氧化酶的结构第13-14页
   ·大豆脂肪氧化酶的酶促反应机制第14页
 2 大豆脂肪氧化酶的分析鉴定技术第14-18页
   ·氧电极、量压法与分光光度法第14-15页
     ·氧电极法第15页
     ·量压法(Warburg呼吸仪法,AACC方法)第15页
     ·分光光度法(Kanofsky JR,Axelrod B,1986)第15页
   ·胡萝卜素脱色法第15页
   ·电泳法第15-16页
     ·聚丙烯酰胺-SDS电泳(SDS-PAGE)第16页
     ·等电聚焦聚丙烯酰胺电泳(IEF-PAGE)第16页
   ·专—性抗体互作和酶联免疫法(ELISA)酶联免疫法第16页
   ·阳离子交换高压液相色谱和快速蛋白液相色谱第16页
   ·显色法第16-17页
     ·亚甲基兰法第16-17页
     ·Fe(CNS)_3显色法(Grossman S et al,1969)第17页
     ·KI_2淀粉法(Hisateru M,1967)第17页
   ·超弱发光发射光谱法第17页
   ·分子标记第17-18页
 3 大豆脂肪氧化酶的提取纯化第18-19页
   ·大豆脂氧酶提取方法第18页
     ·水浸提法第18页
     ·缓冲液浸提法第18页
     ·盐析法第18页
     ·共沉淀法第18页
   ·大豆脂肪氧化酶纯化技术第18-19页
     ·离子交换层析第18-19页
     ·凝胶过滤第19页
     ·亲和层析第19页
     ·疏水色谱(HIC)第19页
 4 大豆脂肪氧化酶漂白β-胡萝卜素的原理第19-21页
 5 大豆脂肪氧化酶在食品中的应用第21-23页
   ·大豆脂肪氧化酶的漂白和抗老化作用第22页
   ·制备风味物质第22-23页
 6 本研究的意义与内容第23-25页
   ·研究意义第23页
   ·研究内容第23-25页
     ·大豆脂肪氧化酶同功酶的鉴定第23页
     ·大豆脂肪氧化酶同功酶的纯化第23-24页
     ·大豆脂肪氧化酶同功酶漂白β-胡萝卜素的酶活特性研究第24-25页
第二章 利用SDS-PAGE鉴定大豆脂肪氧化酶同功酶第25-39页
 1 材料与方法第25-27页
   ·材料第25页
   ·主要化学试剂第25-26页
   ·主要实验仪器与设备第26页
   ·电泳实验方法第26-27页
     ·贮液的配制第26页
     ·大豆脂肪氧化酶的提取第26-27页
     ·电泳样品的准备第27页
     ·电泳第27页
     ·染色及脱色第27页
 2 结果与分析第27-37页
   ·不同SDS-PAGE电泳时间鉴定大豆脂肪氧化酶同功酶第27-30页
   ·不同上样量SDS-PAGE电泳鉴定大豆脂肪氧化酶同功酶第30-33页
   ·SDS-PAGE电泳不同分离胶浓度鉴定大豆脂肪氧化酶同功酶第33-37页
     ·不同凝胶浓度的配置第33-34页
     ·不同分离胶浓度SDS-PAGE电泳鉴定大豆脂肪氧化酶同功酶第34-37页
 3 讨论第37-38页
 4 结论第38-39页
第三章 大豆脂肪氧化酶的纯化第39-49页
 1 材料与方法第39-41页
   ·材料第39页
   ·主要化学试剂第39-40页
   ·主要实验仪器与设备第40页
   ·实验方法第40-41页
     ·试剂配制第40页
     ·大豆脂肪氧化酶粗酶液制备第40页
     ·蛋白含量测定(Bradford法)第40页
     ·SDS-PAGE分析第40-41页
     ·银染第41页
     ·硫酸铵沉淀第41页
     ·胡萝卜素漂白实验第41页
 2 实验结果第41-48页
   ·硫酸铵分段提取大豆脂氧酶第41-43页
   ·凝胶过滤(以LOX1为例)第43-45页
     ·凝胶过滤色谱Sephacyl-S300第43-44页
     ·凝胶过滤色谱superdex-75第44页
     ·凝胶过滤色谱sephadex-G100第44-45页
   ·离子交换色谱(以LOX1为例)第45-46页
     ·sephadex-G100→DEAE52第45-46页
     ·superdex-75→Mono Q第46页
   ·反相液相色谱RPC(以LOX1为例)第46-47页
   ·SDS-PAGE银染第47-48页
 3 讨论第48页
 4 结论第48-49页
第四章 大豆脂肪氧化酶同功酶漂白β-胡萝卜素的研究第49-57页
 1 材料与方法第50-52页
   ·材料第50页
   ·试剂第50页
   ·实验方法第50-51页
     ·大豆脂氧合酶提取液第50-51页
     ·缓冲溶液的制备第51页
     ·底物的制备第51页
     ·胡萝卜素饱和丙酮溶液第51页
     ·大豆脂肪氧化酶粗酶液制备第51页
     ·胡萝卜素漂白实验第51页
   ·数据处理第51-52页
 2 结果与分析第52-56页
   ·不同提取液提取的大豆脂肪氧化酶同功酶漂白能力比较第52-53页
   ·大豆脂肪氧化酶同功酶漂白β-胡萝卜素的作用时间第53页
   ·温度对大豆脂氧合酶漂白β-胡萝卜素的影响第53-55页
   ·pH值对大豆脂肪氧化酶漂白活性的影响第55页
   ·大豆脂肪氧化酶漂白β-胡萝卜素的稳定性第55-56页
 3 结论第56-57页
主要结论及工作展望第57-59页
 1 结论第57页
 2 展望第57-59页
参考文献第59-66页
致谢第66页

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