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外源1Dx5、1Ax1基因在小麦品质育种中的应用研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-14页
1 绪论第14-39页
   ·小麦新品种的产生方式第15-21页
     ·现代作物小麦的起源第15-17页
     ·传统的小麦新品种的开发第17-19页
     ·新的小麦新品种的开发第19-21页
   ·高分子量麦谷蛋白与面包品质的关系第21-29页
     ·普通小麦高分子量麦谷蛋白亚基基因的研究第21-22页
     ·小麦高分子量麦谷蛋白亚基的分子结构第22-27页
     ·高分子量麦谷蛋白亚基与小麦面包品质的关系第27-29页
   ·转基因植物外源基因遗传表达稳定性的研究进展第29-37页
     ·外源基因在转基因植物中的稳定性遗传第29-31页
     ·外源基因在转基因植物中的稳定性表达第31-33页
     ·外源基因在转基因植物中的沉默第33-37页
   ·本文研究内容第37-39页
2 外源 1Dx5 基因的遗传表达稳定性研究第39-71页
   ·绪言第39-40页
   ·实验材料第40-42页
     ·实验仪器第40页
     ·实验试剂第40-41页
     ·植物材料和质粒第41-42页
   ·实验方法第42-60页
     ·转基因小麦与栽培小麦的杂交与回交第42-43页
       ·植物材料的种植与杂交第42-43页
       ·回交第43页
     ·小麦胚乳组织蛋白的提取及不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第43-47页
       ·实验试剂第43-44页
       ·主要仪器第44页
       ·小麦种子贮藏蛋白的提取第44-45页
       ·SDS-PAGE第45-47页
     ·外源基因的PCR 扩增第47-51页
       ·基因组DNA 的提取第47-49页
       ·PCR 鉴定目的基因第49-51页
     ·Southern-blot 分析第51-59页
       ·溶液第52页
       ·质粒DNA 对照第52-53页
       ·基因组DNA 的酶解第53-55页
       ·Southern 转移第55-56页
       ·非放射性标记探针制备第56-57页
       ·杂交第57-58页
       ·洗膜第58页
       ·化学荧光检测第58-59页
       ·膜探针去除第59页
     ·组织化学法检测报告基因的表达第59-60页
       ·实验试剂第60页
       ·操作方法第60页
     ·χ2 统计分析方法分析遗传表达结果第60页
   ·实验结果第60-68页
     ·杂交亲本高分子量麦谷蛋白亚基组成分析第60-61页
     ·杂交有效性分析第61-62页
     ·杂交后代外源1Dx5 基因的分离表达情况第62-63页
     ·外源1Dx5 基因导致小麦HMW-GS 表达变异第63-65页
       ·杂交后代高分子量麦谷蛋白亚基组成的变化第63-64页
       ·杂交后代外源高分子量麦谷蛋白亚基1Dx5 表达量的变化第64-65页
       ·杂交后代内源高分子量麦谷蛋白亚基表达量的变化第65页
     ·外源目的基因的整合与遗传第65-66页
       ·外源目的基因的PCR 检测第65页
       ·外源目的基因的Southern-blot 检测第65-66页
     ·外源报告基因的整合与表达第66-68页
       ·外源报告基因的PCR 检测第66-67页
       ·外源报告基因的表达第67-68页
       ·目的基因与报告基因的不完全连锁遗传第68页
   ·讨论第68-70页
   ·本章小结第70-71页
3 外源 1Ax1 基因的遗传表达稳定性研究第71-82页
   ·绪言第71页
   ·实验材料第71-72页
     ·实验仪器第71页
     ·实验试剂第71-72页
     ·植物材料和质粒第72页
   ·实验方法第72-74页
     ·转基因小麦与栽培小麦的杂交与回交第72-73页
       ·植物材料的种植与杂交第72-73页
       ·回交第73页
     ·小麦胚乳组织蛋白的提取及不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第73页
     ·外源基因的PCR 扩增第73页
       ·基因组DNA 的提取第73页
       ·PCR 鉴定目的基因第73页
     ·Southern-blot 分析第73-74页
     ·组织化学法检测报告基因的表达第74页
     ·χ~2 统计分析方法分析遗传表达结果第74页
   ·实验结果第74-79页
     ·杂交亲本高分子量麦谷蛋白亚基组成分析第74页
     ·杂交有效性分析第74-75页
     ·杂交后代外源1Ax1 基因的分离表达情况第75-76页
     ·外源1Ax1 基因的插入对小麦HMW-GS 的影响第76-77页
     ·外源目的基因的整合与遗传第77-78页
       ·外源目的基因的PCR 检测第77-78页
       ·外源目的基因的Southern-blot 检测第78页
     ·外源报告基因的整合与表达第78-79页
       ·外源报告基因的PCR 检测第78页
       ·外源报告基因的表达第78-79页
   ·1Dx5 和 1Ax1 基因在杂交后代中遗传表达特性的比较第79页
   ·讨论第79-81页
   ·本章小结第81-82页
4 优良小麦新株系的获得第82-91页
   ·绪言第82页
   ·实验材料第82-83页
   ·实验方法第83-84页
   ·实验结果第84-88页
   ·讨论第88-89页
   ·本章小结第89-91页
5 全文总结第91-94页
   ·主要研究结果第91-92页
   ·本文的特色与创新第92页
   ·有待继续开展的工作第92-94页
致谢第94-95页
参考文献第95-107页
附录 1 攻读学位期间发表的论文目录第107-108页
附录 2 主要符号与缩略词表第108页

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