| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-20页 |
| ·十字花科黑腐病菌及其基因组信息 | 第12页 |
| ·十字花科黑腐病菌主要致病因子及其致病作用 | 第12-15页 |
| ·胞外多糖(EPS) | 第12-13页 |
| ·脂多糖(LPS) | 第13-14页 |
| ·胞外酶 | 第14页 |
| ·毒素 | 第14页 |
| ·致病效应物 | 第14-15页 |
| ·植物病原细菌致病因子表达调控 | 第15-19页 |
| ·双组分调控系统 | 第15-19页 |
| ·双组分调控系统简介 | 第15-16页 |
| ·双组分调控系统的磷酸基团传递途径 | 第16-17页 |
| ·双组分调控系统的分布 | 第17-18页 |
| ·双组分调控系统调控植物病原菌的致病力 | 第18页 |
| ·双组分调控系统调控动物病原菌的致病力 | 第18-19页 |
| ·群体效应 | 第19页 |
| ·本工作的目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-41页 |
| ·研究用的材料 | 第20-24页 |
| ·菌株和质粒 | 第20-21页 |
| ·抗生素和其它药剂 | 第21页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·细菌培养基 | 第21-22页 |
| ·常用溶液与缓冲液 | 第22-24页 |
| ·常规微生物学操作 | 第24-29页 |
| ·培养条件及保存 | 第24-25页 |
| ·突变体营养缺陷型检测 | 第25页 |
| ·胞外多糖的检测 | 第25-26页 |
| ·胞外蛋白酶的检测 | 第26页 |
| ·胞外淀粉酶的检测 | 第26-27页 |
| ·胞外纤维素酶的检测 | 第27-28页 |
| ·细菌游动性的检测 | 第28页 |
| ·Xcc在培养基生长情况测定 | 第28-29页 |
| ·分子操作技术 | 第29-38页 |
| ·DNA分子生物学操作 | 第29-31页 |
| ·质粒的提取 | 第29页 |
| ·十字花科黑腐病菌总DNA的提取 | 第29-30页 |
| ·DNA片段的回收 | 第30页 |
| ·限制性内切酶酶切 | 第30页 |
| ·DNA连接 | 第30-31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第31-34页 |
| ·常规PCR反应 | 第31-33页 |
| ·反转录PCR | 第33-34页 |
| ·十字花科黑腐病基因组总RNA的提取 | 第34页 |
| ·细菌的转化与结合实验 | 第34-37页 |
| ·CaCl_2转化法 | 第34-35页 |
| ·电脉冲转化法 | 第35-36页 |
| ·细菌的结合实验 | 第36-37页 |
| ·Xcc 8004基因组上目标基因的整合突变体的构建与互补 | 第37-38页 |
| ·Xcc 8004基因组上目标基因的整合突变体的构建 | 第37页 |
| ·突变体的互补 | 第37-38页 |
| ·植株试验 | 第38-39页 |
| ·植株的致病性试验 | 第38页 |
| ·过敏反应 | 第38-39页 |
| ·从叶片中回收被接种的细菌检测植物中Xcc生长情况 | 第39页 |
| ·生物信息学分析方法 | 第39-41页 |
| 第三章 结果与分析 | 第41-61页 |
| ·XC2252的生物信息学分析 | 第41-42页 |
| ·XC2252基因的基本特征 | 第41页 |
| ·XC2252结构功能域分析 | 第41-42页 |
| ·XC2252的整合突变体的构建 | 第42-45页 |
| ·XC2252的Tn5::gusA5突变体筛选 | 第42页 |
| ·XC2252的整合突变体的构建 | 第42-45页 |
| ·XC2252内部片段的PCR扩增 | 第42-43页 |
| ·将内部片段克隆到载体pK18mob上 | 第43-44页 |
| ·突变体的筛选及验证 | 第44-45页 |
| ·XC2252突变体的功能互补 | 第45-47页 |
| ·XC2252互补基因的扩增 | 第45页 |
| ·将XC2252全基因克隆到载体pLAFR6上 | 第45-46页 |
| ·三亲本接合子的获得 | 第46-47页 |
| ·XC2252突变体的基本培养特性 | 第47-49页 |
| ·NK2252不是营养缺陷型突变体 | 第47-48页 |
| ·突变体NK2252在营养胁迫下生长速率下降 | 第48-49页 |
| ·XC2252与Xcc的致病性相关 | 第49-51页 |
| ·NK2252在寄主上致病力显著降低 | 第49页 |
| ·NK2252在寄主体内生长受阻 | 第49-51页 |
| ·NK2252能诱导非寄主植物过敏反应 | 第51页 |
| ·XC2252与Xcc的主要致病因子的关系 | 第51-56页 |
| ·胞外蛋白酶活性检测 | 第51-52页 |
| ·胞外纤维素酶活性检测 | 第52-53页 |
| ·胞外淀粉酶活性检测 | 第53-54页 |
| ·胞外多糖检测 | 第54-55页 |
| ·XC2252与Xcc游动性的关系 | 第55-56页 |
| ·XC2252与Xcc生物聚膜的关系 | 第56页 |
| ·RT-PCR方法XC2252基因与相关基因的表达调控关系 | 第56-61页 |
| ·Xcc 8004与NK2252总RNA的提取 | 第56-57页 |
| ·反转录PCR | 第57-61页 |
| ·XC2252基因正调控EPS合成相关基因的表达 | 第58-59页 |
| ·XC2252基因正调控鞭毛合成及控制相关基因的表达 | 第59-60页 |
| ·XC2252基因正调控rpfA基因的表达 | 第60-61页 |
| 第四章 结果讨论与分析 | 第61-63页 |
| ·XC2252是双组分系统的调控基因 | 第61页 |
| ·XC2252基因的突变体不是营养缺陷型 | 第61页 |
| ·XC2252基因与EPS、胞外纤维素酶合成及细胞运动等有关 | 第61-62页 |
| ·XC2252基因与相关基因的表达调控关系 | 第62页 |
| ·XC2252基因的突变影响十字花科黑腐病菌Xcc 8004侵染植物的能力 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第70页 |
