| 致谢 | 第1-14页 |
| 摘要 | 第14-17页 |
| ABSTRACT | 第17-20页 |
| 符号及缩略语 | 第20-23页 |
| 第一部分 文献综述 | 第23-43页 |
| 第一章 植物多糖的免疫增强和抗病毒作用研究进展 | 第23-32页 |
| 一、植物多糖的免疫增强作用 | 第23-28页 |
| 1.多糖对免疫器官的作用 | 第23-24页 |
| 2.多糖对体液免疫功能的影响 | 第24页 |
| 3.多糖对细胞免疫功能的影响 | 第24-25页 |
| 4.多糖对单核巨噬细胞系统的影响 | 第25-26页 |
| 5.多糖对红细胞免疫功能的影响 | 第26页 |
| 6.多糖对细胞因子的影响 | 第26-27页 |
| 7.多糖对淋巴细胞信号转导的影响 | 第27-28页 |
| ·对cAMP、cGMP信息系统的影响 | 第27-28页 |
| ·对一氧化氮的影响 | 第28页 |
| ·对钙离子转导的影响 | 第28页 |
| 二、植物多糖抗病毒作用研究进展 | 第28-32页 |
| 1.体内抗病毒作用 | 第29-30页 |
| 2.体外抗病毒作用 | 第30-32页 |
| 第二章 猪蓝耳病病毒研究进展 | 第32-43页 |
| 一、病原学特性 | 第32-35页 |
| 1 PRRSV一般特性 | 第32-33页 |
| 2 PRRSV基因组结构 | 第33页 |
| 3 PRRSV的抗原性 | 第33-35页 |
| 二、流行病学 | 第35-37页 |
| 1 流行情况 | 第35-36页 |
| 2 流行病学特点 | 第36-37页 |
| 三、临床症状及病理变化 | 第37-38页 |
| 四、诊断方法 | 第38-39页 |
| 1 抗原检测 | 第38页 |
| 2 血清学抗体检测 | 第38-39页 |
| 五、PRRSV免疫学研究 | 第39-42页 |
| 1 抗体依赖性增强作用 | 第39页 |
| 2 体液免疫 | 第39-40页 |
| 3 细胞免疫 | 第40-41页 |
| 4 免疫抑制 | 第41-42页 |
| 六、PRRS的防制 | 第42-43页 |
| 第二部分 3种植物多糖抗PRRSV及免疫增强作用研究 | 第43-117页 |
| 第三章 3种植物多糖的提取及抗PRRSV作用研究 | 第43-54页 |
| 1 材料与方法 | 第44-48页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·药材 | 第44页 |
| ·细胞株与毒株 | 第44页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第44-45页 |
| ·提取多糖用试剂 | 第44页 |
| ·细胞培养用试剂 | 第44-45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-48页 |
| ·山药多糖的提取 | 第45-46页 |
| ·板蓝根、黄芪多糖的提取 | 第46页 |
| ·多糖含量的测定 | 第46页 |
| ·标准曲线的制作 | 第46页 |
| ·含量测定 | 第46页 |
| ·3种植物多糖在Marc-145细胞上安全浓度测定 | 第46-47页 |
| ·PRRSV毒力测定-TCID_(50) | 第47页 |
| ·植物多糖对PRRSV的阻断作用测定 | 第47页 |
| ·植物多糖对PRRSV抑制作用的测定 | 第47页 |
| ·植物多糖对PRRSV的直接杀灭作用测定 | 第47-48页 |
| ·数据处理 | 第48页 |
| 2 结果 | 第48-51页 |
| ·3种植物多糖的提取率和净含量 | 第48页 |
| ·3种植物多糖在Marc-145细胞上安全浓度测定结果 | 第48页 |
| ·3种植物多糖对PRRSV的阻断作用测定结果 | 第48-49页 |
| ·3种植物多糖对PRRSV的抑制作用测定结果 | 第49-50页 |
| ·3种植物多糖对PRRSV的直接杀灭作用测定结果 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-54页 |
| ·多糖的提取、测定方法 | 第51-52页 |
| ·多糖的抗PRRSV作用 | 第52-54页 |
| 第四章 3种植物多糖的最佳免疫剂量筛选 | 第54-60页 |
| 1 材料与方法 | 第54-56页 |
| ·植物多糖 | 第54页 |
| ·主要试剂及配制 | 第54-55页 |
| ·动物及分组处理 | 第55页 |
| ·溶血素的测定 | 第55-56页 |
| ·溶血空斑的测定 | 第56页 |
| ·腹腔巨噬细胞吞噬功能的测定 | 第56页 |
| ·数据分析 | 第56页 |
| 2 结果 | 第56-58页 |
| ·溶血素和溶血空斑的变化 | 第56-57页 |
| ·腹腔巨噬细胞吞噬功能的变化 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| ·3种多糖对小鼠溶血素及溶血空斑形成的影响 | 第58-59页 |
| ·3种多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数的影响 | 第59页 |
| ·3种多糖的免疫剂量 | 第59-60页 |
| 第五章 3种植物多糖对PRRSV疫苗免疫增强作用研究 | 第60-72页 |
| 一、植物多糖对PRRSV灭活苗免疫抗体的影响 | 第61-66页 |
| 1 材料与方法 | 第61-62页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·植物多糖 | 第61页 |
| ·疫苗 | 第61-62页 |
| ·试验动物 | 第62页 |
| ·PRRSV抗体检测ELISA试剂盒 | 第62页 |
| ·方法 | 第62页 |
| ·动物分组接种 | 第62页 |
| ·血样采集 | 第62页 |
| ·血清ELISA抗体检测 | 第62页 |
| ·数据分析 | 第62页 |
| 2 结果 | 第62-65页 |
| ·灭活苗免疫猪血清中的ELISA抗体测定结果 | 第62-65页 |
| 3 小结和讨论 | 第65-66页 |
| ·多糖对PRRSV灭活疫苗免疫抗体的影响 | 第65页 |
| ·多糖剂量对灭活苗抗体水平的影响 | 第65页 |
| ·PRRSV灭活苗抗体产生规律 | 第65-66页 |
| 二、植物多糖对PRRS弱毒苗免疫抗体的影响 | 第66-72页 |
| 1 材料与方法 | 第66-67页 |
| ·材料 | 第66页 |
| ·植物多糖 | 第66页 |
| ·疫苗 | 第66页 |
| ·试验动物 | 第66页 |
| ·PRRSV抗体检测ELISA试剂盒 | 第66页 |
| ·方法 | 第66-67页 |
| ·动物分组接种 | 第66-67页 |
| ·血样采集 | 第67页 |
| ·血清ELISA抗体检测 | 第67页 |
| ·数据分析 | 第67页 |
| 2 结果 | 第67-69页 |
| ·PRRSV弱毒苗免疫猪血清中的ELISA抗体测定结果 | 第67-69页 |
| 3.小结和讨论 | 第69-72页 |
| ·多糖剂量对PRRSV弱毒苗抗体水平的影响 | 第69页 |
| ·多糖对PRRSV弱毒苗免疫抗体水平的影响 | 第69-70页 |
| ·PRRSV弱毒苗免疫抗体产生规律 | 第70页 |
| ·同一多糖对不同疫苗免疫抗体水平的影响 | 第70-72页 |
| 第六章 植物多糖对培养的猪淋巴细胞增殖、分泌细胞因子和NO的影响 | 第72-86页 |
| 1 材料与方法 | 第73-77页 |
| ·试验材料 | 第73页 |
| ·试验药物 | 第73页 |
| ·主要试剂 | 第73页 |
| ·主要仪器 | 第73页 |
| ·试验方法 | 第73-77页 |
| ·猪脾脏淋巴细胞悬液的制备 | 第73-74页 |
| ·淋巴细胞培养及检测 | 第74页 |
| ·淋巴细胞分泌NO、NOS和诱导型NOS(iNOS)含量的测定 | 第74-75页 |
| ·NO含量的测定 | 第74-75页 |
| ·NOS和诱导型NOS(iNOS)含量的测定 | 第75页 |
| ·淋巴细胞分泌细胞因子的测定 | 第75-77页 |
| ·猪淋巴细胞分泌IL-2含量的测定 | 第75-76页 |
| ·猪淋巴细胞分泌IL-4含量的测定 | 第76页 |
| ·猪淋巴细胞分泌IFN-γ含量的测定 | 第76-77页 |
| ·数据分析 | 第77页 |
| 2 结果 | 第77-83页 |
| ·多糖对体外培养猪脾淋巴细胞增殖的影响 | 第77-80页 |
| ·板蓝根多糖对体外培养猪脾淋巴细胞增殖的影响 | 第77-78页 |
| ·山药多糖对体外培养猪脾淋巴细胞增殖的影响 | 第78-79页 |
| ·黄芪多糖对体外培养猪脾淋巴细胞增殖的影响 | 第79-80页 |
| ·多糖对体外培养猪脾淋巴细胞分泌NO以及NOS、iNOS活力的影响 | 第80-81页 |
| ·多糖对体外培养猪脾淋巴细胞分泌IL-2的影响 | 第81页 |
| ·多糖对体外培养猪脾淋巴细胞分泌IL-4的影响 | 第81-82页 |
| ·多糖对体外培养猪脾淋巴细胞分泌IFN-γ的影响 | 第82-83页 |
| 3 讨论 | 第83-86页 |
| ·多糖对体外培养猪脾脏淋巴细胞增殖的影响 | 第83页 |
| ·多糖对体外培养猪脾淋巴细胞分泌NO的影响 | 第83-84页 |
| ·多糖对体外培养猪脾脏淋巴细胞分泌细胞因子的影响 | 第84-85页 |
| ·黄芪多糖对体外培养猪脾脏淋巴细胞分泌细胞因子的影响 | 第84-85页 |
| ·板蓝根多糖对体外培养猪脾脏淋巴细胞分泌细胞因子的影响 | 第85页 |
| ·山药多糖对体外培养猪脾脏淋巴细胞分泌细胞因子的影响 | 第85页 |
| ·淋巴细胞增殖的测定方法 | 第85-86页 |
| 第七章 3种植物多糖对PRRSV疫苗免疫猪T淋巴细胞亚群的影响 | 第86-105页 |
| 一、3种植物多糖对PRRSV灭活苗免疫猪T淋巴细胞亚群的影响 | 第87-95页 |
| 1 材料与方法 | 第87-88页 |
| ·材料 | 第87页 |
| ·植物多糖 | 第87页 |
| ·疫苗 | 第87页 |
| ·T淋巴细胞亚群检测试剂 | 第87页 |
| ·试验动物分组免疫 | 第87页 |
| ·方法 | 第87-88页 |
| ·血样采集 | 第87页 |
| ·T淋巴细胞亚群检测 | 第87-88页 |
| ·数据分析 | 第88页 |
| 2 结果 | 第88-94页 |
| ·对外周血CD3~+淋巴细胞的影响 | 第88页 |
| ·对外周血CD4~+淋巴细胞的影响 | 第88-91页 |
| ·对外周血CD8~+淋巴细胞的影响 | 第91-92页 |
| ·对外周血CD4~+/CD8~+比值的影响 | 第92-94页 |
| 3.小结和讨论 | 第94-95页 |
| ·多糖对接种PRRSV灭活苗时机体细胞免疫的影响 | 第94页 |
| ·猪的T淋巴细胞亚群 | 第94-95页 |
| 二、3种植物多糖对PRRSV弱毒苗免疫猪T淋巴细胞亚群的影响 | 第95-105页 |
| 1 材料与方法 | 第95-96页 |
| ·材料 | 第95-96页 |
| ·植物多糖 | 第95页 |
| ·疫苗 | 第95页 |
| ·T淋巴细胞亚群检测试剂 | 第95页 |
| ·试验动物分组 | 第95-96页 |
| ·方法 | 第96页 |
| ·血样采集 | 第96页 |
| ·T淋巴细胞亚群检测 | 第96页 |
| ·数据分析 | 第96页 |
| 2 结果 | 第96-103页 |
| ·对外周血CD3~+淋巴细胞的影响 | 第96-98页 |
| ·对外周血CD4~+淋巴细胞的影响 | 第98-101页 |
| ·对外周血CD8~+淋巴细胞的影响 | 第101-103页 |
| ·对外周血CD4~+/CD8~+比值的影响 | 第103页 |
| ·弱毒疫苗免疫组与非免疫组T淋巴细胞亚群变化 | 第103页 |
| 3 小结和讨论 | 第103-105页 |
| ·多糖对PRRSV弱毒苗免疫猪T淋巴细胞亚群的影响 | 第103页 |
| ·PRRSV弱毒苗免疫组与非免疫组T淋巴细胞亚群变化 | 第103-105页 |
| 第八章 3种植物多糖对PRRSV免疫猪外周血淋巴细胞IFN-γmRNA表达的影响 | 第105-117页 |
| 1 材料与方法 | 第106-111页 |
| ·多糖与PRRSV疫苗 | 第106页 |
| ·主要试剂 | 第106页 |
| ·琼脂糖电泳用溶液 | 第106页 |
| ·主要仪器设备 | 第106页 |
| ·实验动物分组 | 第106-107页 |
| ·外周血淋巴细胞(PBMC)分离 | 第107页 |
| ·总RNA的提取 | 第107页 |
| ·cDNA的合成(反转录) | 第107-108页 |
| ·PCR引物的设计 | 第108-109页 |
| ·RT-PCR | 第109-110页 |
| ·定量方法 | 第110-111页 |
| ·数据处理和统计学分析 | 第111页 |
| 2.结果 | 第111-113页 |
| ·RNA纯度测定 | 第111页 |
| ·基因的扩增 | 第111页 |
| ·IFN-γmRNA表达量的变化 | 第111-113页 |
| 3 小结与讨论 | 第113-117页 |
| ·RT-FQ-PCR方法 | 第113-115页 |
| ·RT-FO-PCR分类 | 第113-114页 |
| ·RT-FQ-PCR的定量方法 | 第114-115页 |
| ·PRRSV弱毒疫苗免疫对IFN-γmRNA表达的影响 | 第115页 |
| ·多糖对IFN-γmRNA表达的影响 | 第115-116页 |
| ·IFN-γmRNA的表达与体液免疫的关系 | 第116-117页 |
| 全文结论 | 第117-120页 |
| 参考文献: | 第120-139页 |
| 附:攻读博士学位期间发表的与论文研究内容有关的学术论文 | 第139-140页 |
