中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
前言 | 第12-26页 |
1. 哺乳动物半桥粒的概述 | 第12-13页 |
2. 秀丽隐杆线虫半桥粒的概述 | 第13-15页 |
3. 细胞分裂周期与凋亡调控因子CCAR1/CCAR-1 的概述 | 第15-17页 |
4. 秀丽隐杆线虫细胞外基质UNC-52/perlecan的概述 | 第17-19页 |
5. 本课题研究焦点与意义 | 第19-20页 |
参考文献 | 第20-26页 |
第一部分 实验材料与方法 | 第26-62页 |
1. 实验材料 | 第26-33页 |
1.1 实验动物 | 第26-27页 |
1.2 试剂与材料 | 第27-33页 |
2 实验方法 | 第33-62页 |
2.1 线虫的培养 | 第33页 |
2.2 杂交虫株的建立 | 第33-36页 |
2.3 快速扩增cDNA末端(RACE,Rapid-Amplification of cDNA Ends) | 第36-39页 |
2.4 CRISPR 基因编辑虫株的建立 | 第39-41页 |
2.5 RNAi干扰 | 第41-43页 |
2.6 分子克隆与转基因 | 第43-50页 |
2.7 质粒突变 | 第50-52页 |
2.8 免疫染色与激光共聚焦成像 | 第52-55页 |
2.9 荧光定量PCR(QPCR) | 第55-58页 |
2.10 细胞培养,转染和免疫共沉淀 | 第58-59页 |
2.11 蛋白质印迹分析 | 第59-62页 |
第二部分 半桥粒动态重排过程 | 第62-69页 |
引言 | 第62-63页 |
结果 | 第63-68页 |
2.1 胚胎发育过程中半桥粒的重排过程 | 第63页 |
2.2 胚胎发育过程中半桥粒与肌动蛋白细胞骨架的相对位置变化 | 第63-67页 |
2.3 幼虫发育过程中半桥粒与外皮的相对位置变化 | 第67-68页 |
小结 | 第68-69页 |
第三部分 CCAR-1 缺失导致半桥粒缺陷的表型分析 | 第69-74页 |
引言 | 第69页 |
结果 | 第69-73页 |
3.1 CCAR-1 的缺失影响半桥粒的稳定性 | 第69-71页 |
3.2 CCAR-1A是影响半桥粒结构的主要亚型 | 第71-73页 |
小结 | 第73-74页 |
第四部分 CCAR-1 同源性与空间定位分析 | 第74-80页 |
引言 | 第74页 |
结果 | 第74-79页 |
4.1 CCAR-1 蛋白结构同源性分析 | 第74-76页 |
4.2 CCAR-1 的蛋白空间表达定位 | 第76-79页 |
小结 | 第79-80页 |
第五部分 CCAR-1 影响半桥粒稳定性的下游靶点筛选 | 第80-90页 |
引言 | 第80页 |
结果 | 第80-89页 |
5.1 ccar-1 与半桥粒相关成分的基因互作关系 | 第80-82页 |
5.2 CCAR-1 调节unc-52 的RNA选择性剪接 | 第82-85页 |
5.3 unc-52 的RNA选择性剪接影响半桥粒的稳定性 | 第85页 |
5.4 unc-52 的RNA选择性剪接影响半桥粒与肌动蛋白丝的相对位置变化 | 第85-87页 |
5.5 unc-52 的RNA选择性剪接影响UNC-52 的定位 | 第87-89页 |
小结 | 第89-90页 |
第六部分 CCAR-1 影响半桥粒稳定性的具体分子机制 | 第90-95页 |
引言 | 第90页 |
结果 | 第90-94页 |
6.1 CCAR-1 不影响剪接因子的转录水平 | 第90-92页 |
6.2 CCAR-1 通过与HRP-2 的相互作用影响选择性剪接 | 第92-94页 |
小结 | 第94-95页 |
讨论 | 第95-100页 |
参考文献 | 第100-107页 |
综述 | 第107-130页 |
参考文献 | 第121-130页 |
攻读博士学位期间公开发表的论文 | 第130页 |
本课题所受资助 | 第130-131页 |
中英文缩略词汇总 | 第131-133页 |
致谢 | 第133-135页 |