| 提要 | 第1-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-39页 |
| 第一节 肿瘤基因治疗 | 第11-15页 |
| 1. 肿瘤基因治疗的策略 | 第11-12页 |
| 2. 肿瘤基因治疗途径 | 第12-15页 |
| 3. 展望 | 第15页 |
| 第二节 抑癌基因P53 | 第15-23页 |
| 1. p53 的性质 | 第16-17页 |
| 2. p53 的作用 | 第17-19页 |
| 3. 肿瘤细胞的p53 基因突变 | 第19-20页 |
| 4. p53 基因载体的类型及特点 | 第20-23页 |
| 第三节 非病毒载体组蛋白简介 | 第23-30页 |
| 1. 组蛋白的性质 | 第23-25页 |
| 2. 组蛋白的来源 | 第25页 |
| 3. 组蛋白与DNA 形成复合物的原理 | 第25-26页 |
| 4. 组蛋白介导基因的入胞机制 | 第26-27页 |
| 5. 影响组蛋白载体的基因转染效率的因素 | 第27页 |
| 6. 生物安全性 | 第27-28页 |
| 7. 发展方向 | 第28-29页 |
| 8. 前景与展望 | 第29-30页 |
| 第四节 嗜热古菌组蛋白HPHA 简介 | 第30-38页 |
| 1. 极端微生物及嗜热古菌 | 第30-33页 |
| 2. 嗜热古菌组蛋白HPhA 的来源 | 第33页 |
| 3. HPhA 的同源序列比较分析 | 第33-36页 |
| 4. HPhA 的结构特点 | 第36-37页 |
| 5. HPhA 的生物学功能 | 第37-38页 |
| 第五节 本论文立题依据 | 第38-39页 |
| 第二章 HPHA 介导抑癌基因P53 体外细胞实验研究 | 第39-68页 |
| 第一节 前言 | 第39页 |
| 第二节 实验材料 | 第39-43页 |
| 1. 质粒 | 第39-40页 |
| 2. 试剂 | 第40页 |
| 3. 仪器 | 第40页 |
| 4. 溶液配制 | 第40-43页 |
| 第三节 实验方法 | 第43-55页 |
| 1. HPhA 的大量提取与纯化 | 第43页 |
| 2. pCMV-p53 质粒的制备 | 第43-46页 |
| 3. 转染复合物的制备 | 第46页 |
| 4. 荧光显微镜观察复合物的形态 | 第46页 |
| 5. 细胞培养 | 第46-47页 |
| 6. 细胞转染 | 第47页 |
| 7. 考察外源基因p53mRNA 的表达水平 | 第47-50页 |
| 8. 考察外源基因p53 蛋白表达水平 | 第50-53页 |
| 9. 考察外源基因产物对细胞生长的影响 | 第53-54页 |
| 10. 考察外源基因产物对细胞周期的影响 | 第54-55页 |
| 第四节 实验结果 | 第55-65页 |
| 1. pCMV-p53 质粒的鉴定 | 第55-56页 |
| 2. 荧光显微镜观察复合物结合前后的形态变化 | 第56-57页 |
| 3. 实时荧光半定量RT-PCR 考察外源基因p53mRNA 的表达 | 第57-59页 |
| 4. 细胞免疫组化法检测HphA 介导p53 的蛋白表达 | 第59-60页 |
| 5. Western blot 检测外源基因p53 蛋白表达 | 第60-61页 |
| 6. XTT 法考察转染细胞生长状况 | 第61-62页 |
| 7. FCM 考察p53 诱导细胞凋亡 | 第62-65页 |
| 第五节 实验讨论 | 第65-67页 |
| 第六节 实验小结 | 第67-68页 |
| 第三章 HPHA 介导抑癌基因P53 动物体内实验研究 | 第68-78页 |
| 第一节 前言 | 第68页 |
| 第二节 实验材料 | 第68-69页 |
| 1. 动物 | 第68页 |
| 2. 试剂 | 第68页 |
| 3. 仪器 | 第68-69页 |
| 第三节 实验方法 | 第69-71页 |
| 1. 裸鼠肿瘤模型的建立 | 第69页 |
| 2. 荷瘤裸鼠成瘤实验 | 第69-70页 |
| 3. 免疫组化法检测皮下种植瘤细胞形态 | 第70页 |
| 4. TUNEL 法检测原位细胞凋亡 | 第70-71页 |
| 第四节 实验结果 | 第71-76页 |
| 1. 肿瘤细胞形态学观察 | 第71-72页 |
| 2. 对移植瘤的生长的影响 | 第72-74页 |
| 3. TUNEL 法获得原位细胞凋亡指数 | 第74-76页 |
| 第五节 实验讨论 | 第76-77页 |
| 第六节 小结 | 第77-78页 |
| 第四章 HPHA 在小鼠体内的药代动力学研究 | 第78-101页 |
| 第一节 前言 | 第78页 |
| 第二节 实验材料 | 第78-79页 |
| 1. 药品 | 第78页 |
| 2. 动物 | 第78-79页 |
| 3. 溶液配制 | 第79页 |
| 第三节 实验方法 | 第79-85页 |
| 1. 抗HPhA 单克隆抗体的制备 | 第79-81页 |
| 2. 抗HPhA 单克隆抗体特异性测定 | 第81页 |
| 3. HPhA 的辣根过氧化物酶标记 | 第81-82页 |
| 4. 辣根过氧化物酶标记物的评价 | 第82-83页 |
| 5. 建立测定HPhA 的ELISA 方法 | 第83页 |
| 6. ELISA 方法的方法学确证 | 第83-84页 |
| 7. HPhA 在小鼠体内的药代动力学研究 | 第84-85页 |
| 第四节 实验结果 | 第85-97页 |
| 1. 抗HPhA 单克隆抗体的纯化 | 第85-87页 |
| 2. 抗HPhA 单克隆抗体特异性 | 第87-88页 |
| 3. HPHA 辣根过氧化物酶标记结合物的评价 | 第88页 |
| 4. HPhA 辣根过氧化物酶标记结合物的活性测定 | 第88-89页 |
| 5. cdELISA 的标准曲线的制备 | 第89-91页 |
| 6. 方法学确证 | 第91-94页 |
| 7. HPhA 的小鼠药代动力学试验 | 第94-97页 |
| 第五节 实验讨论 | 第97-100页 |
| 第六节 小结 | 第100-101页 |
| 第五章 重组古菌组蛋白免疫原性的研究 | 第101-112页 |
| 第一节 序言 | 第101页 |
| 第二节 实验材料 | 第101-102页 |
| 1. 动物 | 第101页 |
| 2. 试剂 | 第101页 |
| 3. 仪器 | 第101-102页 |
| 4. 溶液配制 | 第102页 |
| 第三节 实验方法 | 第102-104页 |
| 1. 免疫方案 | 第102-103页 |
| 2. 免疫血清的制备 | 第103页 |
| 3. 体液免疫检测 | 第103页 |
| 4. 细胞免疫检测 | 第103-104页 |
| 5. 安全性 | 第104页 |
| 第四节 实验结果 | 第104-109页 |
| 1. 酶联免疫吸附试验结果 | 第104-106页 |
| 2. 脾细胞的刺激指数 | 第106-107页 |
| 3. 脾细胞分泌IFN-γ水平 | 第107-108页 |
| 4. 体重变化 | 第108页 |
| 5. 脏器指数 | 第108-109页 |
| 第五节 实验讨论 | 第109-111页 |
| 第六节 小结 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-130页 |
| 作者简历 | 第130-131页 |
| 博士期间已发表和待发表的文章 | 第131-133页 |
| 摘要 | 第133-138页 |
| ABSTRACT | 第138-145页 |
| 致谢 | 第145页 |
