摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-20页 |
第1章 绪论 | 第20-37页 |
·经典的生物分子检测方法 | 第20-24页 |
·电泳法 | 第20-21页 |
·高效液相色谱法 | 第21页 |
·质谱法 | 第21-22页 |
·电化学法 | 第22页 |
·光谱法 | 第22-24页 |
·核酸荧光探针在生物分子检测中的应用 | 第24-34页 |
·TaqMan 探针 | 第24页 |
·QUAL(Quench auto-ligation)探针 | 第24-25页 |
·蝎形引物探针 | 第25-26页 |
·相邻探针 | 第26-27页 |
·阴阳探针 | 第27-28页 |
·核酶探针 | 第28-29页 |
·核酸适体荧光探针 | 第29-30页 |
·分子信标荧光探针 | 第30-34页 |
·本论文拟开展的工作 | 第34-37页 |
第2章 分子信标结合T4 DNA 连接酶应用于 ATP 的检测 | 第37-45页 |
·前言 | 第37页 |
·实验部分 | 第37-39页 |
·试剂与仪器 | 第37-38页 |
·实验方法 | 第38-39页 |
·结果与讨论 | 第39-44页 |
·实验原理 | 第39-40页 |
·分子信标性能考察 | 第40-41页 |
·ATP 检测可行性 | 第41页 |
·ATP 分析 | 第41-42页 |
·ATP 检测选择性 | 第42-43页 |
·细胞内ATP 检测 | 第43-44页 |
·小结 | 第44-45页 |
第3章 分子信标技术用于肌酸激酶活性的检测 | 第45-52页 |
·前言 | 第45页 |
·实验部分 | 第45-47页 |
·试剂与仪器 | 第45-46页 |
·实验方法 | 第46-47页 |
·结果与讨论 | 第47-51页 |
·检测原理 | 第47页 |
·可行性分析 | 第47-48页 |
·实验条件的优化 | 第48-50页 |
·肌酸激酶活性检测 | 第50页 |
·抑制剂对肌酸激酶活性的影响 | 第50-51页 |
·小结 | 第51-52页 |
第4章 分子信标技术用于蛋白激酶A 活性的检测 | 第52-60页 |
·前言 | 第52页 |
·实验部分 | 第52-54页 |
·试剂与仪器 | 第52-53页 |
·实验方法 | 第53-54页 |
·结果与讨论 | 第54-58页 |
·检测原理 | 第54-55页 |
·可行性分析 | 第55页 |
·ATP 标准曲线的建立 | 第55-56页 |
·检测条件的优化 | 第56-57页 |
·蛋白激酶A 活性检测 | 第57-58页 |
·染料木素对蛋白激酶A 活性的影响 | 第58页 |
·小结 | 第58-60页 |
第5章 分子信标结合酶信号放大检测ATP | 第60-67页 |
·前言 | 第60页 |
·实验部分 | 第60-61页 |
·试剂与仪器 | 第60页 |
·实验方法 | 第60-61页 |
·结果与讨论 | 第61-66页 |
·检测原理 | 第61页 |
·可行性分析 | 第61-62页 |
·实验条件的优化 | 第62-64页 |
·ATP 检测 | 第64-65页 |
·ATP 检测的选择性 | 第65-66页 |
·小结 | 第66-67页 |
第6章 分子信标结合E.COLI DNA 连接酶检测NAD 的新方法 | 第67-74页 |
·前言 | 第67页 |
·实验部分 | 第67-69页 |
·试剂与仪器 | 第67-68页 |
·实验方法 | 第68-69页 |
·结果与讨论 | 第69-73页 |
·实验原理 | 第69-70页 |
·NAD 检测可行性 | 第70页 |
·NAD 分析 | 第70-71页 |
·NAD 检测选择性 | 第71-72页 |
·卡路里限制对细胞内NAD 水平的影响 | 第72-73页 |
·小结 | 第73-74页 |
第7章 基于分子信标的NADP 高灵敏检测方法 | 第74-80页 |
·前言 | 第74页 |
·实验部分 | 第74-76页 |
·试剂与仪器 | 第74页 |
·实验方法 | 第74-75页 |
·检测条件的选择 | 第75页 |
·特异性考察 | 第75-76页 |
·结果与讨论 | 第76-79页 |
·检测原理 | 第76页 |
·实验条件的优化 | 第76-78页 |
·NADP 的定量分析 | 第78页 |
·特异性实验 | 第78-79页 |
·小结 | 第79-80页 |
第8章 分子信标用于DNA 聚合酶反应的实时监测 | 第80-87页 |
·前言 | 第80页 |
·实验部分 | 第80-82页 |
·试剂与仪器 | 第80-81页 |
·实验方法 | 第81-82页 |
·结果与讨论 | 第82-86页 |
·实验原理 | 第82页 |
·DNA 聚合酶反应的实时监测 | 第82-83页 |
·实验条件优化 | 第83-84页 |
·监测体系用于聚合酶定量分析 | 第84-85页 |
·KF-聚合酶特异性实验 | 第85页 |
·氯喹对KF-聚合酶活性的影响 | 第85-86页 |
·小结 | 第86-87页 |
第9章 分子信标用于核酸3’端去磷酸化过程的实时监测研究 | 第87-95页 |
·前言 | 第87页 |
·实验部分 | 第87-89页 |
·试剂和仪器 | 第87-88页 |
·实验方法 | 第88-89页 |
·结果与讨论 | 第89-94页 |
·实验原理 | 第89-90页 |
·核酸3’端去磷酸化过程的实时监测 | 第90页 |
·外界因子对T4 PNK 磷酸酯酶活性影响 | 第90-91页 |
·T4 PNK 磷酸酯酶活性的分析 | 第91-92页 |
·对底物DNA 的选择性 | 第92-93页 |
·肝素对T4 PNK 磷酸酯酶活性的影响 | 第93-94页 |
·小结 | 第94-95页 |
第10章 分子信标应用于限制性内切酶切割核酸过程的实时监测 | 第95-102页 |
·前言 | 第95-96页 |
·实验部分 | 第96-97页 |
·试剂和仪器 | 第96页 |
·实验方法 | 第96-97页 |
·结果与讨论 | 第97-101页 |
·实验原理 | 第97-98页 |
·限制性内切酶切割DNA 片段过程的实时监测 | 第98页 |
·实验条件优化 | 第98-99页 |
·限制性内切酶活性的分析 | 第99-100页 |
·肝素对Rsa I 内切酶活性的影响 | 第100-101页 |
·小结 | 第101-102页 |
第11章 分子信标应用于碱性磷酸酶活性的实时监测 | 第102-109页 |
·前言 | 第102页 |
·实验部分 | 第102-104页 |
·试剂和仪器 | 第102-103页 |
·实验方法 | 第103-104页 |
·结果与讨论 | 第104-107页 |
·实验原理 | 第104页 |
·碱性磷酸酶活性的实时监测 | 第104-105页 |
·实验条件优化 | 第105-106页 |
·碱性磷酸酶活性的分析 | 第106-107页 |
·抑制剂对碱性磷酸酶活性的影响 | 第107页 |
·小结 | 第107-109页 |
结论 | 第109-111页 |
参考文献 | 第111-134页 |
附录A 攻读学位期间所发表的学术论文及专利目录 | 第134-136页 |
致谢 | 第136页 |