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分子信标技术在生物酶和ATP等重要生物分子检测中的应用

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-20页
第1章 绪论第20-37页
   ·经典的生物分子检测方法第20-24页
     ·电泳法第20-21页
     ·高效液相色谱法第21页
     ·质谱法第21-22页
     ·电化学法第22页
     ·光谱法第22-24页
   ·核酸荧光探针在生物分子检测中的应用第24-34页
     ·TaqMan 探针第24页
     ·QUAL(Quench auto-ligation)探针第24-25页
     ·蝎形引物探针第25-26页
     ·相邻探针第26-27页
     ·阴阳探针第27-28页
     ·核酶探针第28-29页
     ·核酸适体荧光探针第29-30页
     ·分子信标荧光探针第30-34页
   ·本论文拟开展的工作第34-37页
第2章 分子信标结合T4 DNA 连接酶应用于 ATP 的检测第37-45页
   ·前言第37页
   ·实验部分第37-39页
     ·试剂与仪器第37-38页
     ·实验方法第38-39页
   ·结果与讨论第39-44页
     ·实验原理第39-40页
     ·分子信标性能考察第40-41页
     ·ATP 检测可行性第41页
     ·ATP 分析第41-42页
     ·ATP 检测选择性第42-43页
     ·细胞内ATP 检测第43-44页
   ·小结第44-45页
第3章 分子信标技术用于肌酸激酶活性的检测第45-52页
   ·前言第45页
   ·实验部分第45-47页
     ·试剂与仪器第45-46页
     ·实验方法第46-47页
   ·结果与讨论第47-51页
     ·检测原理第47页
     ·可行性分析第47-48页
     ·实验条件的优化第48-50页
     ·肌酸激酶活性检测第50页
     ·抑制剂对肌酸激酶活性的影响第50-51页
   ·小结第51-52页
第4章 分子信标技术用于蛋白激酶A 活性的检测第52-60页
   ·前言第52页
   ·实验部分第52-54页
     ·试剂与仪器第52-53页
     ·实验方法第53-54页
   ·结果与讨论第54-58页
     ·检测原理第54-55页
     ·可行性分析第55页
     ·ATP 标准曲线的建立第55-56页
     ·检测条件的优化第56-57页
     ·蛋白激酶A 活性检测第57-58页
     ·染料木素对蛋白激酶A 活性的影响第58页
   ·小结第58-60页
第5章 分子信标结合酶信号放大检测ATP第60-67页
   ·前言第60页
   ·实验部分第60-61页
     ·试剂与仪器第60页
     ·实验方法第60-61页
   ·结果与讨论第61-66页
     ·检测原理第61页
     ·可行性分析第61-62页
     ·实验条件的优化第62-64页
     ·ATP 检测第64-65页
     ·ATP 检测的选择性第65-66页
   ·小结第66-67页
第6章 分子信标结合E.COLI DNA 连接酶检测NAD 的新方法第67-74页
   ·前言第67页
   ·实验部分第67-69页
     ·试剂与仪器第67-68页
     ·实验方法第68-69页
   ·结果与讨论第69-73页
     ·实验原理第69-70页
     ·NAD 检测可行性第70页
     ·NAD 分析第70-71页
     ·NAD 检测选择性第71-72页
     ·卡路里限制对细胞内NAD 水平的影响第72-73页
   ·小结第73-74页
第7章 基于分子信标的NADP 高灵敏检测方法第74-80页
   ·前言第74页
   ·实验部分第74-76页
     ·试剂与仪器第74页
     ·实验方法第74-75页
     ·检测条件的选择第75页
     ·特异性考察第75-76页
   ·结果与讨论第76-79页
     ·检测原理第76页
     ·实验条件的优化第76-78页
     ·NADP 的定量分析第78页
     ·特异性实验第78-79页
   ·小结第79-80页
第8章 分子信标用于DNA 聚合酶反应的实时监测第80-87页
   ·前言第80页
   ·实验部分第80-82页
     ·试剂与仪器第80-81页
     ·实验方法第81-82页
   ·结果与讨论第82-86页
     ·实验原理第82页
     ·DNA 聚合酶反应的实时监测第82-83页
     ·实验条件优化第83-84页
     ·监测体系用于聚合酶定量分析第84-85页
     ·KF-聚合酶特异性实验第85页
     ·氯喹对KF-聚合酶活性的影响第85-86页
   ·小结第86-87页
第9章 分子信标用于核酸3’端去磷酸化过程的实时监测研究第87-95页
   ·前言第87页
   ·实验部分第87-89页
     ·试剂和仪器第87-88页
     ·实验方法第88-89页
   ·结果与讨论第89-94页
     ·实验原理第89-90页
     ·核酸3’端去磷酸化过程的实时监测第90页
     ·外界因子对T4 PNK 磷酸酯酶活性影响第90-91页
     ·T4 PNK 磷酸酯酶活性的分析第91-92页
     ·对底物DNA 的选择性第92-93页
     ·肝素对T4 PNK 磷酸酯酶活性的影响第93-94页
   ·小结第94-95页
第10章 分子信标应用于限制性内切酶切割核酸过程的实时监测第95-102页
   ·前言第95-96页
   ·实验部分第96-97页
     ·试剂和仪器第96页
     ·实验方法第96-97页
   ·结果与讨论第97-101页
     ·实验原理第97-98页
     ·限制性内切酶切割DNA 片段过程的实时监测第98页
     ·实验条件优化第98-99页
     ·限制性内切酶活性的分析第99-100页
     ·肝素对Rsa I 内切酶活性的影响第100-101页
   ·小结第101-102页
第11章 分子信标应用于碱性磷酸酶活性的实时监测第102-109页
   ·前言第102页
   ·实验部分第102-104页
     ·试剂和仪器第102-103页
     ·实验方法第103-104页
   ·结果与讨论第104-107页
     ·实验原理第104页
     ·碱性磷酸酶活性的实时监测第104-105页
     ·实验条件优化第105-106页
     ·碱性磷酸酶活性的分析第106-107页
     ·抑制剂对碱性磷酸酶活性的影响第107页
   ·小结第107-109页
结论第109-111页
参考文献第111-134页
附录A 攻读学位期间所发表的学术论文及专利目录第134-136页
致谢第136页

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