| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 绪论 | 第10-21页 |
| ·干扰素概述 | 第10-11页 |
| ·干扰素的生物学功能 | 第11-14页 |
| ·干扰素的受体及其分布 | 第14-16页 |
| ·基因工程干扰素的研究进展 | 第16-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与仪器 | 第21-25页 |
| ·实验用菌株及质粒 | 第21页 |
| ·毕赤酵母表达的培养基 | 第21-22页 |
| ·酶类和主要试剂盒 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·常用溶液的配制 | 第23-25页 |
| 3 方法 | 第25-39页 |
| ·IFN-α2b 基因的克隆与 pGEM-T-IFN-α2b 载体的构建 | 第25-29页 |
| ·pPICZα-IFN-α2b 载体的构建 | 第29-31页 |
| ·线性化质粒 pPICZα-IFN-α2b 电传孔转化感受态酵母菌 GS115 | 第31-34页 |
| ·重组酵母的高抗性筛选,Mut~+型筛选和 PCR 鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组酵母的诱导表达，SDS-PAGE 分析，Western 分析 | 第35-38页 |
| ·重组蛋白 IFN-α2b 的体外抗病毒活性测定 | 第38-39页 |
| 4 结果 | 第39-45页 |
| ·IFN-α2b 的基因序列毕赤酵母密码偏好性改造 | 第39页 |
| ·PCR 扩增 IFN-α2b 目的基因结果 | 第39-40页 |
| ·pPICZα-IFN-α2b 载体的构建和鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组酵母 pPICZα-IFN-α2b/ GS115 PCR 鉴定 | 第41-42页 |
| ·发酵及其表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第42-43页 |
| ·表达产物的Western blot 检测和体外抗病毒活性测定 | 第43-45页 |
| 5 讨论 | 第45-48页 |
| ·本文的研究意义 | 第45页 |
| ·应用酵母密码子偏好性合成 α2b-人干扰素 | 第45页 |
| ·表达载体的选择 | 第45-46页 |
| ·多拷贝重组菌的筛选 | 第46页 |
| ·SMD1168H 菌株的缺陷 | 第46-48页 |
| 总结 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录1 攻读学位期间发表论文目录 | 第54-55页 |
| 附录2 缩略词 | 第55页 |
