| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-24页 |
| 1 立题背景及意义 | 第12-18页 |
| ·自然界存在的可再生资源——纤维素 | 第12页 |
| ·纤维素的结构及其降解酶系 | 第12-14页 |
| ·结晶纤维素酶的研究现状 | 第14-17页 |
| ·产结晶纤维素酶的好氧菌 | 第15页 |
| ·产结晶纤维素酶的厌氧菌 | 第15-16页 |
| ·纤维素降解酶的作用机理 | 第16-17页 |
| ·结晶纤维素酶的研究展望 | 第17页 |
| ·研究意义 | 第17-18页 |
| 2 本论文的研究目标和主要研究内容 | 第18-19页 |
| 3 本论文采用的主要研究方法 | 第19-20页 |
| 参考文献 | 第20-24页 |
| 第一章 产结晶纤维素酶的嗜热菌的分离与鉴定 | 第24-33页 |
| 1 材料和方法 | 第25-28页 |
| ·菌种来源 | 第25页 |
| ·培养基和筛选方法 | 第25-27页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·筛选方法 | 第26-27页 |
| ·菌株鉴定方法 | 第27-28页 |
| ·菌落形态观察 | 第27页 |
| ·显微形态观察 | 第27页 |
| ·生理生化特征 | 第27页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·16S rDNA的扩增与序列分析 | 第28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-30页 |
| ·形态和培养特征 | 第28-29页 |
| ·生理生化特征 | 第29页 |
| ·16S rDNA PCR扩增和序列分析 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-33页 |
| 第二章 嗜热好氧菌TC-1菌株产结晶纤维素酶条件的研究 | 第33-47页 |
| 1 材料及方法 | 第34-40页 |
| ·实验用菌株 | 第34页 |
| ·培养基和培养方法 | 第34-35页 |
| ·培养基 | 第34-35页 |
| ·培养方法 | 第35页 |
| ·试剂和仪器 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36页 |
| ·粗酶制备及酶活测定方法 | 第36-37页 |
| ·粗酶液的制备 | 第36页 |
| ·结晶纤维素酶的酶活测定 | 第36页 |
| ·葡萄糖标准曲线的制作方法 | 第36-37页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第37-38页 |
| ·溶液 | 第37页 |
| ·检测 | 第37-38页 |
| ·产酶条件试验 | 第38-39页 |
| ·菌体生长测定 | 第38页 |
| ·不同碳源对菌的生长和产酶的影响 | 第38页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第38-39页 |
| ·结晶纤维素酶的定位试验 | 第39-40页 |
| ·不同细胞组分的制备 | 第39页 |
| ·底物吸附物的酶活性分析 | 第39-40页 |
| ·其他细胞组分的酶活性分析 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-43页 |
| ·不同碳源对菌的生长和产酶的影响 | 第40-41页 |
| ·菌株生长曲线的测定 | 第41页 |
| ·接种量对酶产生的影响 | 第41-42页 |
| ·结晶纤维素酶的定位 | 第42-43页 |
| ·底物吸附物的酶活性分析 | 第42页 |
| ·其他细胞组分的酶活性分析 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 第三章 嗜热菌TC-1菌株的结晶纤维素酶的纯化 | 第47-61页 |
| 1 材料及方法 | 第49-54页 |
| ·菌株、培养培基和养方法 | 第49页 |
| ·试剂和仪器 | 第49-50页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·主要仪器设备 | 第49-50页 |
| ·结晶纤维素酶酶活测定方法 | 第50页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第50页 |
| ·蛋白电泳 | 第50-52页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第50-51页 |
| ·梯度非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第51-52页 |
| ·酶分离纯化方法 | 第52-53页 |
| ·粗酶液的制备 | 第52页 |
| ·DEAE-Sephrose Fast Flow阴离子交换柱层析 | 第52页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第52-53页 |
| ·HW-55F-Toyopearl分子筛 | 第53页 |
| ·超滤浓缩 | 第53页 |
| ·结晶纤维素酶的定性 | 第53-54页 |
| ·PAGE凝胶电泳活性检测 | 第53页 |
| ·酶的原位复性实验 | 第53-54页 |
| ·酶分子大小的确定方法 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-58页 |
| ·酶的初步分离纯化 | 第54-56页 |
| ·DEAE-Sephrose Fast Flow阴离子交换柱层析 | 第54-55页 |
| ·HW-55F-Toyopearl分子筛层析 | 第55-56页 |
| ·结晶纤维素酶的定性 | 第56-58页 |
| ·PAGE凝胶电泳活性检测 | 第56-57页 |
| ·酶的复性实验 | 第57-58页 |
| ·酶分子质量的测定 | 第58页 |
| 3 讨论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 第四章 TC-1菌株的结晶纤维素酶的酶学性质分析 | 第61-71页 |
| 1 材料及方法 | 第62-66页 |
| ·试剂和仪器 | 第62-64页 |
| ·主要试剂 | 第62-63页 |
| ·主要仪器设备 | 第63-64页 |
| ·酶活测定方法 | 第64-65页 |
| ·纤维素酶的酶活测定 | 第64页 |
| ·木聚糖酶的酶活测定 | 第64-65页 |
| ·结晶纤维素酶的性质分析 | 第65-66页 |
| ·反应时间曲线 | 第65页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第65-66页 |
| ·pH对酶活力的影响 | 第66页 |
| ·其他酶活性 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-68页 |
| ·结晶纤维素酶的最适反应条件 | 第66-67页 |
| ·结晶纤维素酶的稳定性 | 第67-68页 |
| ·其他酶活性 | 第68页 |
| 3 讨论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 论文的主要结论 | 第71-72页 |
| 论文的创新点 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第74-75页 |
| 附录 | 第75页 |
| 附录一:TC-1菌株的16S rDNA sequences(1547bp) | 第75页 |
