摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-24页 |
·启动子概述 | 第8页 |
·植物启动子的结构 | 第8-11页 |
·转录起始位点 | 第8-9页 |
·TATA 盒 | 第9页 |
·一般上游元件 | 第9-11页 |
·特有上游元件 | 第11页 |
·植物启动子分类及应用 | 第11-19页 |
·组成型启动子 | 第12-13页 |
·诱导型启动子 | 第13-16页 |
·组织特异性启动子 | 第16-17页 |
·启动子的人工改造及其应用前景 | 第17-19页 |
·启动子研究方法 | 第19-21页 |
·5′ 端缺失法 | 第19-20页 |
·内部缺失突变法 | 第20页 |
·衔接物扫描突变法 | 第20-21页 |
·定点突变法 | 第21页 |
·CMO 基因 | 第21-24页 |
第二章 CMO 基因启动子序列分析及缺失表达载体的构建 | 第24-36页 |
·实验材料 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-30页 |
·CMO 基因启动子序列分析 | 第24页 |
·CMO 基因启动子5’端缺失序列的获得 | 第24-28页 |
·各缺失片段与 GUS 基因融合表达载体的构建 | 第28-30页 |
·各缺失片段及pCAMlBIA1301 质粒的双酶切 | 第28页 |
·酶切产物的回收 | 第28-29页 |
·各缺失片段与载体片段的连接 | 第29页 |
·连接产物的转化 | 第29-30页 |
·转化产物的检测 | 第30页 |
·结果与分析 | 第30-35页 |
·C M O 基因启动子序列分析 | 第30-32页 |
·CMO 基因启动子5’端缺失序列的获得 | 第32-33页 |
·各缺失片段与 GUS 基因融合表达载体的构建 | 第33-35页 |
·PC R 检测及酶切检测 | 第35页 |
·小结 | 第35-36页 |
第三章 启动子缺失片段载体转化烟草及转基因烟草的检测 | 第36-44页 |
·实验材料 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-39页 |
·工程菌的构建 | 第36-37页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第37页 |
·工程菌的鉴定 | 第37页 |
·农杆菌介导转化烟草 | 第37-38页 |
·转化用烟草叶片的预培养 | 第37页 |
·农杆菌的培养 | 第37页 |
·浸染 | 第37-38页 |
·抗性芽的筛选及转基因植株在 Hv 中的生根培养 | 第38页 |
·转基因烟草的检测 | 第38-39页 |
·PCR 检测 | 第38-39页 |
·GUS 组织化学染色检测 | 第39页 |
·结果 | 第39-42页 |
·工程菌的构建 | 第39-40页 |
·农杆菌介导转化烟草 | 第40页 |
·转基因烟草的检测 | 第40-42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
·关于农杆菌转化效率 | 第42-43页 |
·关于转基因烟草总 DN A 的提取 | 第43页 |
·关于 PCR 检测中 Taq 酶的选用 | 第43页 |
·小结 | 第43-44页 |
第四章 CMO 基因启动子不同区段盐诱导功能分析 | 第44-50页 |
·实验材料 | 第44页 |
·实验方法 | 第44-47页 |
·转基因烟草无菌苗的培养 | 第44页 |
·转基因烟草的盐处理 | 第44页 |
·GUS 组织化学分析与荧光定量分析 | 第44-47页 |
·实验结果 | 第47-48页 |
·组织化学分析结果 | 第47页 |
·GUS 酶活性的定量测定结果 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
附录 | 第55-57页 |
致谢 | 第57-58页 |