| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 本文缩写词表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| ·引言 | 第11-12页 |
| ·碱性纤维素酶的去污机理 | 第12-13页 |
| ·碱性纤维素酶的筛选方法以及生产菌株 | 第13-14页 |
| ·碱性纤维素酶的酶学性质 | 第14-16页 |
| ·碱性纤维素酶基因的测序、克隆与表达 | 第16-18页 |
| ·碱性纤维素酶的研究策略 | 第18-21页 |
| ·易错PCR | 第19页 |
| ·致突变菌株 | 第19-20页 |
| ·DNA改组技术 | 第20页 |
| ·基因家族之间的同源重组 | 第20-21页 |
| ·杂合酶 | 第21页 |
| ·碱性纤维素酶耐碱机理的研究 | 第21-23页 |
| ·本文的研究意义和主要研究内容 | 第23-25页 |
| 第二章 纤维素酶的定向进化 | 第25-39页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·材料与方法 | 第25-30页 |
| ·实验菌株和载体 | 第25页 |
| ·分子克隆用酶和生化试剂 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·PCR引物 | 第26页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·琼脂糖凝胶中DNA片段的回收 | 第27页 |
| ·T_4DNA连接酶连接反应 | 第27页 |
| ·PCR技术 | 第27-28页 |
| ·致突变菌株XL1-RED诱发突变 | 第28页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第28页 |
| ·突变子的筛选 | 第28-29页 |
| ·酶活测定方法 | 第29页 |
| ·葡萄糖浓度标准曲线的制定 | 第29-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-37页 |
| ·易错PCR和致突变菌株法建立纤维素酶突变体文库 | 第30-31页 |
| ·突变子的筛选 | 第31-32页 |
| ·偏酸性突变体GEL 18-7-12的获得及序列测定 | 第32-34页 |
| ·C-末端切除 | 第34-36页 |
| ·纤维素结合区域(CBD)的切除 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 纤维素酶的定点突变 | 第39-54页 |
| ·引言 | 第39-42页 |
| ·材料和方法 | 第42-43页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·结果和讨论 | 第43-54页 |
| ·纤维素酶Cel 18-7 212位点由Asn变为His | 第43-45页 |
| ·纤维素酶Cel 18-7 212位点由Asn变为Asp | 第45-46页 |
| ·纤维素酶Cel 18-7 140位点由His变为Gln | 第46-48页 |
| ·纤维素酶的同源模建 | 第48-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第60页 |
