| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一部分 实验部分 | 第8-62页 |
| 引言(INTRODUCTION) | 第8-10页 |
| 一 双水相体系的建立 | 第10-15页 |
| 1.材料、试剂和仪器 | 第10-11页 |
| ·材料和试剂 | 第10-11页 |
| ·仪器 | 第11页 |
| 2.实验方法 | 第11-12页 |
| 3.结果与分析 | 第12-13页 |
| ·不同分子量的PEG和硫酸铵形成的双水相系统相图绘制 | 第12页 |
| ·相图的分析 | 第12-13页 |
| ·双水相体系的原理 | 第13页 |
| 4.结论 | 第13-15页 |
| 二 双水相萃取分离尿酸酶 | 第15-39页 |
| 1.材料、试剂和仪器 | 第16-17页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·试剂 | 第16-17页 |
| ·仪器 | 第17页 |
| 2.实验方法 | 第17-25页 |
| ·菌种培养 | 第17页 |
| ·菌体破碎(超声波法) | 第17页 |
| ·尿酸酶活性测定 | 第17-18页 |
| ·蛋白含量的测定:(BRADFORD检测法) | 第18-20页 |
| ·双水相萃取尿酸酶 | 第20-23页 |
| ·酶的柱层析纯化 | 第23-24页 |
| ·酶萃取前后的纯度鉴定(SDS-PAGE) | 第24-25页 |
| 3.结果与分析 | 第25-38页 |
| ·萃取尿酸酶的最佳PEG分子量 | 第25-30页 |
| ·PEG2000浓度对酶萃取的影响 | 第30页 |
| ·(NH4)2SO4浓度对酶萃取的影响 | 第30-32页 |
| ·pH值对酶萃取的影响 | 第32-34页 |
| ·盐浓度对尿酸酶萃取的影响 | 第34-35页 |
| ·粗酶加入量对酶萃取的影响 | 第35页 |
| ·萃取实验扩大的结果 | 第35-36页 |
| ·DEAE-SEPHAROSE FF层析 | 第36-37页 |
| ·酶的纯度鉴定 | 第37-38页 |
| 4.结论 | 第38-39页 |
| 三 双水相萃取分离磷酸甘油氧化酶 | 第39-62页 |
| 1.材料、试剂与器材 | 第40-41页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40-41页 |
| ·仪器 | 第41页 |
| 2.实验方法 | 第41-48页 |
| ·菌种的培养 | 第41页 |
| ·发酵液的处理 | 第41-42页 |
| ·酶活力的测定 | 第42-43页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第43-45页 |
| ·双水相萃取磷酸甘油氧化酶 | 第45-47页 |
| ·酶的柱层析(DEAE-SEPHAROSE F.F阴离子交换层析) | 第47-48页 |
| ·磷酸甘油氧化酶的纯度鉴定(SDS-PAGE) | 第48页 |
| 3.结果与分析 | 第48-59页 |
| ·双水相萃取磷酸甘油氧化酶的最佳PEG分子量 | 第48-50页 |
| ·PEG浓度对酶萃取的影响 | 第50页 |
| ·(NH_4)_2SO_4浓度对酶萃取的影响 | 第50-52页 |
| ·PH值对酶萃取的影响 | 第52-54页 |
| ·盐浓度对磷酸甘油氧化酶萃取的影响 | 第54-55页 |
| ·粗酶加入量对酶萃取的影响 | 第55-56页 |
| ·萃取实验扩大的结果 | 第56-57页 |
| ·DEAE-SEPHAROSE F.F阴离子交换层析 | 第57页 |
| ·酶的纯度鉴定 | 第57-59页 |
| 4.结论 | 第59-62页 |
| 第二部分 综述 | 第62-89页 |
| 一 双水相萃取萃取技术的概述 | 第62-82页 |
| 1.双水相体系 | 第62-64页 |
| 2.双水相体系萃取的原理 | 第64-82页 |
| ·相图 | 第64-66页 |
| ·双水相萃取酶的原理 | 第66-69页 |
| ·双水相萃取的特点 | 第69-74页 |
| ·双水相萃取技术的应用 | 第74-80页 |
| ·双水相萃取应用的发展前景 | 第80-82页 |
| 二 尿酸酶的概述及其研究进展 | 第82-84页 |
| 1.尿酸酶的概述 | 第82-83页 |
| 2.尿酸酶的作用机制 | 第83页 |
| 3.尿酸酶的研究进展 | 第83-84页 |
| ·尿酸酶的修饰 | 第83-84页 |
| ·尿酸酶在临床上的应用 | 第84页 |
| 三 磷酸甘油氧化酶的概述及其研究进展 | 第84-89页 |
| 1.磷酸甘油氧化酶的作用机理 | 第85-86页 |
| 2.磷酸甘油氧化酶的研究进展 | 第86-89页 |
| ·产磷酸甘油氧化酶的菌种选育 | 第86页 |
| ·微生物发酵生产磷酸甘油氧化酶 | 第86-87页 |
| ·磷酸甘油氧化酶的分离纯化与酶学特性研究 | 第87页 |
| ·磷酸甘油氧化酶的结构与晶体化研究 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-91页 |
| 在读期间科研成果简介 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
