| 第一章 引言 | 第1-25页 |
| ·引言 | 第11-22页 |
| ·棉花基因组学研究 | 第11-16页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第16页 |
| ·均一化cDNA文库的构建 | 第16-17页 |
| ·均一化全长cDNA文库 | 第17-21页 |
| ·植物抗病基因同源序列RGA研究进展 | 第21-22页 |
| ·立题依据及意义 | 第22-25页 |
| ·立题依据及意义 | 第22-23页 |
| ·实验目的 | 第23-24页 |
| ·实验路线 | 第24-25页 |
| 第二章 石系亚1号全生育期均一化全长cDNA文库的构建 | 第25-46页 |
| ·材料与试剂 | 第25-26页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·化学试剂、酶及试剂盒 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-34页 |
| ·总RNA的提取 | 第26-27页 |
| ·mRNA的分离纯化 | 第27页 |
| ·cDNA的合成 | 第27页 |
| ·cDNA的均一化 | 第27-31页 |
| ·双链cDNA末端补平 | 第31-32页 |
| ·cDNA双链末端加EcoR I接头 | 第32页 |
| ·双链cDNA末端的磷酸化 | 第32页 |
| ·cDNA的胶回收 | 第32页 |
| ·cDNA与入噬菌体臂的连接 | 第32-33页 |
| ·包装 | 第33页 |
| ·文库滴度检测 | 第33页 |
| ·文库扩增 | 第33-34页 |
| ·实验结果 | 第34-44页 |
| ·总RNA的提取 | 第34-37页 |
| ·mRNA的分离 | 第37-38页 |
| ·mRNA反转录成全长cDNA | 第38-39页 |
| ·均一化 | 第39-41页 |
| ·cDNA末端削平加接头 | 第41页 |
| ·按大小回收cDNA片断 | 第41-42页 |
| ·文库滴度检测 | 第42-43页 |
| ·插入片断大小检测 | 第43页 |
| ·扩增文库的滴度检测 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| ·取样 | 第44页 |
| ·棉花总RNA的提取 | 第44页 |
| ·mRNA的纯化及反转录 | 第44-45页 |
| ·均一化全长cDNA文库 | 第45-46页 |
| 第三章 抗病基因同源序列的克隆 | 第46-55页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-47页 |
| ·简并引物设计 | 第46页 |
| ·PCR筛库程序 | 第46页 |
| ·DNA胶回收 | 第46-47页 |
| ·连接到pMD19-T载体 | 第47页 |
| ·引物对6获得的片断的组织特异性表达检测 | 第47页 |
| ·实验结果 | 第47-53页 |
| ·简并引物的设计 | 第47页 |
| ·简并引物筛库 | 第47-48页 |
| ·RGA的凝胶回收 | 第48页 |
| ·连接 | 第48页 |
| ·序列结果 | 第48页 |
| ·序列分析 | 第48-52页 |
| ·组织特异表达验证 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 创新点 | 第55-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-57页 |
| ·获得了石系亚1号全生育期的不同组织的cDNA | 第56页 |
| ·构建了石系亚1号全生育期的均一化全长cDNA文库 | 第56页 |
| ·用简并引物筛库得到了6条RGA | 第56页 |
| ·对兼并引物对6获得的序列进行了组织特异性表达的验证 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简历 | 第66页 |
