摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第一章 引言 | 第11-23页 |
·苯胺代谢途径的研究进展 | 第11-13页 |
·微生物中芳香族化合物降解基因簇转录调控的研究进展 | 第13-20页 |
·LysR-type转录调节蛋白 | 第13-15页 |
·IclR-type调控蛋白 | 第15-16页 |
·AraC-type调控蛋白 | 第16-17页 |
·GntR-type调控蛋白 | 第17-18页 |
·TetR-,MarM-和 FNR-type调控蛋白 | 第18页 |
·双成分信号家族调控蛋白 | 第18-20页 |
·苯胺降解基因簇的代谢调控研究 | 第20-22页 |
·本论文的目的意义和技术路线 | 第22-23页 |
第二章 Delftia tsuruhatensis AD9苯胺代谢关键酶活性的测定 | 第23-28页 |
·材料和方法 | 第23-25页 |
·菌株和质粒 | 第23页 |
·培养基 | 第23-24页 |
·主要仪器 | 第24页 |
·抗生素 | 第24页 |
·Clark电极测定苯胺双加氧酶酶活 | 第24页 |
·邻苯二酚双加氧酶的测定 | 第24-25页 |
·结果 | 第25-28页 |
·AD9以苯胺和邻苯二酚为唯一碳源的生长情况 | 第25-26页 |
·苯胺代谢关键酶基因的功能验证 | 第26-28页 |
第三章 Delftia tsuruhatensis AD9的苯胺降解基因簇中双启动子的结构预测和功能验证 | 第28-53页 |
·实验材料 | 第28-29页 |
·菌株和质粒 | 第28-29页 |
·培养基 | 第29页 |
·生物化学试剂、酶及试剂盒 | 第29页 |
·实验方法 | 第29-35页 |
·基因组DNA提取 | 第29-30页 |
·PCR扩增 | 第30-31页 |
·PCR产物的纯化 | 第31-32页 |
·启动子序列片段的克隆 | 第32-33页 |
·重组子的筛选与鉴定 | 第33页 |
·三亲接合 | 第33-34页 |
·β-半乳糖普酶活性的测定 | 第34页 |
·提取RNA | 第34-35页 |
·反转录PCR | 第35页 |
·结果 | 第35-46页 |
·AD9苯胺降解基因簇中LysR型调控蛋白的预测 | 第35-39页 |
·AD9苯胺降解基因簇中tadQ和tadD2的诱导型启动子的验证 | 第39-43页 |
·AD9基因簇中启动子的表达活性测定 | 第43-46页 |
·RT-PCR验证两个启动子诱导表达的情况 | 第46-50页 |
·AD9在不同培养条件下的RNA提取 | 第46页 |
·内标基因16S PCR | 第46页 |
·反转录PCR扩增两个操纵子中的基因 | 第46-50页 |
·讨论 | 第50-53页 |
第四章 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
个人简历 | 第63页 |