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Delftia tsuruhatensis AD9苯胺降解关键酶基因的功能鉴定和表达调节研究

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 引言第11-23页
   ·苯胺代谢途径的研究进展第11-13页
   ·微生物中芳香族化合物降解基因簇转录调控的研究进展第13-20页
     ·LysR-type转录调节蛋白第13-15页
     ·IclR-type调控蛋白第15-16页
     ·AraC-type调控蛋白第16-17页
     ·GntR-type调控蛋白第17-18页
     ·TetR-,MarM-和 FNR-type调控蛋白第18页
     ·双成分信号家族调控蛋白第18-20页
   ·苯胺降解基因簇的代谢调控研究第20-22页
   ·本论文的目的意义和技术路线第22-23页
第二章 Delftia tsuruhatensis AD9苯胺代谢关键酶活性的测定第23-28页
   ·材料和方法第23-25页
     ·菌株和质粒第23页
     ·培养基第23-24页
     ·主要仪器第24页
     ·抗生素第24页
     ·Clark电极测定苯胺双加氧酶酶活第24页
     ·邻苯二酚双加氧酶的测定第24-25页
   ·结果第25-28页
     ·AD9以苯胺和邻苯二酚为唯一碳源的生长情况第25-26页
     ·苯胺代谢关键酶基因的功能验证第26-28页
第三章 Delftia tsuruhatensis AD9的苯胺降解基因簇中双启动子的结构预测和功能验证第28-53页
   ·实验材料第28-29页
     ·菌株和质粒第28-29页
     ·培养基第29页
     ·生物化学试剂、酶及试剂盒第29页
   ·实验方法第29-35页
     ·基因组DNA提取第29-30页
     ·PCR扩增第30-31页
     ·PCR产物的纯化第31-32页
     ·启动子序列片段的克隆第32-33页
     ·重组子的筛选与鉴定第33页
     ·三亲接合第33-34页
     ·β-半乳糖普酶活性的测定第34页
     ·提取RNA第34-35页
     ·反转录PCR第35页
   ·结果第35-46页
     ·AD9苯胺降解基因簇中LysR型调控蛋白的预测第35-39页
     ·AD9苯胺降解基因簇中tadQ和tadD2的诱导型启动子的验证第39-43页
     ·AD9基因簇中启动子的表达活性测定第43-46页
   ·RT-PCR验证两个启动子诱导表达的情况第46-50页
     ·AD9在不同培养条件下的RNA提取第46页
     ·内标基因16S PCR第46页
     ·反转录PCR扩增两个操纵子中的基因第46-50页
   ·讨论第50-53页
第四章 结论第53-54页
参考文献第54-62页
致谢第62-63页
个人简历第63页

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