| 摘要 | 第1-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-22页 |
| ·小麦种子蛋白质研究进展 | 第9-12页 |
| ·小麦种子蛋白质组分 | 第9页 |
| ·小麦高分子量谷蛋白亚基的遗传 | 第9-10页 |
| ·不同基因位点及位点内各亚基对品质的影响 | 第10-11页 |
| ·种子蛋白质基因工程在育种中的应用 | 第11-12页 |
| ·生物技术在小麦遗传转化中的应用 | 第12-18页 |
| ·受体系统的建立 | 第12-13页 |
| ·基因枪法转化小麦研究进展 | 第13-15页 |
| ·基因枪技术的原理及应用 | 第13-14页 |
| ·用基因枪法获得的转基因小麦 | 第14页 |
| ·基因枪法转基因技术存在的问题 | 第14-15页 |
| ·农杆菌介导法 | 第15-18页 |
| ·农杆菌概述 | 第15-16页 |
| ·农杆菌介导转化的步骤、机理和特点 | 第16-17页 |
| ·农杆菌介导法转化小麦研究 | 第17-18页 |
| ·其它生物技术转化法 | 第18页 |
| ·外源基因的整合的复杂性 | 第18-19页 |
| ·小麦外源基因转化存在的主要问题 | 第19页 |
| ·提高基因表达量及减少基因沉默的方法 | 第19-22页 |
| ·使用高效的强启动子 | 第19-20页 |
| ·目的基因的改造 | 第20页 |
| ·构建含有细胞核基质结合区的表达载体提高基因表达 | 第20-21页 |
| ·细胞器转化 | 第21-22页 |
| 2 引言 | 第22-24页 |
| 3 材料与方法 | 第24-33页 |
| ·Sub5+KDEL和Sub10+KDEL高效表达载体的构建 | 第24页 |
| ·Sub5+KDEL表达载体的构建 | 第24页 |
| ·Sub10+KDEL表达载体的构建 | 第24页 |
| ·培养基及其成分 | 第24-25页 |
| ·质粒的提取 | 第25页 |
| ·转化受体来源 | 第25-26页 |
| ·基因枪法转化 | 第26-27页 |
| ·微弹的制备 | 第26页 |
| ·基因枪的准备 | 第26页 |
| ·轰击参数的设置 | 第26-27页 |
| ·轰击后材料的培养、筛选、分化及植株再生 | 第27页 |
| ·农杆菌介导法转化 | 第27-29页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的微量制备 | 第27页 |
| ·农杆菌的转化 | 第27-28页 |
| ·侵染前农杆菌菌系的培养 | 第28页 |
| ·农杆菌侵染 | 第28页 |
| ·转化材料的筛选与植株再生 | 第28-29页 |
| ·再生植株的栽培管理 | 第29页 |
| ·再生植株的鉴定 | 第29-33页 |
| ·再生植株的DNA提取 | 第29-30页 |
| ·PCR扩增及琼脂糖电泳检测 | 第30-31页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳分析(SDS-PAGE) | 第31-33页 |
| 4 结果与分析 | 第33-47页 |
| ·表达载体的构建 | 第33-36页 |
| ·Sub10+KDEL基因表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·SubS+KDEL基因表达载体的构建 | 第34-36页 |
| ·基因枪转化法 | 第36-41页 |
| ·基因枪轰击后愈伤组织处理 | 第36-37页 |
| ·不同预培养时间对转化的影响 | 第37-38页 |
| ·不同潮霉素浓度对转化的影响 | 第38页 |
| ·金粉用量对愈伤组织绿点率的影响 | 第38-39页 |
| ·靶距对愈伤组织绿点率的影响 | 第39页 |
| ·雨生植株的PCR检测 | 第39-41页 |
| ·农杆菌介导法遗传转化结果 | 第41-44页 |
| ·转基因植株再生 | 第41页 |
| ·PCR检测 | 第41-43页 |
| ·AS浓度对基因转化的影响 | 第43页 |
| ·菌液浓度对基因转化的影响 | 第43页 |
| ·侵染时间对基因转化的影响 | 第43页 |
| ·干燥处理对转化的影响 | 第43-44页 |
| ·不同质粒转化结果的比较 | 第44页 |
| ·基因枪法和农杆菌介导法转化结果的比较 | 第44页 |
| ·转基因后代的SDS-PAGE检测结果 | 第44-47页 |
| 5 结语与讨论 | 第47-58页 |
| ·基因枪法 | 第47-48页 |
| ·不同预培养天数对转化的影响 | 第47页 |
| ·不同浓度潮霉素对试验结果的影响 | 第47页 |
| ·基因枪轰击参数对转化的影响 | 第47-48页 |
| ·农杆菌介导法转化参数的影响 | 第48-49页 |
| ·外源基因表达的复杂性 | 第49-50页 |
| ·基因枪法和农杆菌介导法对转化结果的影响 | 第50-58页 |
| ABSTRACT | 第58-59页 |