一种来自植物内生芽胞杆菌的新型抗魔芋软腐病菌蛋白
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-23页 |
| ·魔芋软腐病病原生物学 | 第10页 |
| ·魔芋软腐病病原菌致病机理 | 第10-11页 |
| ·魔芋软腐病的危害 | 第11-12页 |
| ·魔芋软腐病防治的研究进展 | 第12-14页 |
| ·植物内生菌与作物抗病研究 | 第14-17页 |
| ·植物内生菌的研究进展 | 第14-15页 |
| ·枯草芽胞杆菌 | 第15-17页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化与作物抗病育种 | 第17-22页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化机理 | 第17-18页 |
| ·影响 T-DNA转移的因素 | 第18-19页 |
| ·魔芋转基因研究进展 | 第19-22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 实验材料 | 第23-26页 |
| ·植物材料、菌株及载体 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·仪器 | 第25-26页 |
| 3 实验方法 | 第26-34页 |
| ·DNA操作 | 第26-28页 |
| ·DNA的酶切和连接操作 | 第26页 |
| ·大肠杆菌质粒抽提 | 第26页 |
| ·芽胞杆菌总 DNA抽提 | 第26页 |
| ·魔芋转化植株的分子检测 | 第26-28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及常规转化 | 第28页 |
| ·魔芋软腐病内生拮抗细菌的分离与筛选 | 第28页 |
| ·内生拮抗细菌的菌种鉴定 | 第28-29页 |
| ·内生拮抗菌的内生定殖鉴定 | 第29页 |
| ·内生拮抗菌的抑病活性检测 | 第29页 |
| ·蛋白质操作 | 第29-32页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29-30页 |
| ·拮抗菌胞外蛋白的提取 | 第30页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺疑胶电泳小量纯化蛋白 | 第30页 |
| ·透析袋电泳大量纯化蛋白 | 第30-31页 |
| ·蛋白溶液浓度测定 | 第31页 |
| ·蛋白质性质分析 | 第31页 |
| ·蛋白质末端测序 | 第31-32页 |
| ·农杆菌介导的花魔芋遗传转化 | 第32-34页 |
| ·初代愈伤组织的培养 | 第32页 |
| ·愈伤组织的继代培养 | 第32页 |
| ·愈伤组织对筛选剂的敏感性试验 | 第32-33页 |
| ·魔芋愈伤组织的遗传转化 | 第33页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第33页 |
| ·植株再生 | 第33-34页 |
| 4 结果与分析 | 第34-49页 |
| ·魔芋软腐病内生拮抗细菌的筛选及其抗菌物质特性 | 第34-40页 |
| ·内生拮抗细菌的筛选与鉴定 | 第34-35页 |
| ·拮抗菌的内生定殖检测 | 第35页 |
| ·拮抗菌 BSn5的抑病活性检测 | 第35-36页 |
| ·拮抗菌BSn5胞外蛋白的提取与纯化 | 第36-37页 |
| ·抗菌蛋白 APn5的活性测定 | 第37-38页 |
| ·抗菌蛋白 APn5的性质分析 | 第38-40页 |
| ·抗菌蛋白基因的克隆与表达 | 第40-44页 |
| ·抗菌蛋白基因的克隆 | 第40-42页 |
| ·抗菌蛋白基因的表达 | 第42-44页 |
| ·农杆菌介导的花魔芋遗传转化 | 第44-49页 |
| ·花魔芋愈伤组织的继代培养 | 第44-45页 |
| ·花魔芋愈伤组织对筛选剂的敏感性试验 | 第45-46页 |
| ·花魔芋抗性愈伤组织的筛选 | 第46-47页 |
| ·转化植株的再生与 DNA分子检测 | 第47-49页 |
| 5 讨论 | 第49-52页 |
| ·抗菌蛋白 APn5 | 第49页 |
| ·内生拮抗菌 BSn5 | 第49-50页 |
| ·影响农杆菌转化效率的因索 | 第50-52页 |
| 6 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附录 | 第59-62页 |
