| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 第一章 杯状病毒研究进展 | 第14-37页 |
| ·杯状病毒概述 | 第14-19页 |
| ·杯状病毒的种类 | 第14-16页 |
| ·人杯状病毒 | 第16-19页 |
| ·杯状病毒的检测分析方法 | 第19-23页 |
| ·电镜法 | 第19-20页 |
| ·免疫学检测技术 | 第20-21页 |
| ·分子生物学检测 | 第21-23页 |
| ·杯状病毒疫苗的研究进展 | 第23-25页 |
| ·荧光定量 PCR 技术及其在兽医学中的应用 | 第25-35页 |
| ·荧光定量PCR 技术的原理 | 第26-27页 |
| ·荧光定量PCR 技术的种类 | 第27-31页 |
| ·荧光定量PCR 技术在兽医学中的应用 | 第31-35页 |
| ·论文的研究目的和研究方法 | 第35-37页 |
| 第二章 济南地区婴幼儿杯状病毒腹泻病的流行特征 | 第37-57页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·菌种 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·仪器和器材 | 第37页 |
| ·引物 | 第37-38页 |
| ·临床标本 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·标本处理 | 第38页 |
| ·轮状病毒的ELISA 检测 | 第38页 |
| ·病毒核酸(RNA)的提取 | 第38-39页 |
| ·逆转录(RT)反应 | 第39页 |
| ·杯状病毒cDNA 的PCR 检测 | 第39页 |
| ·PCR 产物的克隆 | 第39-41页 |
| ·DNA 重组体的筛选与鉴定 | 第41页 |
| ·DNA 序列分析 | 第41页 |
| ·序列比对与分析 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-55页 |
| ·腹泻粪便标本中杯状病毒的检测 | 第41-42页 |
| ·PCR 产物的克隆和cDNA 序列分析结果 | 第42-46页 |
| ·杯状病毒基因序列的亲缘性关系分析 | 第46页 |
| ·核苷酸序列的同源性分析 | 第46-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第三章 GGⅡ型诺如病毒Real-time RT-PCR检测方法的建立 | 第57-72页 |
| ·材料 | 第57-58页 |
| ·临床标本 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57页 |
| ·仪器和器材 | 第57-58页 |
| ·方法 | 第58-62页 |
| ·引物和探针的设计 | 第58页 |
| ·重组质粒标准品的制备 | 第58-59页 |
| ·病毒核酸(RNA)的提取 | 第59页 |
| ·逆转录(RT)反应 | 第59页 |
| ·常规 PCR | 第59-60页 |
| ·Real-time PCR | 第60页 |
| ·体外转录 | 第60-61页 |
| ·一步Real-time RT-PCR 反应 | 第61-62页 |
| ·Real-time RT-PCR 各项参数的评价 | 第62页 |
| ·核酸提取方法回收率的分析 | 第62页 |
| ·临床样本的检测 | 第62页 |
| ·结果 | 第62-69页 |
| ·引物与探针设计 | 第62-63页 |
| ·质粒标准品的制备 | 第63-64页 |
| ·重组质粒的双酶切鉴定、测序结果 | 第64页 |
| ·重组质粒pcDNAⅡS2-116 的DNA 拷贝数确定 | 第64页 |
| ·诺如病毒GGⅡ型常规RT-PCR 的检出限 | 第64-65页 |
| ·Real-time RT-PCR | 第65-66页 |
| ·Real-time PCR 标准曲线的建立及其灵敏度 | 第66-67页 |
| ·Real-time PCR 的特异性 | 第67页 |
| ·Real-time PCR 检测的重复性和准确性 | 第67-68页 |
| ·两步Real-time PCR 扩增效率的验证 | 第68-69页 |
| ·核酸提取方法的回收率 | 第69页 |
| ·临床腹泻粪便标本的检测 | 第69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第四章 诺如病毒衣壳蛋白基因重组腺病毒的免疫活性研究 | 第72-84页 |
| ·材料 | 第72页 |
| ·菌种及毒种 | 第72页 |
| ·细胞和实验动物 | 第72页 |
| ·试剂 | 第72页 |
| ·仪器设备 | 第72页 |
| ·方法 | 第72-75页 |
| ·重组腺病毒的扩增 | 第72-73页 |
| ·动物免疫 | 第73页 |
| ·间接 ELISA | 第73-74页 |
| ·免疫小鼠脾淋巴细胞的制备 | 第74页 |
| ·小鼠肺灌洗液、肺肝肠匀浆标本、粪便的处理 | 第74页 |
| ·Elispot(固相酶联免疫斑点技术)实验 | 第74-75页 |
| ·结果 | 第75-82页 |
| ·重组腺病毒的扩毒 | 第75页 |
| ·重组腺病毒rvAdGII4免疫小鼠后血清抗体可诱导良好的体液免疫反应 | 第75-78页 |
| ·重组腺病毒rvAdGII4免疫小鼠后可诱导黏膜免疫 | 第78-81页 |
| ·重组腺病毒rvAdGII4免疫小鼠后可诱导细胞免疫 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-83页 |
| ·小结 | 第83-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 作者简介 | 第95页 |
