中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
缩略词 | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第9-20页 |
1 立题依据和意义 | 第9页 |
2 国内外结缕草育种的技术和方法 | 第9-13页 |
·引种 | 第9-10页 |
·系统选育 | 第10-12页 |
·杂交育种 | 第12页 |
·诱变育种 | 第12页 |
·生物技术育种 | 第12-13页 |
3 细胞分裂素与衰老的关系 | 第13-15页 |
4 外源异戊烯基转移酶基因(ipt)对叶片衰老的调控 | 第15-16页 |
5 植物遗传转化研究进展 | 第16-18页 |
·植物基因工程原理 | 第16页 |
·遗传转化的转化方法 | 第16-17页 |
·遗传转化方法在结缕草上的应用 | 第17-18页 |
6 应用转基因技术培育结缕草新品种的育种方向 | 第18页 |
·延长绿期 | 第18页 |
·提高抗性 | 第18页 |
7 研究技术路线和目标 | 第18-20页 |
·研究技术路线 | 第18-19页 |
·目标 | 第19-20页 |
第二章 结缕草胚性愈伤的诱导和植株再生 | 第20-27页 |
1 材料与方法 | 第20-22页 |
·品种 | 第20页 |
·外植体制备 | 第20页 |
·培养基与培养条件 | 第20-21页 |
·数据采集 | 第21-22页 |
·电镜扫描 | 第22页 |
2 结果与分析 | 第22-23页 |
·愈伤组织的诱导与继代培养 | 第22-23页 |
·愈伤组织的分化与植株再生 | 第23页 |
3 讨论 | 第23-27页 |
第三章 基因枪介导的转P_(SAG12-ipt)基因结缕草的获得及其衰老特性分析 | 第27-40页 |
1 材料与方法 | 第27-33页 |
·结缕草品种 | 第27页 |
·培养基 | 第27-28页 |
·受体(胚性愈伤组织)的制备 | 第28页 |
·质粒 | 第28页 |
·质粒DNA的制备 | 第28-30页 |
·抗生长素G418浓度的筛选 | 第30页 |
·基因枪转化 | 第30-31页 |
·结缕草总DNA的提取(CTAB法) | 第31页 |
·对抗性筛选基因NTPⅡ的PCR扩增 | 第31-32页 |
·Southern杂交 | 第32-33页 |
·植物激素细胞分裂素和脱落酸的测定 | 第33页 |
·可溶性蛋白含量的测定 | 第33页 |
·离体叶片的“滞绿”效果 | 第33页 |
2 结果与分析 | 第33-38页 |
·G418浓度的筛选 | 第33-34页 |
·阳性植株的获得 | 第34页 |
·转基因植株的获得与分子鉴定 | 第34页 |
·转基因植株内源细胞分裂素和脱落酸的分析 | 第34-36页 |
·可溶性蛋白分析 | 第36-37页 |
·离体叶片的“滞绿”效果 | 第37-38页 |
3 讨论 | 第38-40页 |
第四章 农杆菌介导的P_(SAG12-ipt)嵌合基因在结缕草中的转化 | 第40-48页 |
1 材料与方法 | 第40-42页 |
·品种 | 第40页 |
·质粒 | 第40-41页 |
·转化受体的制备 | 第41页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第41页 |
·质粒PSG529转入农杆菌 | 第41页 |
·阳性克隆的鉴定和保存 | 第41页 |
·愈伤组织的转化与抗性植株的筛选 | 第41-42页 |
·分子鉴定 | 第42页 |
·植物激素细胞分裂素测定 | 第42页 |
·叶绿素降解 | 第42页 |
2 结果与分析 | 第42-45页 |
·转化与筛选 | 第42-43页 |
·分子鉴定 | 第43页 |
·转基因植株内源细胞分裂素含量 | 第43-44页 |
·拷贝数 | 第44页 |
·叶绿素降解 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-48页 |
第五章 遮阴和低温对转基因结缕草中P_(SAG12-ipt)的诱导与表达 | 第48-56页 |
1 材料与方法 | 第48-51页 |
·转基因株系 | 第48页 |
·遮阴处理 | 第48页 |
·低温处理 | 第48页 |
·叶绿素含量的测定 | 第48-49页 |
·细胞分裂素的测定 | 第49页 |
·结缕草总RNA的提取和纯化 | 第49页 |
·变性胶鉴定RNA的完整性 | 第49-50页 |
·Northern杂交 | 第50-51页 |
2 结果与分析 | 第51-54页 |
·遮阴处理 | 第51-53页 |
·低温处理 | 第53-54页 |
3 讨论 | 第54-56页 |
·遮阴和低温对SAG12启动子的诱导 | 第54-55页 |
·嵌合基因P_(SAG12-ipt)与结缕草的遗传改良 | 第55-56页 |
第六章 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简介 | 第64页 |